目录 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
第1章 文献综述 | 第11-39页 |
·猪传染性胸膜肺炎的流行现状及其危害 | 第11-13页 |
·猪传染性胸膜肺炎的流行现状 | 第11-12页 |
·猪传染性胸膜肺炎的危害 | 第12-13页 |
·猪传染性胸膜肺炎的病原学 | 第13-15页 |
·猪传染性胸膜肺炎的流行病学 | 第15-19页 |
·疾病的发生和传播 | 第15-16页 |
·临床症状 | 第16页 |
·病理变化 | 第16-17页 |
·诊断 | 第17-18页 |
·治疗 | 第18页 |
·预防 | 第18-19页 |
·胸膜肺炎放线杆菌的诊断方法研究进展 | 第19-24页 |
·血清学诊断方法 | 第19-23页 |
·病原学诊断方法 | 第23-24页 |
·胸膜肺炎放线杆菌毒力因子研究进展 | 第24-30页 |
·胸膜肺炎疫苗研究进展 | 第30-39页 |
第2章 胸膜肺炎放线杆菌生长培养基的选择及生长曲线的测定 | 第39-45页 |
·研究目的和意义 | 第39页 |
·材料与方法 | 第39-41页 |
·材料 | 第39-40页 |
·方法 | 第40-41页 |
·细菌的活化 | 第40页 |
·三种培养基生长情况的比较 | 第40-41页 |
·TSB培养基生长曲线的测定 | 第41页 |
·结果与分析 | 第41-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
·小结 | 第44-45页 |
第3章 胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅰ的克隆、表达及中间载体pSK-Ⅰ CKA的构建 | 第45-65页 |
·研究目的和意义 | 第45页 |
·材料与方法 | 第45-56页 |
·材料 | 第45-49页 |
·方法 | 第49-56页 |
·细菌的增殖及基因组的提取 | 第49-50页 |
·apx Ⅰ CA及apx Ⅰ A片段的扩增 | 第50页 |
·apx Ⅰ XC、Kan及apx Ⅰ DA片段的扩增 | 第50页 |
·PCR产物的电泳检测 | 第50页 |
·PCR产物的回收与纯化 | 第50-51页 |
·PCR产物的克隆 | 第51页 |
·感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第51页 |
·连接产物的转化 | 第51-52页 |
·质粒的提取 | 第52页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第52-53页 |
·apx Ⅰ CA的测序 | 第53页 |
·中间质粒pSK Ⅰ CKA构建及序列测定 | 第53页 |
·重组表达质粒pET-Ⅰ CA和pET-Ⅰ A的构建 | 第53页 |
·诱导表达 | 第53-55页 |
·表达产物的SDS-PAGE检测和Western-blot分析 | 第55-56页 |
·结果与分析 | 第56-63页 |
·讨论 | 第63-64页 |
·小结 | 第64-65页 |
第4章 胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅰ免疫原性的研究 | 第65-71页 |
·研究目的和意义 | 第65页 |
·材料和方法 | 第65-67页 |
·材料 | 第65-66页 |
·方法 | 第66-67页 |
·间接ELISA操作步骤 | 第66页 |
·毒素基因在BL-21中的诱导表达及包涵体的制备 | 第66页 |
·天然Apx Ⅰ的提取 | 第66-67页 |
·毒素Ⅰ溶血活性的测定 | 第67页 |
·疫苗的制备及免疫 | 第67页 |
·10型APP半数致死量(LD_(50))的确定及攻毒剂量 | 第67页 |
·Apx Ⅰ ELISA检测方法的建立及抗体的检测 | 第67页 |
·结果与分析 | 第67-69页 |
·讨论 | 第69-70页 |
·小结 | 第70-71页 |
第5章 猪传染性胸膜肺炎新型基因工程类毒素菌苗的研究 | 第71-89页 |
·研究目的和意义 | 第71-72页 |
·材料和方法 | 第72-74页 |
·材料 | 第72页 |
·方法 | 第72-74页 |
·三种毒素基因在BL-21中的诱导表达及包涵体的制备 | 第72页 |
·油乳剂类毒素疫苗的制备 | 第72-73页 |
·免疫小鼠类毒素菌苗的制备及免疫 | 第73页 |
·抗体的检测 | 第73页 |
·攻毒剂量的确定 | 第73页 |
·类毒素菌苗的安全性试验 | 第73-74页 |
·类毒素菌苗对仔猪效力的观测 | 第74页 |
·结果与分析 | 第74-84页 |
·讨论 | 第84-86页 |
·小结 | 第86页 |
·结论 | 第86-89页 |
参考文献 | 第89-105页 |
缩略词 | 第105-106页 |
附录 | 第106-108页 |
致谢 | 第108页 |