纳豆激酶植物表达载体的构建及番茄遗传转化体系的建立
| 第一章 文献综述 | 第1-38页 |
| ·植物基因工程研究进展 | 第12-19页 |
| ·目的基因的分离与鉴定 | 第12页 |
| ·基因的修饰及植物表达载体的构建 | 第12-13页 |
| ·植物遗传转化研究 | 第13-16页 |
| ·转化体的筛选和鉴定 | 第16-17页 |
| ·外源基因的整合、表达和遗传 | 第17页 |
| ·植物基因工程的安全性评价 | 第17-18页 |
| ·植物基因工程存在的问题及对策 | 第18-19页 |
| ·转基因番茄研究进展 | 第19-27页 |
| ·转基因延熟番茄的研究 | 第19-20页 |
| ·转基因抗病番茄的研究 | 第20-22页 |
| ·番茄抗虫基因工程 | 第22-23页 |
| ·番茄抗除草剂基因工程 | 第23页 |
| ·番茄抗逆基因工程 | 第23-24页 |
| ·番茄品质改良的研究 | 第24-25页 |
| ·延缓番茄叶衰老的转基因研究 | 第25页 |
| ·番茄雄性不育基因工程 | 第25-26页 |
| ·利用番茄作为生物反应器 | 第26页 |
| ·番茄基因工程展望 | 第26-27页 |
| ·纳豆激酶研究进展 | 第27-37页 |
| ·纳豆 | 第27页 |
| ·纳豆激酶 | 第27-37页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第37-38页 |
| 第二章NK基因表达载体的构建 | 第38-57页 |
| ·材料与方法 | 第38-46页 |
| ·材料 | 第38-40页 |
| ·菌种和质粒 | 第38页 |
| ·PCR引物 | 第38-39页 |
| ·工具酶和试剂 | 第39页 |
| ·DNAMarker | 第39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·培养菌常用培养基 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-46页 |
| ·载体构建路线 | 第40页 |
| ·质粒提取(北京天为时代质粒小量提取试剂盒) | 第40-42页 |
| ·NK基因的克隆 | 第42页 |
| ·DNA片段回收(北京天为时代胶回收试剂盒) | 第42-43页 |
| ·PCR扩增的NK基因与T-载体的连接及转化 | 第43页 |
| ·T4DNA酶连接DNA片段和载体DNA | 第43页 |
| ·去磷酸化作用 | 第43-44页 |
| ·感受态细胞制备及转化 | 第44-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-54页 |
| ·带有BamHI位点的NK基因的扩增与克隆 | 第46-51页 |
| ·NK基因的扩增 | 第46页 |
| ·T-NK载体的构建和鉴定 | 第46-47页 |
| ·纳豆激酶基因序列测定和分析 | 第47-51页 |
| ·pCAMBIA-nk(农杆菌表达载体)的构建 | 第51-54页 |
| ·pBPC1300中间质粒的构建 | 第51-52页 |
| ·pubiCAMBIA中间质粒的构建和鉴定 | 第52-53页 |
| ·pCAMBIA-nk表达载体的构建和鉴定 | 第53-54页 |
| ·农杆菌的转化检测 | 第54页 |
| ·讨论与结论 | 第54-57页 |
| ·带有特异BamHI酶切位点目的基因NK的获得 | 第54页 |
| ·NK基因的测序结果 | 第54-55页 |
| ·构建表达载体时影响限制性内切酶酶切效果的因素 | 第55页 |
| ·构建表达载体所需的pCAMBIA载体的选择 | 第55页 |
| ·关于直接法转化农杆菌 | 第55页 |
| ·转化农杆菌的鉴定方法 | 第55-57页 |
| 第三章 番茄遗传转化体系的建立 | 第57-69页 |
| ·材料与方法 | 第57-62页 |
| ·材料 | 第57-59页 |
| ·番茄材料 | 第57页 |
| ·菌株和质粒 | 第57页 |
| ·实验仪器 | 第57-59页 |
| ·方法 | 第59-62页 |
| ·番茄无菌苗的培养 | 第59页 |
| ·番茄受体材料的准备 | 第59页 |
| ·根癌农杆菌介导法转化番茄 | 第59-60页 |
| ·转基因番茄的分子检测 | 第60-62页 |
| ·结果与分析 | 第62-68页 |
| ·不同番茄材料在MS基本培养基上的出芽率 | 第62-63页 |
| ·不同材料愈伤组织的诱导 | 第63页 |
| ·不同激素浓度对番茄外殖体诱芽分化的影响 | 第63-64页 |
| ·愈伤组织对潮霉素耐受性的检测及筛选浓度的确立 | 第64页 |
| ·农杆菌介导法转化番茄 | 第64-67页 |
| ·抗性番茄愈伤组织和再生植株的获得 | 第64-66页 |
| ·农杆菌法转化番茄的结果 | 第66-67页 |
| ·再生植株PCR分子检测 | 第67-68页 |
| ·讨论与结论 | 第68-69页 |
| ·培养基对番茄愈伤组织的影响 | 第68页 |
| ·提高分化率的措施 | 第68页 |
| ·生根壮苗和移栽 | 第68页 |
| ·PCR分子检测 | 第68-69页 |
| 第四章 结论和展望 | 第69-71页 |
| ·结论 | 第69页 |
| ·创新点和展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 作者简介 | 第81页 |
