中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-29页 |
一 引言 | 第11页 |
二 含有AP2 结构域的转录因子研究进展 | 第11-16页 |
1 具有AP2 结构域的转录因子的分子结构和功能 | 第12-15页 |
·AP2 亚家族 | 第12页 |
·EREBP 亚家族 | 第12-13页 |
·DREB 亚家族 | 第13-15页 |
·RAV 亚家族 | 第15页 |
2 植物中AP2 结构域的进化上的来源 | 第15-16页 |
三 植物蜡质的研究 | 第16-22页 |
1 概述 | 第16-17页 |
2 蜡质合成的途径 | 第17-22页 |
·C_(16) 和C_(18) 脂酰链的合成途径(质体内合成) | 第17-18页 |
·特长链脂肪酸 VLCFAs 的合成(质体外合成) | 第18-19页 |
·蜡质组成成分的合成途径 | 第19-22页 |
四 酵母中长链脂肪酸的研究 | 第22-26页 |
1 概述 | 第22-23页 |
2 酵母中长链脂肪酸的合成 | 第23-26页 |
·主要途径 | 第23-24页 |
·次要途径 | 第24-26页 |
五 WIN1 是拟南芥中的具有AP2 结构域的转录因子 | 第26-28页 |
六 研究目的、方法及意义 | 第28-29页 |
第二章 实验论文 | 第29-49页 |
一 材料和方法 | 第29-40页 |
1 实验材料 | 第29-31页 |
·WIN1 的序列、质粒及菌种 | 第29页 |
·酶及化学试剂 | 第29页 |
·主要仪器设备 | 第29-30页 |
·培养基 | 第30-31页 |
·质粒提取液 | 第31页 |
·植物材料 | 第31页 |
2 实验方法 | 第31-40页 |
·根据WIN1 的序列全长设计PCR 引物 | 第31页 |
·Trizol 法提取植物总RNA | 第31-32页 |
·逆转录 | 第32页 |
·PCR 反应扩增目的片段 | 第32-33页 |
·DNA 的回收 | 第33页 |
·连T-载体 | 第33-34页 |
·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第34-35页 |
·碱裂解法提取质粒 | 第35页 |
·酶切检测质粒 | 第35-36页 |
·测序 | 第36页 |
·过量表达酵母载体的构建 | 第36页 |
·酵母感受态的制备和转化 | 第36-37页 |
·显微镜下观察酵母细胞涂片 | 第37页 |
·酵母菌落涂板观察 | 第37页 |
·酵母的生长速率测定 | 第37-38页 |
·酵母全细胞脂肪酸甲酯制备 | 第38页 |
·GC—MS 对酵母全细胞脂肪酸进行分析 | 第38-40页 |
二 实验结果与分析 | 第40-47页 |
1 WIN1 基因的克隆及测序 | 第40-41页 |
·Trizol 法提取的拟南芥花序总RNA | 第40页 |
·拟南芥WIN1 基因全长的RT-PCR 扩增检测 | 第40-41页 |
·RT-PCR 产物的克隆及测序 | 第41页 |
2 酵母表达载体的构建 | 第41-43页 |
·重组质粒 p416TEF- WIN1 的构建 | 第41-42页 |
·酵母转化及转基因酵母菌落 PCR 检测 | 第42-43页 |
3 转基因酵母表型分析及脂肪酸组成分析 | 第43-47页 |
·转基因酵母涂片观察 | 第43页 |
·单菌落酵母涂板结果 | 第43-44页 |
·生长速率的测定 | 第44页 |
·GC—MS 结果分析 | 第44-47页 |
三 讨论 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-59页 |
附录 | 第59-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
硕士期间发表的论文 | 第63页 |