| 致谢 | 第1-8页 |
| 符号与缩略语 | 第8-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 综述一 动物圆环病毒 | 第15-36页 |
| 1 生物学特性 | 第16-21页 |
| ·宿主范围 | 第16-18页 |
| ·病毒分离与在细胞培养物上的生长 | 第18-19页 |
| ·血凝活性 | 第19页 |
| ·形态学与形态发生 | 第19-21页 |
| 2 病毒的理化特性 | 第21-22页 |
| 3 病毒的基因结构与表达 | 第22-28页 |
| 4 病毒的蛋白与抗原 | 第28-31页 |
| 5 基因组复制 | 第31-34页 |
| 6 流行病学 | 第34-36页 |
| 综述二 猪圆环病毒研究进展 | 第36-46页 |
| 1 猪圆环病毒的感染特性 | 第37-38页 |
| 2 病毒的基因结构与表达 | 第38-41页 |
| 3 基因组的复制 | 第41-44页 |
| 4 致病机理 | 第44-46页 |
| 研究报告 | 第46-76页 |
| 实验一 PCV2ORF1(REP)、ORF2(CAP)及截短ORF2的克隆与表达 | 第46-57页 |
| 1 材料与方法 | 第46-51页 |
| ·病毒、细胞、血清 | 第46-47页 |
| ·载体、酶、试剂 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·引物 | 第47-49页 |
| ·病毒基因组DNA的提取 | 第49页 |
| ·JXL株Rep与JXL株Cap的构建与诱导表达 | 第49-50页 |
| ·pGEX-6P-1载体中截短ORF2(ΔCap)的克隆 | 第50-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-55页 |
| ·PCV2 ORF1、ORF2基因片段的PCR扩增 | 第51页 |
| ·ORF1、ORF2PCR产物克隆到pMD18T | 第51页 |
| ·pMD18T-ORF1、pMD18T-ORF2测序 | 第51-52页 |
| ·pPROEX~(TM)HTb-ORF1、pPROEX~(TM)HTb-ORF2、pGEX-6p-1ΔCap的克隆 | 第52-55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| 实验二 PCV2 ORF3、ORF4、ORF5、ORF6的克隆、表达及兔高免血清的制备 | 第57-76页 |
| 1 材料与方法 | 第57-63页 |
| ·引物 | 第57-58页 |
| ·模板、实验动物 | 第58页 |
| ·PCV2 JXL株ORF3、ORF4、ORF5、ORF6的构建和诱导表达 | 第58-59页 |
| ·多克隆血清的制备 | 第59-62页 |
| ·兔免疫血清的活性检测 | 第62-63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-70页 |
| ·PCV2 ORF3、ORF4、ORF5、ORF6基因片段的PCR扩增 | 第63-64页 |
| ·pMD18T重组质粒的鉴定 | 第64-66页 |
| ·pMD18T重组质粒的测序结果 | 第64-66页 |
| ·pGEX-6p-1重组质粒的鉴定 | 第66页 |
| ·pGEX-6p-1重组质粒的诱导表达 | 第66页 |
| ·免疫血清效价的测定 | 第66-68页 |
| ·间接免疫荧光对病毒的检测 | 第68页 |
| ·免疫印迹实验对病毒的检测 | 第68页 |
| ·PCV2 ORF3、ORF4、ORF5、ORF6基因功能分析 | 第68-70页 |
| 3 讨论 | 第70-76页 |
| ·表达这些蛋白的目的和意义 | 第70页 |
| ·包涵体形成的原因及解决方法 | 第70-71页 |
| ·兔免疫血清效价不高原因分析 | 第71-72页 |
| ·间接免疫荧光试验结果分析 | 第72-73页 |
| ·免疫印迹实验和超离病毒SDS-PAGE结果分析 | 第73-76页 |
| 结论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 附录 | 第86-90页 |
| 一、 溶液的配制 | 第86-89页 |
| 二、 部分实验方法 | 第89-90页 |
