| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 缩略词 | 第11-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-22页 |
| ·蛋白激酶 | 第13-16页 |
| ·蛋白激酶概述 | 第13页 |
| ·蛋白激酶的种类与分类 | 第13-15页 |
| ·蛋白激酶活性调节 | 第15-16页 |
| ·蛋白激酶自身磷酸化对激酶活性调节 | 第15-16页 |
| ·蛋白激酶相互磷酸化对激酶活性的调节 | 第16页 |
| ·调节剂对蛋白激酶活性的调节 | 第16页 |
| ·酪蛋白激酶 | 第16-20页 |
| ·酪蛋白激酶概述 | 第16-17页 |
| ·酪蛋白激酶CK1 | 第17-20页 |
| ·哺乳动物和酵母中CKl家族成员概述和分类 | 第17-19页 |
| ·CK1蛋白的结构和功能 | 第19-20页 |
| ·本论文研究目的、意义与内容 | 第20-22页 |
| ·研究目的与意义 | 第20页 |
| ·研究背景与内容 | 第20-22页 |
| 第2章 拟南芥CK1A基因的生物信息学分析 | 第22-34页 |
| ·材料与方法 | 第22-23页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-23页 |
| ·CK1A转录调控区域元件分析 | 第22页 |
| ·CK1A的氨基酸序列的同源性分析 | 第22-23页 |
| ·CK1A蛋白的一级结构分析 | 第23页 |
| ·CK1A蛋白的三级结构分析 | 第23页 |
| ·结果与讨论 | 第23-33页 |
| ·CK1A基因的转录调控区域元件分析 | 第23-26页 |
| ·拟南芥CK1A氨基酸序列的同源性分析 | 第26-27页 |
| ·拟南芥CK1A蛋白的一级结构分析 | 第27-31页 |
| ·CK1A蛋白的信号肽序列分析 | 第27-28页 |
| ·CK1A蛋白跨膜结构域的预测 | 第28页 |
| ·CK1A蛋白亲疏水性分析 | 第28-29页 |
| ·CK1A蛋白修饰位点预测 | 第29-31页 |
| ·拟南芥CK1A蛋白的三级结构预测 | 第31-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第3章 拟南芥CK1A基因的表达及功能分析 | 第34-43页 |
| ·材料与方法 | 第34-40页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·酶和试剂 | 第34-35页 |
| ·仪器 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-40页 |
| ·拟南芥总DNA的提取 | 第35页 |
| ·总RNA提取及逆转录反应 | 第35-36页 |
| ·引物设计 | 第36页 |
| ·PCR条件的优化 | 第36-37页 |
| ·半定量RT-PCR | 第37-38页 |
| ·35S-GW-GFP-CK1A融合表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·洋葱表皮细胞定位检测 | 第39-40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-42页 |
| ·拟南芥CK1A基因的表达特异性分析及细胞定位 | 第40-41页 |
| ·CK1A:GFP融合表达载体的构建及瞬时表达分析 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第4章 CK1A蛋白的原核表达与酵母双杂交分析 | 第43-55页 |
| ·材料与方法 | 第43-50页 |
| ·实验材料 | 第43-45页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·酶和试剂 | 第44-45页 |
| ·仪器 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-50页 |
| ·CK1A基因片段的制备 | 第45页 |
| ·pCold表达载体的制备 | 第45页 |
| ·大肠杆菌DH5a和BL21 star感受态细胞的制备 | 第45-46页 |
| ·质粒对大肠杆菌的转化 | 第46页 |
| ·酶切和连接反应 | 第46-47页 |
| ·蛋白诱导表达 | 第47页 |
| ·表达产物的可溶性检测 | 第47页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第47-48页 |
| ·高效酵母转化方法 | 第48-49页 |
| ·滤纸显色检测 | 第49页 |
| ·Prey载体的构建 | 第49页 |
| ·Bait载体的构建 | 第49-50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-54页 |
| ·CK1A基因片段的克隆与的原核表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·CK1A原核表达产物的SDS-PAGE检测 | 第51-52页 |
| ·与CRY2相互作用蛋白的初步筛选 | 第52页 |
| ·与CRY2相互作用的基因克隆及酵母双杂交载体构建 | 第52页 |
| ·筛库结果的酵母双杂交验证分析 | 第52-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录A:攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
