摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-20页 |
·CDNA 文库研究进展 | 第8-14页 |
·cDNA 文库的载体系统 | 第8-9页 |
·cDNA 文库构建方法 | 第9-13页 |
·cDNA 文库的质量检测 | 第13页 |
·cDNA 文库的应用 | 第13-14页 |
·人胎盘溶菌酶基因的概况 | 第14-17页 |
·人溶菌酶基因的研究进展 | 第14-15页 |
·人溶菌酶的生物学作用 | 第15-16页 |
·开发人溶菌酶的必要性 | 第16-17页 |
·转基因技术 | 第17-20页 |
·转基因技术的概况 | 第17页 |
·荧光蛋白在转基因技术中的应用 | 第17-18页 |
·转基因靶细胞的体外培养及生物学特性鉴定 | 第18-20页 |
第二章 人胎盘组织 CDNA 文库的构建与鉴定 | 第20-30页 |
·实验材料与方法 | 第20-26页 |
·实验材料 | 第20-21页 |
·试验方法 | 第21-26页 |
·结果与分析 | 第26-28页 |
·总RNA 的提取 | 第26页 |
·cDNA 文库的构建 | 第26-27页 |
·cDNA 文库的扩增及质量检测 | 第27-28页 |
·讨论 | 第28-30页 |
·总RNA 的提取及其完整性的检测 | 第28页 |
·cDNA 文库的评价 | 第28-30页 |
第三章 人溶菌酶HLYZ 基因的筛选及研究 | 第30-53页 |
·实验材料 | 第30-31页 |
·实验材料 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
·主要仪器设备 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-41页 |
·从人胎盘cDNA 文库中筛选溶菌酶基因 | 第31-33页 |
·人胎盘HLYz 基因CDS 区的克隆及真核表达载体的构建及表达 | 第33-37页 |
·人胎盘HLYz 基因CDS 区的克隆及原核表达载体的构建及表达 | 第37-41页 |
·结果与分析 | 第41-50页 |
·HLYz 目的基因片段的扩增 | 第41页 |
·HLYz 目的基因CDS 区的扩增 | 第41页 |
·测序结果 | 第41-43页 |
·真核表达载体质粒和HLYz 克隆质粒的双酶切 | 第43页 |
·原核表达载体质粒和HLYz 克隆质粒的双酶切 | 第43-44页 |
·真核重组质粒pEGFP-N3-H-LYz 电泳检测 | 第44页 |
·原核重组质粒PGEX-4T-1-H-LYz 电泳检测 | 第44-45页 |
·原核表达重组载体质粒双酶切鉴定 | 第45页 |
·转基因靶细胞的培养 | 第45-48页 |
·目的基因在大肠杆菌的表达情况 | 第48-50页 |
·讨论 | 第50-53页 |
·目的基因的筛选 | 第50-51页 |
·表达载体的选择与构建 | 第51页 |
·靶细胞的培养及检测 | 第51页 |
·重组质粒的转染及影响转染的因素 | 第51-52页 |
·亚细胞定位 | 第52页 |
·原核表达 | 第52-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
缩略词表 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简介 | 第62页 |