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高GC含量人类基因组DNA片段扩增方法的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
1 前言第8-22页
   ·立题的背景第8页
   ·PCR技术概论第8-13页
     ·PCR技术的发明及基本原理第8-10页
     ·PCR反应体系第10-12页
     ·PCR循环体系第12-13页
     ·PCR产物的检测第13页
     ·PCR技术的特点第13页
   ·PCR添加剂研究概述第13-17页
   ·限制性内切酶简述第17-19页
     ·限制性内切酶的发现第17页
     ·限制性内切酶的分类第17-19页
   ·Z曲线的概述第19-20页
     ·Z曲线的形成及其生化意义第19-20页
     ·Z曲线的应用第20页
   ·有机试剂简述第20-21页
     ·有机试剂的特点第20页
     ·有机试剂的分类和应用第20-21页
   ·本文的主要研究内容及意义第21-22页
2 材料与方法第22-31页
   ·实验材料第22-23页
   ·主要仪器设备第23页
   ·试验方法第23-28页
     ·人类基因组DNA的制备第23-24页
     ·PCR添加剂的配置第24页
     ·引物的设计及配置第24-25页
     ·PCR反应体系的配置及运行条件第25页
     ·PCR产物检测方法第25-26页
     ·人类全基因组基因内高GC片段生物信息查询方法第26页
     ·Z曲线的绘制第26页
     ·磁珠纯化扩增高GC片段的方法第26-27页
     ·酶切反应第27-28页
   ·GC-RICH PCR模型建立的方法第28-31页
3 结果与讨论第31-60页
   ·人类全基因组中基因内高GC片段分布情况第31-34页
     ·高GC片段按GC含量在全基因组的分布情况第31-32页
     ·高GC片段按长度在全基因组的分别情况第32-33页
     ·高GC片段按位置在全基因组的分别情况第33-34页
   ·Z曲线显示DNA序列的特征第34-36页
     ·DNA序列的GC曲线第34-35页
     ·DNA序列的三维Z曲线第35-36页
   ·磁珠纯化对扩增高GC片段的影响第36-38页
   ·限制性内切酶的实验结果第38-43页
     ·序列分析第38-39页
     ·酶切对PCR效率的影响第39-43页
   ·有机试剂对扩增的影响第43-48页
     ·28种有机试剂对易于扩增引物的影响第43-44页
     ·10种有机试剂对特殊处理后能扩增引物的影响第44-45页
     ·10种有机试剂对难扩增引物的影响第45-48页
   ·GC-rich PCR模型的建立第48-58页
     ·98对引物本身的扩增第48-49页
     ·98对引物添加甜菜碱的扩增第49-50页
     ·98对引物添加1,2-丙二醇的扩增第50-52页
     ·98对引物添加乙二醇的扩增第52-53页
     ·1,2-丙二醇、乙二醇和甜菜碱的混合扩增第53-55页
     ·纳米材料的扩增第55-58页
     ·4、37、49号新引物的扩增第58页
   ·讨论第58-60页
4 结论第60-61页
5 展望第61-62页
6 参考文献第62-67页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第67-68页
8 致谢第68页

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