摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
前言 | 第8-13页 |
第一部分 绿黄隆残留免疫亲和色谱技术研究 | 第13-25页 |
引言 | 第13-18页 |
1 农药残留免疫亲和色谱基本原理 | 第13-14页 |
2 免疫亲和色谱的建立 | 第14-17页 |
3 IAC技术在农药残留分析中的应用 | 第17页 |
4 IAC发展趋势 | 第17-18页 |
材料与方法 | 第18-21页 |
1 材料 | 第18页 |
·主要试剂与溶液 | 第18页 |
2 试验方法 | 第18-21页 |
·免疫吸附剂的制备 | 第18-19页 |
·基质Sepharose 4B的活化及与抗体偶联过程 | 第18-19页 |
·免疫吸附剂性能测定与IAC条件的选择 | 第19-20页 |
·免疫吸附剂的吸附容量测定 | 第19页 |
·吸附与平衡介质的选择 | 第19页 |
·洗脱介质的选择 | 第19页 |
·重复使用与贮存对吸附容量影响的考察 | 第19-20页 |
·IAC浓缩效率测定 | 第20页 |
·土壤中绿黄隆残留的分离提取与标准添加回收率试验 | 第20页 |
·绿黄隆抑制标准曲线与工作曲线 | 第20页 |
·样本添加回收率 | 第20页 |
·HPLC操作条件与结果验证 | 第20-21页 |
结果与分析 | 第21-24页 |
1 抗体与固相基质的偶联率 | 第21页 |
2 吸附、洗涤平衡介质与吸附容量 | 第21页 |
3 最佳洗脱条件 | 第21-22页 |
4 重复使用与贮存对吸附容量的影响 | 第22页 |
5 IAC浓缩效率的测定 | 第22-23页 |
6 土壤样本标准添加回收率 | 第23-24页 |
讨论 | 第24-25页 |
1 IAC柱及其性能 | 第24页 |
2 样本前处理及回收率 | 第24-25页 |
第二部分 绿黄隆残留ELISA法的建立及方法验证 | 第25-34页 |
引言 | 第25-26页 |
1 农药小分子免疫分析技术流程 | 第25-26页 |
材料与方法 | 第26-29页 |
1 材料 | 第26-27页 |
·试剂和溶液 | 第26-27页 |
·主要仪器 | 第27页 |
2 试验方法 | 第27-29页 |
·土壤中绿黄隆残留固相抗体直接竞争ELISA法测定 | 第27-28页 |
·抗体和酶标半抗原工作浓度的选择 | 第27-28页 |
·绿黄隆抑制标准曲线的建立 | 第28页 |
·农田土壤中绿黄隆的提取和检测 | 第28页 |
·空白土壤中绿黄隆标准添加回收率测定 | 第28页 |
·土壤中绿黄隆残留的生物测定 | 第28-29页 |
·土培法测定步骤 | 第28-29页 |
结果与分析 | 第29-33页 |
1 土壤中绿黄隆残留ELISA测定的最佳条件 | 第29页 |
2 绿黄隆E-H直接竞争ELISA法标准曲线与工作曲线 | 第29-30页 |
3 E-H直接竞争ELISA法测定农田土壤中绿黄隆残留量的标准添加回收率试验 | 第30-31页 |
4 农田土壤中绿黄隆残留检测ELISA结果 | 第31-32页 |
5 农田土壤中绿黄隆残留生物测定结果 | 第32-33页 |
讨论 | 第33-34页 |
1 ELISA分析法的特异性 | 第33页 |
2 ELISA法与其它分析方法的比较 | 第33-34页 |
第三部分 绿黄隆偏振荧光免疫分析 | 第34-39页 |
引言 | 第34-35页 |
材料与方法 | 第35-37页 |
1 材料 | 第35页 |
·试剂与溶液 | 第35页 |
·仪器设备 | 第35页 |
2 试验方法 | 第35-37页 |
·荧光素标记半抗原的合成 | 第35-36页 |
·异硫氰酸荧光素乙二胺复合物(EDF)的制备 | 第35-36页 |
·半抗原活性酯的制备 | 第36页 |
·半抗原与EDF的偶联 | 第36页 |
·偏振荧光免疫分析步骤 | 第36-37页 |
·偏振荧光免疫分析中示踪剂和抗体最适工作浓度的选择 | 第36页 |
·绿黄隆抑制偏振荧光免疫分析曲线 | 第36-37页 |
结果与分析 | 第37-38页 |
1 示踪剂稀释曲线 | 第37页 |
2 不同浓度抗体条件下的荧光偏振强度 | 第37页 |
3 绿黄隆抑制偏振荧光免疫分析测定结果 | 第37-38页 |
讨论 | 第38-39页 |
1 PFIA的特点 | 第38页 |
2 影响PFIA灵敏度的因素 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-44页 |
致谢 | 第44页 |