| 论文独创性声明 | 第1页 |
| 关于论文使用授权的声明 | 第2-3页 |
| 目录 | 第3-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-16页 |
| ·禽类正常菌群的分布及其类型 | 第10-11页 |
| ·正常菌群的生理作用 | 第11页 |
| ·正常菌群的定量技术 | 第11-16页 |
| ·依赖于培养过程的经典技术 | 第11-12页 |
| ·不需要培养过程的定量方法 | 第12页 |
| ·应用于微生物群落定量研究的分子生物学方法 | 第12-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-23页 |
| ·实验材料 | 第16-17页 |
| ·实验动物 | 第16页 |
| ·实验菌株及病毒株 | 第16页 |
| ·主要仪器 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16-17页 |
| ·主要试剂的配制 | 第17页 |
| ·方法 | 第17-23页 |
| ·参考菌株的培养 | 第17-18页 |
| ·引物和探针的设计与合成 | 第18页 |
| ·参考菌株DNA的提取 | 第18-19页 |
| ·免疫接种、样品采集和样品细菌总DNA的提取 | 第19-20页 |
| ·常规PCR反应 | 第20页 |
| ·常规PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测、测序及回收纯化 | 第20-21页 |
| ·TaqMan探针实时荧光定量PCR检测短小芽孢杆菌和两双歧杆菌的方法建立 | 第21-22页 |
| ·两双歧杆菌和短小芽孢杆菌TaqMan探针实时荧光定量PCR标准曲线的制作 | 第22页 |
| ·TaqMan探针实时荧光定量PCR对鸭瘟弱毒免疫鸭消化道和呼吸道内双歧杆菌、芽孢杆菌及肠球菌的检测 | 第22-23页 |
| 3 实验结果 | 第23-55页 |
| ·引物和探针设计结果 | 第23页 |
| ·常规PCR引物设计结果 | 第23页 |
| ·实时荧光定量PCR引物和探针设计结果 | 第23页 |
| ·常规PCR反应及产物测序结果 | 第23-24页 |
| ·双歧杆菌常规PCR反应及产物测序结果 | 第23-24页 |
| ·芽孢杆菌常规PCR反应及产物测序结果 | 第24页 |
| ·TaqMan探针实时荧光定量PCR检测两双歧杆菌、短小芽孢杆菌的方法建立 | 第24-28页 |
| ·双歧杆菌和芽孢杆菌TaqMan探针实时荧光定量PCR Mg~(2+)和探针的优化结果 | 第25页 |
| ·双歧杆菌和芽孢杆菌TaqMan探针实时荧光定量PCR方法的特异性测定结果 | 第25页 |
| ·双歧杆菌和芽孢杆菌TaqMan探针实时荧光定量PCR的敏感性测定结果 | 第25-26页 |
| ·双歧杆菌和芽孢杆菌TaqMan探针实时荧光定量PCR标准曲线的制作 | 第26-28页 |
| ·TaqMan探针实时荧光定量PCR对鸭瘟弱毒免疫鸭消化道和呼吸道内双歧杆菌、芽孢杆菌及肠球菌的定量检测 | 第28-55页 |
| ·双歧杆菌的定量检测 | 第28-37页 |
| ·芽孢杆菌的定量检测 | 第37-46页 |
| ·肠球菌的定量检测 | 第46-55页 |
| 4 讨论 | 第55-63页 |
| ·实时荧光定量PCR引物和探针的设计 | 第55页 |
| ·肠道内容物细菌DNA的提取 | 第55页 |
| ·常规PCR产物测序与引物和探针的验证 | 第55-56页 |
| ·TaqMan探针实时荧光定量PCR的优化结果 | 第56页 |
| ·双歧杆菌和芽孢杆菌TaqMan探针的敏感性 | 第56页 |
| ·TaqMan探针实时荧光定量PCR标准曲线的制作 | 第56-57页 |
| ·对照组鸭消化道和呼吸道内双歧杆菌、芽孢杆菌和肠球菌的定量检测 | 第57-60页 |
| ·对照组鸭消化道和呼吸道内双歧杆菌的定量检测 | 第57-58页 |
| ·对照组鸭消化道和呼吸道内芽孢杆菌的定量检测 | 第58-59页 |
| ·对照组鸭消化道和呼吸道内肠球菌的定量检测 | 第59-60页 |
| ·免疫接种鸭消化道和呼吸道内双歧杆菌、芽孢杆菌和肠球菌的数量变化 | 第60-62页 |
| ·免疫接种同居组鸭消化道和呼吸道内双歧杆菌、芽孢杆菌和肠球菌的数量变化 | 第62-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 6 参考文献 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第69页 |
