| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-11页 |
| A篇 文献综述 | 第11-24页 |
| 第一章 轮状病毒及轮状病毒疫苗研究进展 | 第11-24页 |
| 1 轮状病毒病原特性 | 第12-17页 |
| ·病毒粒子的结构 | 第12页 |
| ·轮状病毒的抗原及分型 | 第12-13页 |
| ·轮状病毒的培养特性 | 第13页 |
| ·轮状病毒的基因组结构 | 第13-15页 |
| ·轮状病毒的遗传变异 | 第15-17页 |
| 2 RV 感染发病机制研究 | 第17-20页 |
| ·RV 感染宿主细胞的机制 | 第17-18页 |
| ·RV 引起腹泻的机制 | 第18-20页 |
| ·RV 感染与免疫 | 第20页 |
| 3 牛 RV 诊断方法及特点 | 第20-22页 |
| 4 牛轮状病毒疫苗研究进展 | 第22页 |
| 5 本课题研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| B篇 研究内容 | 第24-58页 |
| 第二章 RNA 提取改良法的探讨 | 第24-30页 |
| 1 引言 | 第24页 |
| 2 试验材料与方法 | 第24-27页 |
| ·毒株与细胞 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-27页 |
| 3 结果 | 第27-28页 |
| ·病毒增殖与收获 | 第27页 |
| ·紫外分光光度计检测 RNA 结果 | 第27-28页 |
| ·琼脂糖检测 RNA 结果 | 第28页 |
| 4 讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 轮状病毒的分离及 RT-PCR 和 PAGE 的鉴定 | 第30-38页 |
| 1 引言 | 第30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-34页 |
| ·病料、毒株与细胞 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30-31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·细胞培养 | 第31-32页 |
| ·病毒的接种 | 第32-34页 |
| 3 结果 | 第34-37页 |
| ·病毒的分离培养 | 第34页 |
| ·血清中和试验 | 第34-35页 |
| ·病毒的电镜观测 | 第35-36页 |
| ·RT-PCR 鉴定轮状病毒 | 第36-37页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶检测轮状病毒 | 第37页 |
| 4 讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 检测牛轮状病毒抗体间接 ELISA 方法的建立和应用 | 第38-50页 |
| 1 引言 | 第38页 |
| 2 材料和方法 | 第38-41页 |
| ·病料、毒株与细胞 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38-39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-41页 |
| 3 结果 | 第41-48页 |
| ·纯化抗原的浓度 | 第41页 |
| ·阳性血清抗体效价的测定 | 第41页 |
| ·病毒抗原的制备 | 第41-42页 |
| ·抗原、血清及酶标抗体最佳稀释度的选择 | 第42-43页 |
| ·方阵法确定各影响因子的浓度 | 第43-44页 |
| ·包被液的确定 | 第44-45页 |
| ·封闭液的确定 | 第45页 |
| ·底物液的选择 | 第45页 |
| ·最佳 ELISA 反应条件 | 第45-46页 |
| ·间接 ELISA 判定标准的确定 | 第46页 |
| ·特异性试验 | 第46页 |
| ·中和试验检测结果 | 第46-47页 |
| ·单稀释法 ELISA 和中和试验结果比较 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 轮状病毒疫苗的研制 | 第50-58页 |
| 1 实验材料 | 第50页 |
| ·实验动物 | 第50页 |
| ·生化试剂 | 第50页 |
| 2 试验方法 | 第50-53页 |
| ·病毒抗原的制备及TCID50检测 | 第50-51页 |
| ·种子批毒的建立 | 第51-52页 |
| ·疫苗检验 | 第52-53页 |
| ·疫苗保存期试验 | 第53页 |
| ·田间试验 | 第53页 |
| 3 结果 | 第53-56页 |
| ·半数细胞培养物感染量的测定 | 第53-54页 |
| ·对小鼠毒力测定的结果 | 第54页 |
| ·特异性试验结果 | 第54页 |
| ·免疫原性试验结果 | 第54页 |
| ·遗传稳定性实验结果 | 第54-55页 |
| ·油苗性状测定结果 | 第55页 |
| ·无菌检验 | 第55页 |
| ·安全试验 | 第55页 |
| ·疫苗保存期试验 | 第55页 |
| ·田间试验 | 第55-56页 |
| 4 结果分析 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简介 | 第69页 |