旋毛虫P53ES基因重组蛋白单克隆抗体的制备和鉴定
| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-25页 |
| ·旋毛虫及旋毛虫病 | 第13页 |
| ·旋毛虫病的流行状况 | 第13-14页 |
| ·旋毛虫诊断方法的研究进展 | 第14-18页 |
| ·病原学诊断 | 第14页 |
| ·免疫学诊断 | 第14-18页 |
| ·旋毛虫诊断抗原的研究进展 | 第18-23页 |
| ·虫体抗原 | 第18-19页 |
| ·表面抗原 | 第19页 |
| ·杆细胞颗粒相关抗原 | 第19页 |
| ·排泄-分泌抗原(ES 抗原) | 第19-21页 |
| ·旋毛虫重组抗原 | 第21-23页 |
| ·旋毛虫单克隆抗体的研究 | 第23-24页 |
| ·本课题研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-36页 |
| ·实验材料 | 第25-28页 |
| ·菌株 | 第25页 |
| ·实验动物和细胞 | 第25页 |
| ·旋毛虫虫种 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要溶液的配制 | 第25-27页 |
| ·主要仪器 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-36页 |
| ·P53 重组蛋白的表达与纯化 | 第28-30页 |
| ·ES 抗原制备方法 | 第30页 |
| ·旋毛虫阴性及阳性血清的制备 | 第30-31页 |
| ·动物的免疫 | 第31页 |
| ·间接ELISA 检测方法的建立 | 第31-32页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第32-33页 |
| ·单克隆抗体及杂交瘤细胞的特性鉴定 | 第33-36页 |
| 3 结果 | 第36-43页 |
| ·P53 重组蛋白的表达与纯化 | 第36-37页 |
| ·P53 重组蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第36页 |
| ·纯化后P53 重组蛋白浓度的测定 | 第36页 |
| ·重组蛋白的Western-blot 分析 | 第36-37页 |
| ·细胞融合与筛选 | 第37-39页 |
| ·ELISA 筛选方法的建立 | 第37-38页 |
| ·细胞融合率的计算 | 第38页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选与建立 | 第38-39页 |
| ·杂交瘤细胞的鉴定 | 第39页 |
| ·杂交瘤细胞的染色体分析 | 第39页 |
| ·杂交瘤分泌抗体稳定性鉴定 | 第39页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第39-43页 |
| ·杂交瘤细胞培养上清液效价的测定 | 第39-40页 |
| ·腹水单抗效价测定 | 第40页 |
| ·抗体亚类鉴定结果 | 第40-41页 |
| ·Western-blot 鉴定 | 第41页 |
| ·单克隆抗体交叉反应 | 第41-42页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| ·免疫原的选择 | 第43页 |
| ·细胞的融合和克隆 | 第43-44页 |
| ·单克隆抗体的特异性 | 第44页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第44-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第53页 |
