| 致谢 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-20页 |
| 上篇 文献综述 | 第20-38页 |
| 第一章 兰花育种技术研究及应用 | 第20-24页 |
| 1.杂交育种 | 第20-21页 |
| 2.诱变育种 | 第21页 |
| 3.体细胞杂交 | 第21页 |
| 4.基因工程育种 | 第21-22页 |
| 5.人工种子生产 | 第22-23页 |
| 6.兰花杂交种登记和品种评审制度 | 第23-24页 |
| 第二章 兰花快繁技术的研究及应用进展 | 第24-29页 |
| 1.兰花种子的无菌播种技术 | 第24-25页 |
| 2.组织培养技术 | 第25-27页 |
| 3.兰花细胞工程技术 | 第27-28页 |
| 4.兰花产业化的现状与未来 | 第28-29页 |
| 第三章 兰花主要病害调查 | 第29-33页 |
| 1.常见真菌性病害 | 第29-30页 |
| ·疫病 | 第29页 |
| ·根腐病 | 第29页 |
| ·炭疽病 | 第29-30页 |
| ·叶枯病 | 第30页 |
| ·煤烟病 | 第30页 |
| 2.常见细菌性病害 | 第30-31页 |
| ·软腐病 | 第30页 |
| ·兰花蘖腐病 | 第30-31页 |
| ·兰花褐腐病 | 第31页 |
| ·兰花褐斑病 | 第31页 |
| 3.常见病毒性病害 | 第31-33页 |
| ·毒素病 | 第31-32页 |
| ·兰花环斑病 | 第32页 |
| ·兰花丛枝病 | 第32-33页 |
| 第四章 农杆菌介导单子叶植物基因转化 | 第33-38页 |
| 1. 农杆菌对单子叶植物转化 | 第33-34页 |
| 2.影响农杆菌转化单子叶植物的因素 | 第34-35页 |
| 3.实现农杆菌对单子叶植物转化的途径 | 第35-38页 |
| 下篇研究报告 | 第38-102页 |
| 第五章 蝴蝶兰离体叶片诱导植株再生体系的建立 | 第38-50页 |
| 1.前言 | 第38页 |
| 2.材料与方法 | 第38-40页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-40页 |
| ·实验设计 | 第39-40页 |
| ·无菌体系的建立 | 第39页 |
| ·种胚无菌播种获得无菌体系 | 第39页 |
| ·花梗苗和花梗芽的诱导 | 第39页 |
| ·丛生芽诱导体系的建立 | 第39页 |
| ·叶盘植株的分化和再生 | 第39-40页 |
| ·类原球体的诱导 | 第39-40页 |
| ·类原球体的增殖和分化 | 第40页 |
| ·植株再生 | 第40页 |
| ·计算方法 | 第40页 |
| 3.结果与分析 | 第40-45页 |
| ·无菌播种幼苗的获得 | 第40-41页 |
| ·丛生芽诱导体系的建立 | 第41-43页 |
| ·植物激素对花梗营养芽诱导的影响 | 第41-42页 |
| ·花梗不同部位节芽的诱导效果 | 第42页 |
| ·植物激素对丛生芽增殖的影响 | 第42-43页 |
| ·植物激素对叶片诱导类原球体的影响 | 第43-45页 |
| ·基本培养基对类原球体的增殖和分化影响 | 第45页 |
| ·蔗糖浓度对植株再生的影响 | 第45页 |
| 4.讨论 | 第45-50页 |
| 第六章 大花蕙兰体细胞胚胎发生和植株再生 | 第50-62页 |
| 1.前言 | 第50页 |
| 2.材料与方法 | 第50-52页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-52页 |
| ·丛生芽诱导体系的建立 | 第51页 |
| ·体细胞胚胎的诱导 | 第51页 |
| ·实验设计 | 第51页 |
| ·石蜡切片方法 | 第51页 |
| ·计算方法 | 第51-52页 |
| 3.结果与分析 | 第52-57页 |
| ·各品种芽增殖情况的总体特征 | 第52页 |
| ·不同基因型繁殖系数的差异性分析 | 第52-54页 |
| ·不同激素组合及浓度对愈伤组织诱导和体胚发生的影响 | 第54-55页 |
| ·基因型对愈伤组织诱导率和胚胎发生率的影响 | 第55-57页 |
| ·体胚发生的组织学观察 | 第57页 |
| 4.讨论 | 第57-62页 |
| 第七章 文心兰愈伤组织诱导及其分化系统的建立 | 第62-70页 |
| 1.前言 | 第62页 |
| 2.材料与方法 | 第62-63页 |
| ·材料 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-63页 |
| ·花梗腋芽的诱导 | 第62页 |
| ·愈伤组织的形成及分化 | 第62-63页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第62页 |
| ·愈伤组织的分化 | 第62-63页 |
| ·植株再生 | 第63页 |
| ·计算方法 | 第63页 |
| 3.结果与分析 | 第63-68页 |
| ·植物激素对文心兰花梗启动分化的影响 | 第63页 |
| ·文心兰花梗不同部位营养芽的诱导效果 | 第63-64页 |
| ·植物激素和光照条件对文心兰幼苗茎段愈伤诱导的影响 | 第64-66页 |
| ·植物激素和基本培养基对文心兰愈伤组织分化的影响 | 第66页 |
| ·文心兰状苗生根和出瓶移栽 | 第66-68页 |
| 4.讨论 | 第68-70页 |
| 第八章 蝴蝶兰、大花蕙兰和文心兰对抗生素的敏感性反应 | 第70-76页 |
| 1.材料与方法 | 第70-71页 |
| ·材料 | 第70页 |
| ·方法 | 第70-71页 |
| ·培养基 | 第70页 |
| ·接种 | 第70-71页 |
| ·数据统计方法 | 第71页 |
| 2.结果与分析 | 第71-74页 |
| ·Cef对蝴蝶兰、大花蕙兰和文心兰形态分化的影响 | 第71-72页 |
| ·Km对蝴蝶兰、大花蕙兰和文心兰形态分化的影响 | 第72-73页 |
| ·Km对蝴蝶兰、大花蕙兰和文心兰生根的影响 | 第73-74页 |
| 3.讨论 | 第74-76页 |
| 第九章 农杆菌介导双价抗病基因转化蝴蝶兰 | 第76-89页 |
| 1.前言 | 第76页 |
| 2.材料与方法 | 第76-80页 |
| ·材料 | 第76-78页 |
| ·植物受体材料 | 第76页 |
| ·酶和试剂 | 第76-77页 |
| ·质粒和菌株 | 第77页 |
| ·PCR扩增引物 | 第77页 |
| ·培养基 | 第77-78页 |
| ·细菌培养基 | 第77页 |
| ·植物培养基 | 第77-78页 |
| ·仪器与设备 | 第78页 |
| ·方法 | 第78-80页 |
| ·碱法小量提取质粒DNA | 第78页 |
| ·农杆菌感受态细胞制备 | 第78页 |
| ·液氮冻融法转化农杆菌 | 第78页 |
| ·共培养转化 | 第78-79页 |
| ·Km~r的分子检测 | 第79-80页 |
| ·PCR检测 | 第79-80页 |
| ·Km~r植株总DNA的提取 | 第79-80页 |
| ·Km~r植株的PCR检测 | 第80页 |
| 3.结果与分析 | 第80-86页 |
| ·转化条件对Km~r抗性原球茎诱导的影响 | 第80-85页 |
| ·预培养时间对Km~r抗性原球茎诱导的影响 | 第81-82页 |
| ·浸染菌液浓度对Km~r抗性原球茎诱导的影响 | 第82页 |
| ·浸染时间对Km~r抗性原球茎诱导的影响 | 第82-83页 |
| ·共培养时间对Km~r抗性原球茎诱导的影响 | 第83-84页 |
| ·pH值对Km~r抗性原球茎诱导的影响 | 第84页 |
| ·优化条件下大量Km~r抗性原球茎的获得 | 第84-85页 |
| ·转NP-1和GAFP双价抗病基因的Km抗性植株PCR分析 | 第85-86页 |
| 4.讨论 | 第86-89页 |
| 第十章农杆菌介导pBin35SGAFP-NPl转化大花蕙兰和文心兰及pBin35S-GFP表达载体的构建 | 第89-97页 |
| 1.前言 | 第89页 |
| 2.材料与方法 | 第89-93页 |
| ·材料 | 第89-90页 |
| ·pBin35SGAFP-NP1的转化 | 第89-90页 |
| ·植物受体材料 | 第89页 |
| ·酶和试剂 | 第89-90页 |
| ·质粒和菌株 | 第90页 |
| ·培养基 | 第90页 |
| ·细菌培养基 | 第90页 |
| ·植物培养基 | 第90页 |
| ·仪器与设备 | 第90页 |
| ·pBin35S-GFP表达载体的构建 | 第90页 |
| ·菌株和质粒 | 第90页 |
| ·试剂 | 第90页 |
| ·方法 | 第90-93页 |
| ·pBin35SGAFP-NPI的转化 | 第90页 |
| ·共培养转化 | 第90页 |
| ·pBin35S-GFP表达载体的构建 | 第90-93页 |
| ·培养基配制 | 第90-91页 |
| ·细菌培养 | 第91页 |
| ·质粒提取 | 第91页 |
| ·质粒的酶切分析 | 第91页 |
| ·酶切片段凝胶电泳 | 第91-92页 |
| ·连接反应 | 第92页 |
| ·大肠杆菌(转化pB120质粒)感受态的制备 | 第92页 |
| ·转化 | 第92-93页 |
| ·重组阳性质粒提取 | 第93页 |
| ·表达载体的酶切分析 | 第93页 |
| ·酶切片段凝胶电泳 | 第93页 |
| ·农杆菌感受态细胞制备 | 第93页 |
| ·液氮冻融法转化农杆菌 | 第93页 |
| 3.结果与分析 | 第93-95页 |
| ·转NP-1和GAFP双价抗病基因的Km抗性植株的获得 | 第93-94页 |
| ·pBin35S-GFP表达载体的构建 | 第94-95页 |
| 4.讨论 | 第95-97页 |
| 第十一章 结论与讨论 | 第97-102页 |
| 1.植株再生系统的建立 | 第97-98页 |
| ·蝴蝶兰离体叶片诱导植株再生体系的建立 | 第97-98页 |
| ·大花蕙兰体细胞胚胎发生和植株再生 | 第98页 |
| ·文心兰愈伤组织诱导及其分化系统的建立 | 第98页 |
| 2.基因转化条件的优化及转抗病基因植株的获得 | 第98-99页 |
| 3.研究的创新性意义及存在的问题 | 第99-102页 |
| ·创新点及其意义 | 第99-100页 |
| ·存在问题及进一步研究展望 | 第100-102页 |
| 参考文献(Reference) | 第102-108页 |
| 附录: 作者简介 | 第108页 |
