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谷胱甘肽对λ原噬菌体诱导的抑制作用

中文摘要第1-4页
英文摘要第4-9页
前言第9-19页
 1 λ噬菌体裂解循环和溶原途径的调控第9-11页
 2 紫外线对λ原噬菌体的诱导作用第11-12页
 3 自由基对生物大分子的损伤第12-14页
 4 谷胱甘肽第14-16页
 5 苏云金芽孢杆菌及其在生物农药中的应用第16-18页
 6 本研究的目的与意义第18-19页
材料与方法第19-28页
 1 材料第19-21页
   ·菌株与质粒第19页
   ·培养基第19页
   ·主要试剂与药物第19-21页
   ·主要仪器第21页
 2 方法第21-28页
   ·噬菌体裂解液的制备第21页
   ·噬菌体效价的测定第21-22页
   ·电子自旋共振检测第22页
   ·产自由基系统对λ原噬菌体的诱导作用第22页
   ·GSH基因gsh-Ⅰ在大肠杆菌的克隆与表达第22-24页
     ·染色体DNA的提取与纯化第22页
     ·基因gsh-Ⅰ的PCR扩增第22-23页
     ·PCR产物的纯化第23页
     ·DNA限制性内切酶降解与连接第23页
     ·感受态细胞的制备第23页
     ·转化第23-24页
   ·大肠杆菌转化子的鉴定和紫外抗性的检测第24-25页
     ·质粒DNA的少量制备第24页
     ·Southern杂交第24-25页
     ·大肠杆菌转化子紫外抗性的检测第25页
   ·GSH基因gsh-Ⅰ在苏云金芽孢杆菌中的克隆与表达第25-26页
     ·质粒DNA的少量制备第25-26页
     ·DNA限制性内切酶降解与连接第26页
     ·苏云金芽孢杆菌感受态细胞的制备和重组质粒电转化第26页
   ·苏云金芽孢杆菌转化子的鉴定和对紫外辐射抗性的检测第26-28页
     ·质粒的提取第26-27页
     ·Southern杂交第27页
     ·苏云金芽孢杆菌紫外辐射抗性的检测第27页
     ·苏云金芽孢杆菌重组子在室外环境条件下存活性的检测第27-28页
结果第28-41页
 1 不同浓度谷胱甘肽对λ原噬菌体紫外诱导的影响第28页
 2 次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系对λ原噬菌体的影响第28-33页
   ·细胞密度对HX-XO体系诱导效果的影响第28-29页
   ·HX-XO体系作用时间对噬菌体诱导的影响第29页
   ·次黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶对λ原噬菌体的诱导作用第29-30页
   ·清除自由基的酶类对HX-XO体系诱导效果的影响第30-33页
     ·超氧化物歧化酶对HX-XO体系诱导效果的影响第30-31页
     ·过氧化氢酶(CAT)对HX-XO体系诱导效果的影响第31页
     ·SOD和CAT联合作用对HX-XO体系诱导效果的影响第31-32页
     ·谷胱甘肽对HX-XO体系诱导效果的影响第32-33页
 3 自由基的ESR检测第33-34页
   ·紫外线诱导溶原菌过程中自由基信号的ESR检测第33-34页
   ·HX-XO体系诱导溶原菌过程中自由基的ESR检测第34页
 4 gsh-Ⅰ基因在大肠杆菌中的克隆与表达第34-36页
   ·gsh-Ⅰ基因的PCR扩增第34页
   ·重组质粒的构建与转化第34-35页
   ·转化子的鉴定第35-36页
     ·转化子质粒的酶切分析第35页
     ·DNA杂交第35-36页
   ·大肠杆菌重组菌株紫外抗性的检测第36页
 5 gsh-Ⅰ基因在苏云金芽孢杆菌中的克隆与表达第36-41页
   ·载体pHT-3101的提取第36-37页
   ·重组质粒的构建与转化第37页
   ·苏云金杆菌转化子的鉴定第37-38页
     ·转化子质粒的提取第37页
     ·DNA杂交第37-38页
   ·苏云金杆菌重组菌株对紫外辐射的抗性检测第38-40页
     ·紫外照射时间对B.thuringiensis 250存活性的影响第38-39页
     ·苏云金杆菌重组菌株紫外抗性的检测第39-40页
   ·苏云金芽孢杆菌重组菌株在室外环境中存活性的检测第40-41页
讨论第41-44页
 1 谷胱甘肽对λ原噬菌体紫外诱导的抑制作第41页
 2 HX-XO体系对λ原噬菌体的诱导作用第41-42页
 3 紫外诱导过程中自由基的直接检测第42页
 4 提高谷胱甘肽表达量对细胞抗辐射的影响第42-43页
 5 今后的研究方向第43-44页
主要参考文献第44-50页
在读期间所发表的论文目录第50-51页
致谢第51-52页

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