| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| ·植物抗寒机理研究进展 | 第11-17页 |
| ·细胞膜系统与植物抗寒性的关系 | 第11-13页 |
| ·细胞抗氧化能力与植物抗寒性 | 第13-14页 |
| ·冷诱导基因的表达和调控与植物抗寒性 | 第14-17页 |
| ·植物抗寒的基因工程 | 第17-21页 |
| ·导入抗渗透胁迫相关基因基因 | 第18页 |
| ·导入脂肪酸去饱和代谢关键酶基因 | 第18-19页 |
| ·导入SOD(Superoxide dismutase，超氧化歧化酶)基因 | 第19页 |
| ·导入AFPs(antifreezing proteins，抗冻蛋白)基因 | 第19-20页 |
| ·导入CBF转录因子基因 | 第20-21页 |
| ·总结与展望 | 第21-23页 |
| 第二章 引言 | 第23-25页 |
| 第三章 植物表达载体的构建 | 第25-42页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·质粒与菌株 | 第25页 |
| ·分子生物学试剂 | 第25页 |
| ·培养基及试剂的配置 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-36页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取、感受态的制备及转化 | 第26-27页 |
| ·质粒酶切，目的片段回收，末端补平，去磷酸化及连接反应 | 第27-29页 |
| ·菌斑的Colony PCR | 第29页 |
| ·农杆菌LBA4404感受态的制备、转化、质粒DNA的提取及验证 | 第29-30页 |
| ·农杆菌菌斑的Colony PCR筛选 | 第30页 |
| ·二次转化验证 | 第30页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第30-32页 |
| ·植物基因表达载体构建流程图 | 第32-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-40页 |
| ·植物表达载体pVCT2016的构建及其鉴定 | 第36-37页 |
| ·表达载体pRD29A-CBF3的构建 | 第37-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 农杆菌介导的黄瓜遗传转化 | 第42-57页 |
| ·材料与方法 | 第42-49页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-54页 |
| ·不同激素浓度组合对黄瓜不定芽分化的影响 | 第49-50页 |
| ·黄瓜试管苗生根培养基的确定 | 第50页 |
| ·黄瓜不定芽生长培养基的选择 | 第50-51页 |
| ·Kan对黄瓜子叶愈伤和芽分化的影响 | 第51页 |
| ·最适抑菌剂浓度的选择 | 第51页 |
| ·感菌时间对转化的影响 | 第51-52页 |
| ·转基因黄瓜抗性植株的获得 | 第52-53页 |
| ·转基因黄瓜植株的PCR鉴定 | 第53页 |
| ·转基因植株的Southern杂交检测: | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 发表论文及参加课题一览表 | 第64-65页 |
| 缩写词 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
