| 内容提要 | 第1-8页 |
| 英文缩略词 | 第8-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-24页 |
| ·丝氨酸蛋白酶家族 | 第10-11页 |
| ·巴曲酶的研究背景 | 第11页 |
| ·巴曲酶的结构和功能 | 第11-14页 |
| ·巴曲酶基本结构 | 第11-13页 |
| ·巴曲酶功能概要 | 第13-14页 |
| ·巴曲酶与凝血酶凝血的差异 | 第14-17页 |
| ·内源性凝血 | 第15-16页 |
| ·外源性凝血 | 第16页 |
| ·凝血酶作用通路的开启 | 第16页 |
| ·SVTLEs的作用机理 | 第16-17页 |
| ·巴曲酶的凝血、降纤双向途径 | 第17页 |
| ·巴曲酶的研究现状与前景 | 第17-18页 |
| ·重组巴曲酶表达体系的选择 | 第18-22页 |
| ·原核表达体系 | 第18-19页 |
| ·真核表达系统 | 第19-22页 |
| ·重组巴曲酶实验设计流程 | 第22-23页 |
| ·立题依据 | 第23-24页 |
| 第2章 巴曲酶在毕赤酵母中的表达 | 第24-40页 |
| ·材料和方法 | 第24-33页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·方法 | 第26-33页 |
| ·结果 | 第33-38页 |
| ·巴曲酶目的基因的获得 | 第33-34页 |
| ·重组质粒pPICZαC-batroxobin的酶消化鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组质粒pPICZαC-batroxobin的鉴定 | 第35页 |
| ·PCR方法筛选巴曲酶基因转化阳性菌株 | 第35-36页 |
| ·重组质粒pPICZαC-batroxobin DNA测序结果(见附录2) | 第36页 |
| ·重组巴曲酶活力 | 第36-37页 |
| ·SDS-PAGE鉴定重组巴曲酶 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第3章 巴曲酶摇瓶水平发酵及纯化 | 第40-55页 |
| ·材料和方法 | 第40-42页 |
| ·材料 | 第40-42页 |
| ·方法 | 第42-46页 |
| ·毕赤酵母表达巴曲酶的最佳pH的确定 | 第42-43页 |
| ·重组巴曲酶毕赤酵母摇瓶水平表达 | 第43-46页 |
| ·结果 | 第46-50页 |
| ·毕赤酵母表达巴曲酶的最佳pH确定 | 第46页 |
| ·摇瓶水平高密度发酵细胞湿重和培养液A_(600)经时变化 | 第46-47页 |
| ·巴曲酶摇瓶水平发酵最佳表达时间的确定 | 第47页 |
| ·巴曲酶小规模纯化结果 | 第47-50页 |
| ·讨论 | 第50-55页 |
| ·重组巴曲酶的表达条件的探讨 | 第50-52页 |
| ·重组巴曲酶纯化方法的探讨 | 第52-55页 |
| 研究总结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 附录 | 第62-65页 |
| 中文摘要 | 第65-67页 |
| ABSTRACT | 第67-68页 |
