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樱桃主要病毒脱除和分子生物学检测技术研究

1 前言第1-21页
 1.1 研究的目的、意义和方法第9-12页
 1.2 植物病毒脱除技术研究进展第12-15页
  1.2.1 茎尖组织培养法脱除植物病毒第12-13页
  1.2.2 微体嫁接法脱除植物病毒第13页
  1.2.3 温度处理脱除植物病毒第13-14页
  1.2.4 化学药剂法脱除植物病毒第14页
  1.2.5 植物病毒脱除方法的综合应用第14-15页
 1.3 植物病毒检测方法研究进展第15-21页
  1.3.1 生物学方法检测植物病毒研究进展第15-16页
  1.3.2 电子显微镜技术检测植物病毒研究进展第16页
  1.3.3 血清学方法检测植物病毒研究进展第16-17页
  1.3.4 分子生物学方法检测植物病毒研究进展第17-20页
   1.3.4.1 核酸分子杂交技术第17-18页
   1.3.4.2 双链RNA (dsRNA) 电泳技术第18页
   1.3.4.3 多聚酶链式反应技术 (Polymerase Chain Reaction)第18-19页
   1.3.4.4 几种分子生物学方法检测灵敏度比较分析第19-20页
  1.3.5 植物病毒检测方法小结第20-21页
2 欧洲甜樱桃品种‘6-7’组织培养体系的建立第21-45页
 2.1 材料和方法第21-24页
  2.1.1 试验材料第21页
  2.1.2 试验方法第21-24页
   2.1.2.1 ‘6-7’的初代培养第21-22页
   2.1.2.2 ‘6-7’的继代和增殖培养第22-23页
   2.1.2.3 生根培养第23-24页
   2.1.2.4 炼苗和移栽第24页
 2.2 结果与分析第24-41页
  2.2.1 初代培养第24-31页
   2.2.1.1 接种时期及基本培养基的选择第24-28页
   2.2.1.2 植物生长调节物质第28-31页
  2.2.2 继代与增殖培养第31-36页
   2.2.2.1 转换基本培养基对‘6-7’组培苗生长的影响第31-33页
   2.2.2.2 植物生长调节物质配比筛选试验第33-36页
  2.2.3 生根培养第36-39页
   2.2.3.1 组培苗的接种形态对生根的影响第36页
   2.2.3.2 基本培养基对‘6-7’生根的影响第36-37页
   2.2.3.3 不同培养方式对‘6-7’组培苗生根的影响第37-38页
   2.2.3.4 ‘6-7’组培苗生根的生长素筛选第38-39页
  2.2.4 炼苗和移栽第39-41页
   2.2.4.1 炼苗时间对移栽成活率的影响第39-40页
   2.2.4.2 基质对移栽成活率的影响第40-41页
 2.3 讨论第41-44页
  2.3.1 不同培养基在‘6-7’组织培养体系中的作用第41-42页
  2.3.2 驯化与老化第42-43页
  2.3.3 关于樱桃组培苗的生根第43-44页
 2.4 小结第44-45页
3 ACLSV和PNRSV RT-PCR检测体系的建立第45-58页
 3.1 试验材料和方法第45-48页
  3.1.1 材料第45页
  3.1.2 试剂第45-46页
  3.1.3 方法第46-48页
   3.1.3.1 樱桃叶片总RNA提取第46-47页
   3.1.3.2 总RNA含量、纯度和完整性测定第47页
   3.1.3.3 逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检验病毒RNA的逆转录活性第47-48页
   3.1.3.4 RT-PCR检测体系优化第48页
 3.2 结果与分析第48-55页
  3.2.1 总RNA含量、纯度和完整性测定第48-49页
  3.2.2 逆转录-聚合酶链式反应 (RT-PCR) 检验病毒RNA的逆转录活性第49页
  3.2.3 逆转录-聚合酶链式反应 (RT-PCR) 检测体系优化第49-55页
   3.2.3.1 PNRSV RT-PCR检测体系优化第50-53页
   3.2.3.2 ACLSV RT-PCR检测体系优化第53-55页
 3.3 讨论第55-57页
 3.4 小结第57-58页
4 樱桃主要病毒脱除技术研究第58-79页
 4.1 材料和方法第59-61页
  4.1.1 试验材料第59页
  4.1.2 病毒脱除方法研究第59-61页
   4.1.2.1 微茎尖组织培养脱除樱桃病毒第59页
   4.1.2.2 组培苗恒温热处理结合茎尖培养第59-60页
   4.1.2.3 昼夜变温热处理结合茎尖培养第60页
   4.1.2.4 低温长期培养结合茎尖培养第60页
   4.1.2.5 化学药剂处理结合茎尖培养第60-61页
 4.2 结果与分析第61-74页
  4.2.1 微茎尖组织培养脱除病毒第61-63页
  4.2.2 恒温热处理结合茎尖培养第63-68页
   4.2.2.1 处理温度对成活率和脱毒率的影响第63-65页
   4.2.2.2 处理时间对成活率和脱毒率的影响第65-68页
  4.2.3 昼夜变温热处理结合茎尖培养第68-71页
  4.2.4 4℃低温长期培养结合茎尖培养第71-73页
  4.2.5 化学药剂法脱除病毒第73-74页
 4.3 讨论第74-77页
  4.3.1 热处理脱毒第74页
  4.3.2 关于药剂脱毒第74-75页
  4.3.3 培养基成分对组织培养脱除病毒的影响第75-76页
  4.3.4 检测方法对脱毒率的影响第76-77页
 4.4 小结第77-79页
结论第79-81页
参考文献第81-89页
附录第89-94页
致谢第94页

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