摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩写词表 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-22页 |
·银杏萜内酯的结构和作用 | 第10-14页 |
·银杏萜内酯的结构 | 第10-11页 |
·银杏萜内酯的药理作用 | 第11-14页 |
·银杏内酯的制备方法 | 第14-15页 |
·天然提取法 | 第14页 |
·化学合成法 | 第14页 |
·细胞培养法 | 第14-15页 |
·提高银杏组织培养物中银杏萜内酯含量的研究进展 | 第15-16页 |
·优化培养条件 | 第15页 |
·加入前体物质 | 第15页 |
·化学或生物诱导子 | 第15-16页 |
·银杏萜内酯生物合成途径研究进展 | 第16-21页 |
·银杏萜内酯生物合成的上游途径 | 第16-19页 |
·银杏萜内酯生物合成的下游途径 | 第19-21页 |
·银杏的遗传转化和银杏萜内酯代谢工程 | 第21-22页 |
第二章 银杏叶及愈伤组织中银杏萜内酯含量测定的方法建立 | 第22-26页 |
·材料与方法 | 第22-24页 |
·材料 | 第22页 |
·仪器和试剂 | 第22页 |
·高效液相操作流程 | 第22-23页 |
·样品提取方法 | 第23页 |
·色谱条件 | 第23页 |
·标准曲线 | 第23页 |
·精密性实验 | 第23页 |
·重复性实验 | 第23-24页 |
·加样回收率实验 | 第24页 |
·结果和讨论 | 第24-26页 |
·标准曲线的制作 | 第24页 |
·精密性 | 第24页 |
·重复性 | 第24页 |
·加样回收率 | 第24-25页 |
·讨论 | 第25-26页 |
第三章 银杏中Gbfps基因的遗传转化 | 第26-42页 |
·材料与方法 | 第26-36页 |
·植物材料 | 第26页 |
·农杆菌工程菌株 | 第26页 |
·植物表达载体 | 第26页 |
·设备与仪器 | 第26-27页 |
·银杏转化中所用到的培养基 | 第27-28页 |
·银杏fps基因编码区的克隆 | 第28-29页 |
·植物表达载体pCAMBIA1304+Gbfps的构建 | 第29-30页 |
·农杆菌EHA105的转化 | 第30-31页 |
·根癌农杆菌EHA105介导转化银杏胚 | 第31页 |
·抗性愈伤组织DNA的提取及PCR检测目的基因 | 第31-33页 |
·独立转化子中Gbfps的表达分析 | 第33-36页 |
·转基因银杏愈伤中萜内酯含量测定 | 第36页 |
·结果和讨论 | 第36-42页 |
·带NcoⅠ/BstEⅡ酶切位点的Gbfps基因编码区的扩增 | 第36页 |
·单基因植物高效表达载体p1304+Gbfps的构建 | 第36-37页 |
·农杆菌介导p1304+Gbfps遗传转化银杏幼胚 | 第37-38页 |
·PCR检测 | 第38页 |
·RealTime PCR检测目的基因表达量 | 第38-39页 |
·HPLC—ELSD检测银杏萜内酯含量 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
第四章 银杏中Gbhdr基因的遗传转化 | 第42-50页 |
·材料与方法 | 第42-46页 |
·植物材料 | 第42页 |
·农杆菌工程菌株 | 第42页 |
·植物表达载体 | 第42页 |
·设备与仪器 | 第42-43页 |
·银杏转化中所用到的培养基 | 第43-44页 |
·根癌农杆菌EHA105介导转化银杏胚 | 第44页 |
·抗性愈伤组织DNA的提取及PCR检测目的基因 | 第44-45页 |
·半定量RT-PCR检测目的基因的表达 | 第45-46页 |
·转基因银杏愈伤中萜内酯含量测定 | 第46页 |
·结果和讨论 | 第46-50页 |
·农杆菌介导p1304+Gbhdr遗传转化银杏幼胚 | 第46-47页 |
·抗性愈伤组织的PCR检测 | 第47页 |
·HPLC—ELSD检测银杏萜内酯含量 | 第47-48页 |
·半定量RT-PCR检测 | 第48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |