内容提要 | 第1-7页 |
第一章 前言 | 第7-18页 |
·腺病毒简介 | 第7-11页 |
·腺病毒的分子生物学 | 第7-9页 |
·腺病毒生活周期 | 第9-10页 |
·腺病毒的细胞转化作用 | 第10-11页 |
·基因治疗简介 | 第11-12页 |
·基因治疗载体 | 第11-12页 |
·腺病毒作为基因治疗载体 | 第12页 |
·本论文设计的构思 | 第12-18页 |
·腺病毒纤维蛋白(fiber)结构 | 第13-14页 |
·腺病毒纤维蛋白头节区(knob)结构 | 第14-15页 |
·腺病毒HI-loop 中插入外源基因的可行性 | 第15页 |
·实验思路 | 第15-16页 |
·主要技术路线和方案 | 第16-18页 |
第二章 实验材料和方法 | 第18-30页 |
·材料、仪器和试剂 | 第18-21页 |
·材料 | 第18-19页 |
·主要仪器 | 第19-20页 |
·常用试剂配置 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-30页 |
·质粒的小量提取 | 第21-23页 |
·大肠杆菌E.coli 化学感受态的制备 | 第23页 |
·大肠杆菌E.coli 电转感受态的制备 | 第23-24页 |
·连接产物转化E.coli 电转感受态细胞 | 第24-25页 |
·PCR | 第25页 |
·突变PCR | 第25-26页 |
·利用LIPOFECTAMINE 2000 进行转染 | 第26页 |
·重组腺病毒的扩增、纯化及滴度测定 | 第26-28页 |
·重组腺病毒荧光素酶表达的检测 | 第28-30页 |
第三章 结果与讨论 | 第30-64页 |
·重组腺病毒AD5-LUC 的构建及鉴定 | 第30-43页 |
·质粒pT-SM 质粒的构建及鉴定 | 第30-31页 |
·质粒pT-SM-KBX 的构建及鉴定 | 第31-33页 |
·质粒pT-SX 的构建及鉴定 | 第33-34页 |
·pShuttle 载体的改造 | 第34-42页 |
·重组腺病毒质粒Ad5-luc 的构建与鉴定 | 第42-43页 |
·重组腺病毒AD5-LUC-RGD 的构建及鉴定 | 第43-51页 |
·质粒pT-SM-RGD 的构建及鉴定 | 第44-47页 |
·质粒pT-SX-RGD的构建及鉴定 | 第47-49页 |
·质粒Ad5-luc-RGD 的构建及鉴定 | 第49-51页 |
·重组腺病毒AD5-LUC-RGD-MU 的构建及鉴定 | 第51-54页 |
·质粒pT-SM-RGD-MU 的构建及鉴定 | 第51-52页 |
·质粒pT-SX-RGD-MU 的构建及鉴定 | 第52-53页 |
·质粒Ad5-luc-RGD-MU 的构建及鉴定 | 第53-54页 |
·重组腺病毒AD5-LUC 的扩增、纯化及滴度测定 | 第54-57页 |
·重组腺病毒Ad5-luc 的扩增 | 第54-55页 |
·重组腺病毒Ad5-luc 的纯化和腺病毒特异性鉴定 | 第55-57页 |
·重组腺病毒AD5-LUC-RGD 扩增、纯化及滴度测定 | 第57页 |
·重组腺病毒Ad5-luc-RGD 扩增、纯化 | 第57页 |
·重组腺病毒Ad5-luc-RGD 滴度测定 | 第57页 |
·重组腺病毒AD5-LUC 和AD5-LUC-RGD 感染效果的比较 | 第57-61页 |
·重组腺病毒Ad5-luc 感染Hela 和FaDu 细胞 | 第59页 |
·重组腺病毒Ad5-luc-RGD 感染Hela 和FaDu 细胞 | 第59-60页 |
·重组腺病毒Ad5-luc 和Ad5-luc-RGD 感染效率比较 | 第60-61页 |
·工作小结 | 第61-62页 |
·前景展望 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-68页 |
摘要 | 第68-72页 |
ABSTRACT | 第72-76页 |
致谢 | 第76页 |