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农杆菌介导的大豆遗传转化研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-7页
1 前言第7-16页
 1.1 文献综述第7-15页
  1.1.l 植物遗传转化第7-11页
   1.1.1.1 植物转基因方法第7-10页
   1.1.1.2 转基因植株的筛选与检测第10-11页
  1.1.2 大豆遗传转化研究进展第11-15页
   1.1.2.1 大豆体细胞胚胎发生及其转化系统第12-13页
   1.1.2.2 大豆器官发生及其转化系统第13-14页
   1.1.2.3 原生质体再生及其转化系统第14-15页
 1.2 研究的目的和主要内容第15-16页
2 材料与方法第16-22页
 2.1 试验材料第16-17页
  2.1.1 植物材料第16页
  2.1.2 菌株与植物转化载体第16-17页
 2.2 试验方法第17-22页
  2.2.1 细菌的转化第17页
  2.2.2 大豆子叶节的转化第17-18页
   2.2.2.1 菌液制备第17页
   2.2.2.2 子叶节外植体的制备第17-18页
   2.2.2.3 大豆子叶节再生系统的优化第18页
  2.2.3 大豆基因型筛选第18页
  2.2.4 其它影响转化频率因子的优化第18-19页
  2.2.5 转基因植株的检测第19-21页
   2.2.5.1 GUS活性检测第19页
   2.2.5.2 PCR检测第19-20页
   2.2.5.3 PCR-Southern杂交第20-21页
  2.2.6 外源基因的表达第21-22页
3 结果与分析第22-33页
 3.1 大豆子叶节再生系统的优化第22-25页
  3.1.1 基本培养基的优化第22-23页
  3.1.2 MMS诱导培养基微量成分的优化第23-24页
  3.1.3 子叶节外植体上子叶的数目对不定芽产生的影响第24-25页
 3.2 大豆基因型的筛选第25-26页
 3.3 几种因素对农杆菌转化频率的影响第26-30页
  3.3.1 乙酰丁香酮浓度及PH值对农杆菌转化的影响第26-27页
  3.3.2 预培养时间对农杆菌转化的影响第27-28页
  3.3.3 超声波处理对大豆转化频率的影响第28-29页
  3.3.4 外植体年龄对大豆转化效率的影响第29-30页
 3.4 不同发育阶段组织Gus表达活性的分析第30页
 3.5 筛选摸式及转化效果第30-32页
 3.6 转基因植株的检测第32页
 3.7 外源基因的表达第32-33页
4 讨  论第33-37页
 4.1 大豆组培系统与农杆菌遗传转化受体系统第33-34页
  4.1.1. 无菌苗的年龄与受体细胞感受态第33页
  4.1.2 子叶节切割与丛生芽数第33-34页
  4.1.3 存在问题第34页
 4.2 影响农杆菌介导的大豆遗传转化的因素第34-37页
  4.2.1 农杆菌与大豆基因型第34页
  4.2.2 外植体第34-35页
  4.2.3 培养方法对转化的影响第35页
  4.2.4 转化细胞与再生细胞第35页
  4.2.5 选择策略第35-37页
5 结  论第37-38页
致  谢第38-39页
参考文献第39-43页
图 版 说 明第43-44页
图  版第44-45页

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