| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-17页 |
| 引言 | 第17-18页 |
| 第一部分 文献综述、研究内容与技术路线 | 第18-30页 |
| 第一章 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)的研究进展 | 第19-28页 |
| 1 TRAIL的生物学特点 | 第19-20页 |
| 2 TRAIL的受体 | 第20-22页 |
| 3 TRAIL诱导细胞凋亡的途径 | 第22-24页 |
| 4 细胞逃逸TRAIL杀伤作用的机制 | 第24-26页 |
| 5 TRAIL在人类肿瘤治疗中的应用 | 第26-27页 |
| 6 贝类TRAIL的研究及其意义 | 第27-28页 |
| 第二章 研究内容与技术路线 | 第28-30页 |
| 1 研究内容 | 第28-29页 |
| 2 技术路线概要 | 第29-30页 |
| 第二部分 近江牡蛎sTRAIL促细胞凋亡及抗类立克次体感染免疫的研究 | 第30-75页 |
| 第三章 近江牡蛎sTRAIL(CasTRAIL)cDNA序列的克隆与分析 | 第31-42页 |
| 1 材料和方法 | 第32-37页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-37页 |
| 2 结果 | 第37-40页 |
| ·总RNA的制备 | 第37-38页 |
| ·CasTRAIL cDNA片段的克隆与鉴定 | 第38页 |
| ·CasTRAIL cDNA的序列分析 | 第38-40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 CasTRAIL的原核表达与鉴定 | 第42-52页 |
| 1 材料和方法 | 第42-47页 |
| ·材料 | 第42-44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| 2 结果 | 第47-50页 |
| ·CasTRAIL原核表达载体的构建与酶切鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第48-49页 |
| ·多克隆抗体制备 | 第49-50页 |
| ·Western blot分析 | 第50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 近江牡蛎TRAIL的组织表达与亚细胞分布 | 第52-59页 |
| 1 材料和方法 | 第52-56页 |
| ·材料 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53-56页 |
| 2 结果 | 第56-57页 |
| ·近江牡蛎TRAIL基因在正常组织中表达的RT-PCR检测 | 第56页 |
| ·近江牡蛎TRAIL基因表达的原位杂交检测 | 第56-57页 |
| ·近江牡蛎TRAIL蛋白的亚细胞分布 | 第57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 第六章 CasTRAIL对牡蛎血淋巴细胞和肿瘤细胞的毒性作用与及其机制分析 | 第59-68页 |
| 1 材料和方法 | 第60-63页 |
| ·材料 | 第60-61页 |
| ·方法 | 第61-63页 |
| 2 结果 | 第63-66页 |
| ·CasTRAIL对牡蛎血淋巴细胞的细胞毒性作用 | 第63-64页 |
| ·CasTRAIL对血淋巴细胞中MAPKs(p38、ERK和JNK)磷酸化水平的影响 | 第64页 |
| ·CasTRAIL对肿瘤细胞HL-60凋亡的促进作用 | 第64-66页 |
| 3 讨论 | 第66-68页 |
| 第七章 CasTRAIL在抗类立克次体(RLO)感染免疫反应中的功能与作用机理分析 | 第68-75页 |
| 1 材料和方法 | 第68-72页 |
| ·材料 | 第68-69页 |
| ·方法 | 第69-72页 |
| 2 结果 | 第72-73页 |
| ·CasTRAIL在RLOs感染免疫反应中的功能 | 第72-73页 |
| ·CasTRAIL对牡蛎血淋巴细胞中p38和LITAF基因表达水平的影响 | 第73页 |
| 3 讨论 | 第73-75页 |
| 第三部分 类立克次体诱导刺激后近江牡蛎Tolloid-like、MAK3和p38EAPK基因的克隆与鉴定 | 第75-106页 |
| 第八章 类立克次体诱导刺激下近江牡蛎Tolloid-like基因的克隆、表达与功能分析 | 第76-88页 |
| 1 材料和方法 | 第77-80页 |
| ·材料 | 第77页 |
| ·方法 | 第77-80页 |
| 2 结果 | 第80-85页 |
| ·CaTLL基因片段的的克隆 | 第80页 |
| ·CaTLL cDNA全长的克隆与序列分析 | 第80-84页 |
| ·近江牡蛎不同组织中CaTLL的表达分析 | 第84-85页 |
| ·类立克次体诱导刺激后血淋巴细胞中CaTLL的表达分析 | 第85页 |
| 3 讨论 | 第85-88页 |
| 第九章 类立克次体诱导刺激下近江牡蛎MAK3基因的克隆、表达与功能分析 | 第88-97页 |
| 1 材料和方法 | 第89-90页 |
| ·材料 | 第89页 |
| ·方法 | 第89-90页 |
| 2 结果 | 第90-95页 |
| ·CaMAK3基因片段的的克隆 | 第90页 |
| ·CaMAK3的序列分析 | 第90-93页 |
| ·CaMAK3原核表达载体的构建与鉴定 | 第93-94页 |
| ·近江牡蛎不同组织中CaMAK3的表达分析 | 第94页 |
| ·类立克次体诱导刺激后血淋巴细胞中CaMAK3的表达分析 | 第94-95页 |
| 3 讨论 | 第95-97页 |
| 第十章 类立克次体诱导刺激下近江牡蛎p38基因的克隆、表达与功能分析 | 第97-106页 |
| 1 材料和方法 | 第99-100页 |
| ·材料 | 第99页 |
| ·方法 | 第99-100页 |
| 2 结果 | 第100-104页 |
| ·Cap38基因片段的的克隆 | 第100页 |
| ·Cap38全长cDNA的克隆与序列分析 | 第100-103页 |
| ·近江牡蛎不同组织中Cap38的表达分析 | 第103页 |
| ·类立克次体诱导刺激后血淋巴细胞中Cap38的表达分析 | 第103-104页 |
| 3 讨论 | 第104-106页 |
| 全文小结 | 第106-110页 |
| 参考文献 | 第110-122页 |
| 附录 攻读博士期间发表的论文与专利 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
