目录 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 综述 | 第7-16页 |
1 毛冠鹿种内核型多态 | 第7-9页 |
2 麂亚科动物性别决定的研究现状 | 第9-11页 |
3 性染色体连锁的基因与性别鉴定 | 第11-16页 |
·ZFX/ZFY | 第11-12页 |
·SRY | 第12页 |
·G6PD | 第12-13页 |
·雄性特异的重复序列 | 第13-14页 |
·AMEL(Amelogenin) | 第14-16页 |
第二章 毛冠鹿ZFX、ZFY基因片段的克隆与性别鉴定 | 第16-25页 |
前言 | 第16页 |
1 实验材料 | 第16-17页 |
2 主要仪器 | 第17页 |
3 主要试剂 | 第17-18页 |
4 实验方法 | 第18-20页 |
·毛冠鹿细胞原代培养及传代培养 | 第18页 |
·细胞冻存 | 第18页 |
·染色体制片和核型分析 | 第18-19页 |
·DNA提取 | 第19页 |
·引物设计 | 第19页 |
·PCR扩增 | 第19-20页 |
·扩增产物纯化 | 第20页 |
·克隆 | 第20页 |
·测序与序列分析 | 第20页 |
·酶切鉴定性别 | 第20页 |
5 实验结果 | 第20-23页 |
·PCR产物检测 | 第20页 |
·ZFY/ZFX测序分析 | 第20-21页 |
·氨基酸序列推导 | 第21页 |
·性别鉴定 | 第21-23页 |
·毛冠鹿核型检测结果 | 第23页 |
6 讨论 | 第23-25页 |
第三章 性染色体连锁基因片段的克隆测序与分析 | 第25-32页 |
前言 | 第25页 |
1 实验材料 | 第25页 |
2 主要仪器 | 第25-26页 |
3 主要试剂 | 第26页 |
4 实验方法 | 第26-28页 |
·毛冠鹿SRY基因的克隆测序 | 第26页 |
·毛冠鹿DYZ重复序列的克隆测序 | 第26-27页 |
·毛冠鹿G6PD基因片段的克隆测序 | 第27页 |
·测序与序列分析 | 第27-28页 |
5 实验结果 | 第28-30页 |
·毛冠鹿SRY基因全序列分析 | 第28-29页 |
·毛冠鹿DYZ重复序列分析 | 第29-30页 |
·毛冠鹿G6PD基因片段序列分析 | 第30页 |
6 讨论 | 第30-32页 |
第四章 毛冠鹿性染色体分子鉴定--利用染色体显微切割与FISH技术对毛冠鹿性染色体进行分子鉴定 | 第32-47页 |
前言 | 第32-33页 |
1 实验材料 | 第33页 |
2 主要仪器 | 第33页 |
3 主要试剂 | 第33-34页 |
4 实验方法 | 第34-38页 |
·染色体显微切割 | 第34页 |
·DOP-PCR | 第34页 |
·PCR扩增ZFX/ZFY基因片段和SRY基因片段 | 第34-35页 |
·荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,FISH) | 第35-38页 |
5 实验结果 | 第38-39页 |
·PCR扩增ZFX/ZFY基因片段和SRY基因片段 | 第38-39页 |
·荧光原位杂交结果 | 第39页 |
6 讨论 | 第39-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
附录1: 图版及说明 | 第47-48页 |
附录2: 测序图谱 | 第48-57页 |
致谢 | 第57页 |