中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-9页 |
前言 | 第9-19页 |
1 λ噬菌体裂解循环和溶原途径的调控 | 第9-11页 |
2 紫外线对λ原噬菌体的诱导作用 | 第11-12页 |
3 自由基对生物大分子的损伤 | 第12-14页 |
4 谷胱甘肽 | 第14-16页 |
5 苏云金芽孢杆菌及其在生物农药中的应用 | 第16-18页 |
6 本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
材料与方法 | 第19-28页 |
1 材料 | 第19-21页 |
·菌株与质粒 | 第19页 |
·培养基 | 第19页 |
·主要试剂与药物 | 第19-21页 |
·主要仪器 | 第21页 |
2 方法 | 第21-28页 |
·噬菌体裂解液的制备 | 第21页 |
·噬菌体效价的测定 | 第21-22页 |
·电子自旋共振检测 | 第22页 |
·产自由基系统对λ原噬菌体的诱导作用 | 第22页 |
·GSH基因gsh-Ⅰ在大肠杆菌的克隆与表达 | 第22-24页 |
·染色体DNA的提取与纯化 | 第22页 |
·基因gsh-Ⅰ的PCR扩增 | 第22-23页 |
·PCR产物的纯化 | 第23页 |
·DNA限制性内切酶降解与连接 | 第23页 |
·感受态细胞的制备 | 第23页 |
·转化 | 第23-24页 |
·大肠杆菌转化子的鉴定和紫外抗性的检测 | 第24-25页 |
·质粒DNA的少量制备 | 第24页 |
·Southern杂交 | 第24-25页 |
·大肠杆菌转化子紫外抗性的检测 | 第25页 |
·GSH基因gsh-Ⅰ在苏云金芽孢杆菌中的克隆与表达 | 第25-26页 |
·质粒DNA的少量制备 | 第25-26页 |
·DNA限制性内切酶降解与连接 | 第26页 |
·苏云金芽孢杆菌感受态细胞的制备和重组质粒电转化 | 第26页 |
·苏云金芽孢杆菌转化子的鉴定和对紫外辐射抗性的检测 | 第26-28页 |
·质粒的提取 | 第26-27页 |
·Southern杂交 | 第27页 |
·苏云金芽孢杆菌紫外辐射抗性的检测 | 第27页 |
·苏云金芽孢杆菌重组子在室外环境条件下存活性的检测 | 第27-28页 |
结果 | 第28-41页 |
1 不同浓度谷胱甘肽对λ原噬菌体紫外诱导的影响 | 第28页 |
2 次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系对λ原噬菌体的影响 | 第28-33页 |
·细胞密度对HX-XO体系诱导效果的影响 | 第28-29页 |
·HX-XO体系作用时间对噬菌体诱导的影响 | 第29页 |
·次黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶对λ原噬菌体的诱导作用 | 第29-30页 |
·清除自由基的酶类对HX-XO体系诱导效果的影响 | 第30-33页 |
·超氧化物歧化酶对HX-XO体系诱导效果的影响 | 第30-31页 |
·过氧化氢酶(CAT)对HX-XO体系诱导效果的影响 | 第31页 |
·SOD和CAT联合作用对HX-XO体系诱导效果的影响 | 第31-32页 |
·谷胱甘肽对HX-XO体系诱导效果的影响 | 第32-33页 |
3 自由基的ESR检测 | 第33-34页 |
·紫外线诱导溶原菌过程中自由基信号的ESR检测 | 第33-34页 |
·HX-XO体系诱导溶原菌过程中自由基的ESR检测 | 第34页 |
4 gsh-Ⅰ基因在大肠杆菌中的克隆与表达 | 第34-36页 |
·gsh-Ⅰ基因的PCR扩增 | 第34页 |
·重组质粒的构建与转化 | 第34-35页 |
·转化子的鉴定 | 第35-36页 |
·转化子质粒的酶切分析 | 第35页 |
·DNA杂交 | 第35-36页 |
·大肠杆菌重组菌株紫外抗性的检测 | 第36页 |
5 gsh-Ⅰ基因在苏云金芽孢杆菌中的克隆与表达 | 第36-41页 |
·载体pHT-3101的提取 | 第36-37页 |
·重组质粒的构建与转化 | 第37页 |
·苏云金杆菌转化子的鉴定 | 第37-38页 |
·转化子质粒的提取 | 第37页 |
·DNA杂交 | 第37-38页 |
·苏云金杆菌重组菌株对紫外辐射的抗性检测 | 第38-40页 |
·紫外照射时间对B.thuringiensis 250存活性的影响 | 第38-39页 |
·苏云金杆菌重组菌株紫外抗性的检测 | 第39-40页 |
·苏云金芽孢杆菌重组菌株在室外环境中存活性的检测 | 第40-41页 |
讨论 | 第41-44页 |
1 谷胱甘肽对λ原噬菌体紫外诱导的抑制作 | 第41页 |
2 HX-XO体系对λ原噬菌体的诱导作用 | 第41-42页 |
3 紫外诱导过程中自由基的直接检测 | 第42页 |
4 提高谷胱甘肽表达量对细胞抗辐射的影响 | 第42-43页 |
5 今后的研究方向 | 第43-44页 |
主要参考文献 | 第44-50页 |
在读期间所发表的论文目录 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |