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银杏萜内酯代谢途径中关键酶基因的遗传转化研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
缩写词表第8-10页
第一章 文献综述第10-22页
   ·银杏萜内酯的结构和作用第10-14页
     ·银杏萜内酯的结构第10-11页
     ·银杏萜内酯的药理作用第11-14页
   ·银杏内酯的制备方法第14-15页
     ·天然提取法第14页
     ·化学合成法第14页
     ·细胞培养法第14-15页
   ·提高银杏组织培养物中银杏萜内酯含量的研究进展第15-16页
     ·优化培养条件第15页
     ·加入前体物质第15页
     ·化学或生物诱导子第15-16页
   ·银杏萜内酯生物合成途径研究进展第16-21页
     ·银杏萜内酯生物合成的上游途径第16-19页
     ·银杏萜内酯生物合成的下游途径第19-21页
   ·银杏的遗传转化和银杏萜内酯代谢工程第21-22页
第二章 银杏叶及愈伤组织中银杏萜内酯含量测定的方法建立第22-26页
   ·材料与方法第22-24页
     ·材料第22页
     ·仪器和试剂第22页
     ·高效液相操作流程第22-23页
     ·样品提取方法第23页
     ·色谱条件第23页
     ·标准曲线第23页
     ·精密性实验第23页
     ·重复性实验第23-24页
     ·加样回收率实验第24页
   ·结果和讨论第24-26页
     ·标准曲线的制作第24页
     ·精密性第24页
     ·重复性第24页
     ·加样回收率第24-25页
     ·讨论第25-26页
第三章 银杏中Gbfps基因的遗传转化第26-42页
   ·材料与方法第26-36页
     ·植物材料第26页
     ·农杆菌工程菌株第26页
     ·植物表达载体第26页
     ·设备与仪器第26-27页
     ·银杏转化中所用到的培养基第27-28页
     ·银杏fps基因编码区的克隆第28-29页
     ·植物表达载体pCAMBIA1304+Gbfps的构建第29-30页
     ·农杆菌EHA105的转化第30-31页
     ·根癌农杆菌EHA105介导转化银杏胚第31页
     ·抗性愈伤组织DNA的提取及PCR检测目的基因第31-33页
     ·独立转化子中Gbfps的表达分析第33-36页
     ·转基因银杏愈伤中萜内酯含量测定第36页
   ·结果和讨论第36-42页
     ·带NcoⅠ/BstEⅡ酶切位点的Gbfps基因编码区的扩增第36页
     ·单基因植物高效表达载体p1304+Gbfps的构建第36-37页
     ·农杆菌介导p1304+Gbfps遗传转化银杏幼胚第37-38页
     ·PCR检测第38页
     ·RealTime PCR检测目的基因表达量第38-39页
     ·HPLC—ELSD检测银杏萜内酯含量第39-40页
     ·讨论第40-42页
第四章 银杏中Gbhdr基因的遗传转化第42-50页
   ·材料与方法第42-46页
     ·植物材料第42页
     ·农杆菌工程菌株第42页
     ·植物表达载体第42页
     ·设备与仪器第42-43页
     ·银杏转化中所用到的培养基第43-44页
     ·根癌农杆菌EHA105介导转化银杏胚第44页
     ·抗性愈伤组织DNA的提取及PCR检测目的基因第44-45页
     ·半定量RT-PCR检测目的基因的表达第45-46页
     ·转基因银杏愈伤中萜内酯含量测定第46页
   ·结果和讨论第46-50页
     ·农杆菌介导p1304+Gbhdr遗传转化银杏幼胚第46-47页
     ·抗性愈伤组织的PCR检测第47页
     ·HPLC—ELSD检测银杏萜内酯含量第47-48页
     ·半定量RT-PCR检测第48页
     ·讨论第48-50页
参考文献第50-56页
攻读硕士学位期间发表的论文第56-57页
致谢第57-58页

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