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过量表达拟南芥WIN1基因对酵母长链脂肪酸组成的影响

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
第一章 文献综述第11-29页
 一 引言第11页
 二 含有AP2 结构域的转录因子研究进展第11-16页
  1 具有AP2 结构域的转录因子的分子结构和功能第12-15页
   ·AP2 亚家族第12页
   ·EREBP 亚家族第12-13页
   ·DREB 亚家族第13-15页
   ·RAV 亚家族第15页
  2 植物中AP2 结构域的进化上的来源第15-16页
 三 植物蜡质的研究第16-22页
  1 概述第16-17页
  2 蜡质合成的途径第17-22页
   ·C_(16) 和C_(18) 脂酰链的合成途径(质体内合成)第17-18页
   ·特长链脂肪酸 VLCFAs 的合成(质体外合成)第18-19页
   ·蜡质组成成分的合成途径第19-22页
 四 酵母中长链脂肪酸的研究第22-26页
  1 概述第22-23页
  2 酵母中长链脂肪酸的合成第23-26页
   ·主要途径第23-24页
   ·次要途径第24-26页
 五 WIN1 是拟南芥中的具有AP2 结构域的转录因子第26-28页
 六 研究目的、方法及意义第28-29页
第二章 实验论文第29-49页
 一 材料和方法第29-40页
  1 实验材料第29-31页
   ·WIN1 的序列、质粒及菌种第29页
   ·酶及化学试剂第29页
   ·主要仪器设备第29-30页
   ·培养基第30-31页
   ·质粒提取液第31页
   ·植物材料第31页
  2 实验方法第31-40页
   ·根据WIN1 的序列全长设计PCR 引物第31页
   ·Trizol 法提取植物总RNA第31-32页
   ·逆转录第32页
   ·PCR 反应扩增目的片段第32-33页
   ·DNA 的回收第33页
   ·连T-载体第33-34页
   ·大肠杆菌感受态的制备及转化第34-35页
   ·碱裂解法提取质粒第35页
   ·酶切检测质粒第35-36页
   ·测序第36页
   ·过量表达酵母载体的构建第36页
   ·酵母感受态的制备和转化第36-37页
   ·显微镜下观察酵母细胞涂片第37页
   ·酵母菌落涂板观察第37页
   ·酵母的生长速率测定第37-38页
   ·酵母全细胞脂肪酸甲酯制备第38页
   ·GC—MS 对酵母全细胞脂肪酸进行分析第38-40页
 二 实验结果与分析第40-47页
  1 WIN1 基因的克隆及测序第40-41页
   ·Trizol 法提取的拟南芥花序总RNA第40页
   ·拟南芥WIN1 基因全长的RT-PCR 扩增检测第40-41页
   ·RT-PCR 产物的克隆及测序第41页
  2 酵母表达载体的构建第41-43页
   ·重组质粒 p416TEF- WIN1 的构建第41-42页
   ·酵母转化及转基因酵母菌落 PCR 检测第42-43页
  3 转基因酵母表型分析及脂肪酸组成分析第43-47页
   ·转基因酵母涂片观察第43页
   ·单菌落酵母涂板结果第43-44页
   ·生长速率的测定第44页
   ·GC—MS 结果分析第44-47页
 三 讨论第47-49页
参考文献第49-59页
附录第59-62页
致谢第62-63页
硕士期间发表的论文第63页

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