摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-8页 |
前言 | 第11-23页 |
材料与方法 | 第23-44页 |
1 实验材料 | 第23-27页 |
1.1 实验试剂 | 第23-24页 |
1.2 实验抗体 | 第24页 |
1.3 主要溶液配制 | 第24-26页 |
1.4 实验仪器 | 第26-27页 |
1.5 临床标本 | 第27页 |
2 实验方法 | 第27-44页 |
2.1 FLS的获得与培养 | 第27-28页 |
2.2 Q-PCR检测基因的表达 | 第28-30页 |
2.3 Western blot检测基因表达 | 第30-32页 |
2.4 ELISA检测细胞因子的分泌 | 第32-33页 |
2.5 TRIM3过表达载体的构建 | 第33-36页 |
2.6 FoxO3a过表达载体的构建 | 第36-39页 |
2.7 TRIM3 shRNA的构建 | 第39-40页 |
2.8 FoxO3a shRNA的构建 | 第40-42页 |
2.9 过表达载体和shRNA转染FLS细胞 | 第42页 |
2.10 流式分选T细胞 | 第42页 |
2.11 流式分选自身反应性B细胞 | 第42-43页 |
2.12 CCK8检测细胞增殖 | 第43页 |
2.13 Pull-down检测TRIM3和Fox O3a间的互作关系 | 第43页 |
2.14 统计学分析 | 第43-44页 |
实验结果 | 第44-55页 |
第一部分 TRIM3对FLS细胞及T、B细胞生物学活性的影响 | 第44-49页 |
1 TRIM3在RA中表达下调 | 第44页 |
2 TRIM3抑制FLS细胞因子的分泌 | 第44-45页 |
3 TRIM3通过p38通路抑制FLS的增殖 | 第45-46页 |
4 TRIM3过表达抑制T细胞因子的分泌 | 第46-47页 |
5 TRIM3抑制B细胞活化和增殖 | 第47-49页 |
第二部分 FoxO3a对FLS细胞及T、B细胞生物学活性的影响 | 第49-55页 |
1 FoxO3a在RA中表达下调 | 第49页 |
2 FoxO3a过表达抑制FLS增殖 | 第49-50页 |
3 FoxO3a抑制FLS的IL-1β、IL-6 和TNF-α 的分泌 | 第50-51页 |
4 FoxO3a不影响T细胞细胞因子的分泌 | 第51-53页 |
5 FoxO3a抑制B细胞的增殖 | 第53页 |
6 FoxO3a促进TRIM3的表达上调 | 第53页 |
7 在RA中FoxO3a与TRIM3的表达变化呈正相关 | 第53-54页 |
8 FoxO3a与TRIM3蛋白无相互结合 | 第54-55页 |
讨论 | 第55-58页 |
总结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-70页 |
文献综述 | 第70-96页 |
参考文献 | 第81-96页 |
攻读学位期间本人出版或公开发表的论著论文 | 第96-97页 |
中英文缩略词表 | 第97-98页 |
致谢 | 第98-99页 |