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毛冠鹿性连锁基因的克隆与性染色体鉴定研究

目录第1-5页
中文摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第一章 综述第7-16页
 1 毛冠鹿种内核型多态第7-9页
 2 麂亚科动物性别决定的研究现状第9-11页
 3 性染色体连锁的基因与性别鉴定第11-16页
   ·ZFX/ZFY第11-12页
   ·SRY第12页
   ·G6PD第12-13页
   ·雄性特异的重复序列第13-14页
   ·AMEL(Amelogenin)第14-16页
第二章 毛冠鹿ZFX、ZFY基因片段的克隆与性别鉴定第16-25页
 前言第16页
 1 实验材料第16-17页
 2 主要仪器第17页
 3 主要试剂第17-18页
 4 实验方法第18-20页
   ·毛冠鹿细胞原代培养及传代培养第18页
   ·细胞冻存第18页
   ·染色体制片和核型分析第18-19页
   ·DNA提取第19页
   ·引物设计第19页
   ·PCR扩增第19-20页
   ·扩增产物纯化第20页
   ·克隆第20页
   ·测序与序列分析第20页
   ·酶切鉴定性别第20页
 5 实验结果第20-23页
   ·PCR产物检测第20页
   ·ZFY/ZFX测序分析第20-21页
   ·氨基酸序列推导第21页
   ·性别鉴定第21-23页
   ·毛冠鹿核型检测结果第23页
 6 讨论第23-25页
第三章 性染色体连锁基因片段的克隆测序与分析第25-32页
 前言第25页
 1 实验材料第25页
 2 主要仪器第25-26页
 3 主要试剂第26页
 4 实验方法第26-28页
   ·毛冠鹿SRY基因的克隆测序第26页
   ·毛冠鹿DYZ重复序列的克隆测序第26-27页
   ·毛冠鹿G6PD基因片段的克隆测序第27页
   ·测序与序列分析第27-28页
 5 实验结果第28-30页
   ·毛冠鹿SRY基因全序列分析第28-29页
   ·毛冠鹿DYZ重复序列分析第29-30页
   ·毛冠鹿G6PD基因片段序列分析第30页
 6 讨论第30-32页
第四章 毛冠鹿性染色体分子鉴定--利用染色体显微切割与FISH技术对毛冠鹿性染色体进行分子鉴定第32-47页
 前言第32-33页
 1 实验材料第33页
 2 主要仪器第33页
 3 主要试剂第33-34页
 4 实验方法第34-38页
   ·染色体显微切割第34页
   ·DOP-PCR第34页
   ·PCR扩增ZFX/ZFY基因片段和SRY基因片段第34-35页
   ·荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,FISH)第35-38页
 5 实验结果第38-39页
   ·PCR扩增ZFX/ZFY基因片段和SRY基因片段第38-39页
   ·荧光原位杂交结果第39页
 6 讨论第39-41页
 参考文献第41-47页
附录1: 图版及说明第47-48页
附录2: 测序图谱第48-57页
致谢第57页

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