| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-25页 |
| ·麦角甾醇的研究进展 | 第10-15页 |
| ·麦角甾醇的简介 | 第10-11页 |
| ·真菌和植物物中麦角甾醇的功能 | 第11页 |
| ·麦角甾醇菌株的选育状况 | 第11-12页 |
| ·自然筛选 | 第11页 |
| ·杂交育种 | 第11页 |
| ·诱变育种 | 第11页 |
| ·原生质体融合 | 第11-12页 |
| ·麦角甾醇的合成调节 | 第12-13页 |
| ·基因工程方法 | 第12页 |
| ·培养条件的优化 | 第12-13页 |
| ·麦角甾醇的生产 | 第13-14页 |
| ·麦角甾醇的应用 | 第14-15页 |
| ·透明颤菌血红蛋白及其基因的研究进展 | 第15-19页 |
| ·透明颤菌血红蛋白及其基因的简介 | 第15-16页 |
| ·透明颤菌血红蛋白及其基因的调控 | 第16-17页 |
| ·透明颤菌血红蛋白的作用机理 | 第17-18页 |
| ·透明颤菌血红蛋白及其基因的应用 | 第18-19页 |
| ·神经酰胺的研究进展 | 第19-21页 |
| ·神经酰胺的简介 | 第19-20页 |
| ·神经酰胺的提取和分析 | 第20-21页 |
| ·神经酰胺的应用 | 第21页 |
| ·应用分子生物学手段改变基因表达的常用方法 | 第21-24页 |
| ·基因过表达 | 第21-22页 |
| ·将基因整合到染色体 | 第21-22页 |
| ·利用酵母表达载体 | 第22页 |
| ·基因敲除 | 第22-24页 |
| ·选题的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 材料和方法 | 第25-36页 |
| ·主要试剂及供应商 | 第25-26页 |
| ·主要仪器和设备 | 第26-27页 |
| ·菌种培养 | 第27-28页 |
| ·摇瓶培养基及培养条件 | 第27页 |
| ·发酵罐培养基及培养条件 | 第27-28页 |
| ·分子生物学相关操作 | 第28-32页 |
| ·大肠杆菌电转化感受态细胞的制备和转化 | 第28页 |
| ·从大肠杆菌中提取质粒(质粒快速提取试剂盒) | 第28-29页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第29-30页 |
| ·DNA片断回收 | 第30页 |
| ·酵母质粒DNA的分离 | 第30-31页 |
| ·酵母质粒的转化 | 第31-32页 |
| ·质粒和菌种 | 第32-33页 |
| ·细胞干重的测定 | 第33页 |
| ·透明颤菌血红蛋白的检测和分析方法 | 第33-34页 |
| ·酵母的麦角甾醇的提取和定量分析方法 | 第34-35页 |
| ·酵母的神经酰胺的提取和分析方法 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第36-54页 |
| ·细菌血红蛋白基因(vgb)的克隆与重组质粒的构建 | 第36-42页 |
| ·质粒pVgb-EX1的构建和验证 | 第36-42页 |
| ·PCR产物的鉴定 | 第37-38页 |
| ·质粒pSK-Vgb的构建和鉴定 | 第38-39页 |
| ·质粒pVgb-EX1的构建和鉴定 | 第39-41页 |
| ·质粒pVgb-kanMX4的构建和鉴定 | 第41-42页 |
| ·含有vgb基因的酿酒酵母的构建以及vgb基因在酿酒酵母中的表达 | 第42-45页 |
| ·重组酿酒酵母(S.cerevisiae.YSH 6.126-1B)菌株的构建 | 第42页 |
| ·重组酿酒酵母(S.cerevisiae 1190)菌株的构建 | 第42-43页 |
| ·vgb表达产物的定性分析 | 第43页 |
| ·vgb表达产物的定量分析 | 第43-45页 |
| ·含有vgb基因的重组酿酒酵母的发酵实验 | 第45-51页 |
| ·重组酿酒酵母摇瓶发酵实验 | 第45-49页 |
| ·重组菌和野生菌生长情况的检测 | 第45-47页 |
| ·麦角甾醇标准曲线的制作 | 第47页 |
| ·麦角甾醇的分析 | 第47-48页 |
| ·装瓶量对麦角固醇合成量的影响 | 第48-49页 |
| ·重组酿酒酵母S.cerevisiae 1190(pVgb-KanMX4)发酵罐发酵实验 | 第49-51页 |
| ·vgb基因对神经酰胺的影响 | 第51-54页 |
| ·溶氧和神经酰胺的关系 | 第51-52页 |
| ·含有vgb基因重组菌中神经酰胺的分析 | 第52-54页 |
| ·TLC展开剂的确定 | 第52页 |
| ·重组菌S.cerevisiae.YSH 6.126-1 B(pVgb-EX1)中神经酰胺的检测 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 在学期间的研究成果及发表的学术论文 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
