| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-21页 |
| ·脐血造血干/祖细胞 | 第11-14页 |
| ·造血干/祖细胞的定义 | 第11页 |
| ·造血干/祖细胞的生物学特征 | 第11-13页 |
| ·脐血造血干/祖细胞的特点和应用 | 第13-14页 |
| ·低温保存 | 第14-21页 |
| ·低温保存技术的发展 | 第14-15页 |
| ·低温损伤机理及其假说 | 第15-17页 |
| ·冷冻保护剂 | 第17页 |
| ·玻璃化技术 | 第17-18页 |
| ·造血干细胞的低温保存 | 第18-20页 |
| ·本文工作思路及主要内容 | 第20-21页 |
| 2 脐血来源的造血干/祖细胞分离 | 第21-27页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·脐血来源 | 第21页 |
| ·实验药品与装置 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-24页 |
| ·实验试剂配制 | 第22-23页 |
| ·造血干/祖细胞的分离 | 第23页 |
| ·台盼蓝拒染法检测细胞活率 | 第23-24页 |
| ·单个有核细胞短期静态培养 | 第24页 |
| ·结果与讨论 | 第24-27页 |
| 3 玻璃化冷冻对造血干/祖细胞的活率和生物学特征的影响 | 第27-42页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·细胞来源 | 第27-28页 |
| ·实验仪器与药品 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·台盼蓝拒染法检测细胞活率 | 第29页 |
| ·检测玻璃化冷冻过程各操作后的细胞活率 | 第29页 |
| ·流式细胞术检测CD34~+细胞数目 | 第29-30页 |
| ·冷冻复苏后细胞生长曲线的测定 | 第30页 |
| ·集落培养 | 第30-31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-42页 |
| ·玻璃化冷冻后单个有核细胞的回收率 | 第31-32页 |
| ·玻璃化冷冻过程各操作环节后单个有核细胞的回收率 | 第32-33页 |
| ·玻璃化冷冻后CD34~+细胞的回收率 | 第33-35页 |
| ·冷冻复苏后细胞的生长曲线 | 第35-37页 |
| ·玻璃化冷冻后造血干/祖细胞的集落形成能力 | 第37-42页 |
| 4 玻璃化冷冻方案导入过程中细胞体积的皱缩与恢复 | 第42-50页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-45页 |
| ·联合玻璃化保护剂的配制 | 第43页 |
| ·联合玻璃化保护剂渗透压的测定 | 第43-44页 |
| ·单个有核细胞原始体积的测定 | 第44页 |
| ·保护剂导入过程不同时间细胞的体积测定 | 第44-45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-50页 |
| ·联合玻璃化保护剂的渗透压 | 第45-46页 |
| ·单个有核细胞原始体积 | 第46-47页 |
| ·平衡时间为90s的分步导入过程中细胞体积变化 | 第47-50页 |
| 5 导入过程平衡时间的优化设计 | 第50-60页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-53页 |
| ·第一步导入联合玻璃化保护剂后细胞体积变化的测定 | 第51页 |
| ·第一步导入联合玻璃化保护剂后细胞活率的检测 | 第51-52页 |
| ·第二步导入联合玻璃化保护剂后细胞体积变化的测定 | 第52页 |
| ·第二步导入联合玻璃化保护剂后细胞活率的检测 | 第52页 |
| ·后续的导入过程研究 | 第52-53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-60页 |
| ·第一步导入平衡时间的确定 | 第53-54页 |
| ·第二步导入平衡时间的确定 | 第54-55页 |
| ·第三步导入平衡时间的确定 | 第55-56页 |
| ·第四步导入平衡时间的确定 | 第56-58页 |
| ·第五步导入平衡时间的确定 | 第58-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 附录A 单个有核细胞尺寸统计 | 第65-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |