摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
1 肌肉与肌内脂肪 | 第12-16页 |
·肌肉的结构特征 | 第12-13页 |
·肌肉的生成过程 | 第13-14页 |
·肌内脂肪 | 第14-16页 |
2 猪肌内脂肪含量相关的侯选基因 | 第16-18页 |
·心脏脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因 | 第16-17页 |
·脂蛋白脂肪酶基因 | 第17页 |
·激素敏感脂肪酶基因 | 第17-18页 |
·其他影响猪IMF含量的QTL | 第18页 |
3 mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)及其研究进展 | 第18-24页 |
·DDRT-PCR技术原理 | 第18-19页 |
·DDRT-PCR优缺点 | 第19-20页 |
·DDRT-PCR技术发展与改进 | 第20-23页 |
·DDRT-PCR在猪育种中的应用 | 第23-24页 |
4 本研究的目的意义 | 第24-28页 |
第二章 差异条带的获得与测序比对 | 第28-48页 |
1 实验材料 | 第28-31页 |
·试验动物 | 第28-29页 |
·网络资源及软件 | 第29页 |
·试剂 | 第29-30页 |
·仪器设备 | 第30-31页 |
2 实验方法 | 第31-36页 |
·背最长肌肌内脂肪含量的测定 | 第31页 |
·背最长肌组织RNA提取 | 第31-32页 |
·甲醛变性琼脂糖凝胶电泳鉴定RNA质量 | 第32页 |
·RNA池的制备 | 第32页 |
·DNase Ⅰ处理 | 第32-33页 |
·cDNA的合成 | 第33页 |
·DDRT-PCR反应 | 第33-34页 |
·12%聚丙烯酰胺凝胶制作及电泳 | 第34页 |
·银染法显色 | 第34-35页 |
·差异片段的切取 | 第35页 |
·差异片段的再扩增 | 第35页 |
·PCR产物测序 | 第35-36页 |
·数据统计 | 第36页 |
3.结果 | 第36-44页 |
·背最长肌肌内脂肪含量的测定 | 第36-37页 |
·RNA纯度与浓度 | 第37页 |
·cDNA鉴定结果 | 第37-38页 |
·mRNA差异显示结果 | 第38-39页 |
·差异片段的回收与再次扩增 | 第39页 |
·差异片段纯化测序 | 第39页 |
·差异片段的序列分析 | 第39-44页 |
3 讨论 | 第44-48页 |
·适宜猪背最长肌mRNA差异显示分析总RNA的提取 | 第44-45页 |
·猪背最长肌mRNA差异显示技术反应体系优化及建立 | 第45-46页 |
·SNX17、SFRS18、MYH4基因与其所属蛋白家族 | 第46-48页 |
第三章 SNX17、SFRS18与MYH4的DDRT-PCR结果鉴定 | 第48-56页 |
1 实验材料 | 第48-49页 |
·试验动物 | 第48页 |
·网络资源及软件 | 第48页 |
·试剂 | 第48-49页 |
·仪器设备 | 第49页 |
2 实验方法 | 第49-52页 |
·RNA提取与RNA池的制备 | 第49页 |
·第一链cDNA的合成 | 第49-50页 |
·PCR扩增 | 第50-51页 |
·数据分析 | 第51-52页 |
3 结果与分析 | 第52-56页 |
全文结论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
附录 | 第66-70页 |
致谢 | 第70-72页 |
攻读硕士研究生期间发表论文情况 | 第72页 |