| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-17页 |
| ·池蝶蚌简介 | 第9页 |
| ·生物矿化概述 | 第9-10页 |
| ·贝壳的结构及珍珠的形成 | 第10-11页 |
| ·贝类的钙代谢 | 第11页 |
| ·贝壳基质蛋白研究进展 | 第11-12页 |
| ·钙调蛋白(CaM)研究进展 | 第12-14页 |
| ·CaM的结构 | 第12-13页 |
| ·CaM的功能 | 第13-14页 |
| ·贝类外套膜与生物矿化 | 第14页 |
| ·贝类珍珠囊概述 | 第14-15页 |
| ·本实验室关于池蝶蚌CaM已有的研究结果 | 第15页 |
| ·本研究的目的、内容及意义 | 第15-17页 |
| 第2章 钙调蛋白在池蝶蚌外套膜及珍珠囊中的表达特性 | 第17-32页 |
| ·材料与方法 | 第17-20页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·荧光定量PCR引物设计 | 第17-18页 |
| ·cDNA模板的准备 | 第18-19页 |
| ·QRT-PCR | 第19-20页 |
| ·实验结果 | 第20-30页 |
| ·总RNA提取结果 | 第20-21页 |
| ·cDNA模板检测 | 第21页 |
| ·植核蚌外套膜和珍珠囊以及未植核蚌外套膜中的钙调蛋白的表达 | 第21-30页 |
| ·分析与讨论 | 第30-32页 |
| 第3章 池蝶蚌钙调蛋白在外套膜和珍珠囊中的定位研究 | 第32-49页 |
| ·实验材料与方法 | 第32-38页 |
| ·蛋白表达引物的设计 | 第32页 |
| ·表达片段PCR扩增 | 第32-33页 |
| ·PCR扩增产物的检测 | 第33页 |
| ·PCR产物的切胶回收 | 第33页 |
| ·池蝶蚌pET-28a-CaM重组质粒的构建与鉴定 | 第33-35页 |
| ·重组质粒的诱导表达及超声波破碎重组菌 | 第35-36页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第37页 |
| ·钙调蛋白多克隆抗体制备 | 第37页 |
| ·钙调蛋白多克隆抗体效价测定 | 第37页 |
| ·池蝶蚌外套膜及珍珠囊组织冰冻切片的制作 | 第37-38页 |
| ·免疫荧光染色 | 第38页 |
| ·实验结果 | 第38-47页 |
| ·目的片段PCR扩增结果 | 第38-39页 |
| ·PCR产物回收结果 | 第39-40页 |
| ·附性重组质粒的筛选 | 第40页 |
| ·双酶切鉴定重组质粒 | 第40页 |
| ·目的蛋白诱导表达 | 第40-41页 |
| ·CaM融合蛋白的纯化 | 第41-42页 |
| ·Bradford法测定融合蛋白浓度 | 第42-43页 |
| ·钙调蛋白多隆抗体效价测定 | 第43-44页 |
| ·池蝶蚌CaM在外套膜及珍珠囊组织上的免疫荧光定位 | 第44-47页 |
| ·分析与讨论 | 第47-49页 |
| 第4章 小结 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
