鸡甲状旁腺激素基因真核表达质粒构建及其表达效果研究
| 符号说明 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-6页 |
| 英文摘要 | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-10页 |
| 第一部分 甲状旁腺激素研究(综述) | 第10-18页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第18-25页 |
| 1 试验材料 | 第18页 |
| ·组织来源 | 第18页 |
| ·工具酶和化学试剂 | 第18页 |
| ·质粒和宿主菌 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·试剂盒 | 第18页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| 2 方法 | 第18-25页 |
| ·RNA的提取 | 第18-19页 |
| ·引物设计 | 第19页 |
| ·RT-PCR | 第19页 |
| ·RT-PCR产物的纯化与连接 | 第19-20页 |
| ·细菌转化与涂平板 | 第20-21页 |
| ·重组质粒筛选 | 第21页 |
| ·质粒DNA提取和重组鉴定 | 第21页 |
| ·序列测定 | 第21页 |
| ·重组真核表达载体pCDNA3-PTH的构建 | 第21页 |
| ·重组真核表达载体pCEP4-PTH的构建 | 第21-24页 |
| ·重组真核表达载体质粒DNA的提取与纯化 | 第24页 |
| ·实验动物选择 | 第24页 |
| ·质粒DNA注射前处理 | 第24页 |
| ·实验动物的质粒注射 | 第24页 |
| ·试验取样 | 第24-25页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第25-34页 |
| ·总RNA提取结果 | 第25页 |
| ·RT-PCR产物电泳分析 | 第25页 |
| ·RT-PCR产物克隆 | 第25-26页 |
| ·鸡甲状旁腺激素cDNA序列分析 | 第26-27页 |
| ·鸡、牛、人、鼠、猪的PTH基因氨基酸序列分析 | 第27-28页 |
| ·真核表达质粒pCDNA3-PTH构建鉴定 | 第28页 |
| ·真核表达质粒pCEP4-PTH构建鉴定 | 第28页 |
| ·两个真核表达构件在实验动物体内的表达效果 | 第28-34页 |
| 第四部分 讨论 | 第34-40页 |
| ·PTH与骨骼的关系 | 第34页 |
| ·PTH与雌激素 | 第34-35页 |
| ·PTH与钙、磷 | 第35-36页 |
| ·PTH与CT | 第36页 |
| ·基因治疗 | 第36-38页 |
| ·影响基因表达效果的因素 | 第38-39页 |
| ·结语 | 第39-40页 |
| 第五部分 结论与创新 | 第40-41页 |
| 第六部分 主要参考文献 | 第41-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
