中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-20页 |
中英文对照 | 第20-23页 |
前言 | 第23-33页 |
1、鼻咽癌肿瘤标志物 | 第23-25页 |
2、肿瘤自身抗体 | 第25-33页 |
·肿瘤自身抗体用于早期诊断的依据 | 第25-26页 |
·肿瘤自身抗体存在的证据 | 第26-27页 |
·肿瘤自身抗体产生的机制 | 第27-29页 |
·肿瘤自身抗体筛选策略 | 第29-33页 |
技术路线 | 第33-34页 |
第一章 鼻咽癌患者血清自身抗体的检测 | 第34-46页 |
·材料与方法 | 第34-39页 |
·材料 | 第34-36页 |
·血清标本 | 第34页 |
·细胞株 | 第34页 |
·引物 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34-35页 |
·主要仪器 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-39页 |
·细胞培养 | 第36页 |
·细胞总RNA提取 | 第36页 |
·基因组DNA提取 | 第36-37页 |
·鼻咽癌细胞株CNE1总蛋白的提取 | 第37页 |
·逆转录PCR(Reverse Transcription PCR,RT-PCR) | 第37-38页 |
·酶联免疫吸附实验检测血清中抗体水平 | 第38页 |
·Western印迹检测血清自身抗体 | 第38页 |
·统计学处理 | 第38-39页 |
·结果 | 第39-43页 |
·Epstein-Barr病毒在鼻咽癌细胞株中的表达 | 第39-40页 |
·鼻咽癌患者血清滴度检测 | 第40-41页 |
·鼻咽癌患者血清中的肿瘤标志物分析 | 第41-43页 |
·讨论 | 第43-46页 |
第二章 鼻咽癌组织T7噬菌体cDNA文库的构建与筛选 | 第46-72页 |
·材料与方法 | 第46-59页 |
·材料 | 第46-50页 |
·组织标本 | 第46页 |
·血清标本 | 第46页 |
·T7Select(?)10-3b载体 | 第46-47页 |
·引物 | 第47页 |
·细菌 | 第47页 |
·主要试剂 | 第47-48页 |
·常用溶液 | 第48-49页 |
·主要仪器 | 第49-50页 |
·方法 | 第50-59页 |
·鼻咽癌组织mRNA的分离 | 第50-51页 |
·cDNA第一链的合成 | 第51-52页 |
·cDNA第二链的合成 | 第52页 |
·双链末端修饰 | 第52-53页 |
·连接EcoRⅠ/HindⅢ接头 | 第53页 |
·EcoRⅠ和HindⅢ消化 | 第53-54页 |
·插入片段纯化 | 第54页 |
·连接 | 第54-55页 |
·体外包装 | 第55页 |
·原始文库滴度测定 | 第55-56页 |
·噬菌体文库的放大 | 第56页 |
·噬菌体文库的鉴定 | 第56页 |
·免疫印迹 | 第56-57页 |
·噬菌体文库的生物淘洗 | 第57-58页 |
·PCR扩增与序列匹配分析 | 第58-59页 |
·结果 | 第59-69页 |
·鼻咽癌组织mRNA的分离 | 第59-60页 |
·鼻咽癌组织T7噬菌体cDNA文库的构建 | 第60页 |
·噬菌体文库原始滴度的测定 | 第60-61页 |
·噬菌体文库的扩增 | 第61-62页 |
·鼻咽癌组织T7噬菌体cDNA文库的鉴定 | 第62页 |
·噬菌体文库的生物淘洗 | 第62-65页 |
·重组噬菌体表达蛋白的分析 | 第65-69页 |
·讨论 | 第69-72页 |
第三章 鼻咽癌血清自身抗体的初步研究 | 第72-93页 |
·材料与方法 | 第72-78页 |
·材料 | 第72-75页 |
·血清标本 | 第72页 |
·细胞株 | 第72页 |
·引物 | 第72-73页 |
·主要试剂 | 第73页 |
·主要溶液 | 第73-74页 |
·主要仪器 | 第74-75页 |
·方法 | 第75-78页 |
·细胞培养 | 第75页 |
·细胞总RNA提取 | 第75页 |
·RT-PCR | 第75-76页 |
·T7噬菌体单克隆化 | 第76页 |
·ELISA | 第76页 |
·免疫印迹 | 第76页 |
·EHSA检测血清中自身抗体的亲和力 | 第76-77页 |
·统计学处理 | 第77-78页 |
·结果 | 第78-89页 |
·RT-PCR检测BMI-1基因在鼻咽癌细胞株中的表达 | 第78页 |
·鼻咽癌患者血清中抗BMI-1的自身抗体的检测 | 第78-79页 |
·抗BMI-1自身抗体亲和力的检测 | 第79-81页 |
·ELISA检测鼻咽癌患者血清中的针对BMI-1的自身抗体 | 第81-82页 |
·免疫印迹检测鼻咽癌患者血清中抗CD44、MAGE和HSP70的自身抗体 | 第82-83页 |
·抗CD44、MAGE和HSP70自身抗体亲和力的检测 | 第83-84页 |
·ELISA分析鼻咽癌血清中抗CD44、MAGE、fibronectin和HSP70自身抗体 | 第84-85页 |
·ROC分析抗CD44、MAGE、fibronectin和HSP70自身抗体作为鼻咽癌诊断标志物的分析 | 第85-86页 |
·抗CD44、MAGE、fibronectin和HSP70自身抗体与鼻咽癌临床分期之间的关系 | 第86-89页 |
·讨论 | 第89-93页 |
结论 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-110页 |
综述 | 第110-121页 |
致谢 | 第121-122页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第122页 |