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HMW-Glu(1Dx5、1Dy10)亚基基因在大肠杆菌中的融合表达

摘要第1-8页
1.文献综述第8-15页
 1.1 小麦高分子量谷蛋白亚基研究进展第8-10页
  1.1.1 小麦高分子量谷蛋白亚基概述第8页
  1.1.2 小麦高分子量谷蛋白亚基的遗传第8-9页
  1.1.3 小麦高分子量谷蛋白亚基与烘烤品质的关系第9-10页
 1.2 HMW—GS(1DX5+1DY10)亚基基因转化小麦的研究进展第10页
 1.3 载体简介及调控机制第10-11页
  1.3.1 pRSET-A载体第10-11页
  1.3.2 调控机制第11页
 1.4 外源基因在大肠杆菌中的表达第11-14页
  1.4.1 启动子(promoter)的选择第11-12页
  1.4.2 分子伴侣的作用第12-13页
  1.4.3 二硫键的形成第13页
  1.4.4 提高活性蛋白表达策略第13-14页
 1.5 包涵体的产生及复性研究第14-15页
2.引言第15-16页
3.实验材料与方法第16-24页
 3.1 菌株与质粒第16页
 3.2 酶和化学试剂第16页
 3.3 基因第16页
 3.4 实验方法第16-24页
  3.4.1 基因的亚克隆技术第16-19页
  3.4.2 培养基配制第19页
  3.4.3 质粒的提取及纯化第19-20页
  3.4.4 琼脂糖凝胶电泳第20页
  3.4.5 菌体的培养第20-21页
  3.4.6 蛋白质提取及煮样第21页
  3.4.7 表达组分分析第21页
  3.4.8 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第21-23页
  3.4.9 发酵条件的优化第23-24页
4.结果与分析第24-38页
 4.1 亚克隆质粒pET-17B载体+SUB5、SUB10目的基因的构建第24-25页
 4.2 表达载体的构建第25-32页
 4.3 麦谷蛋白SUB5,SUB10基因在大肠杆菌中的克隆及融合表达第32页
 4.4 发酵条件的优化第32-38页
5.结论与讨论第38-40页
 5.1 结论第38页
 5.2 讨论第38-40页
  5.2.1 培养条件对外源基因表达的影响第38-39页
  5.2.2 目的蛋白可溶组分的纯化和包涵体的纯化第39-40页
参考文献第40-44页
英文摘要第44-45页
附录第45-46页
 测序结果:SUB10第45-46页
 测序结果:SUB5第46页

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