| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-16页 |
| 1 引言 | 第16-37页 |
| ·HDL 的结构和功能 | 第16-22页 |
| ·血浆脂蛋白分类 | 第16-18页 |
| ·HDL 的结构和功能 | 第18-22页 |
| ·A 群链球菌胶原样蛋白 | 第22-26页 |
| ·A 群链球菌及其致病因子 | 第22-23页 |
| ·A 群链球菌胶原样蛋白 | 第23-26页 |
| ·Lp(a)的结构和功能 | 第26-33页 |
| ·Lp(a)的结构和代谢 | 第27-29页 |
| ·Lp(a)的生理功能 | 第29-32页 |
| ·Lp(a)的致病性 | 第32-33页 |
| ·Lp(a)的分离纯化 | 第33页 |
| ·金黄色葡萄球菌致病性及细胞表面的纤溶酶原受体 | 第33-35页 |
| ·金黄色葡萄球菌致病性及毒力因子 | 第33-34页 |
| ·金黄色葡萄球菌纤溶酶原激活剂及受体 | 第34-35页 |
| ·立题依据 | 第35-36页 |
| ·研究内容 | 第36-37页 |
| 第一部分 rScl1 与 HDL 的结合 | 第37-90页 |
| 2 M41 型A 群链球菌I 型胶原样蛋白通过疏水作用与高密度脂蛋白结合 | 第37-63页 |
| ·实验材料 | 第37-41页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37-41页 |
| ·实验方法 | 第41-50页 |
| ·A 群链球菌CMCC32198 基因组DNA 的提取 | 第42页 |
| ·DNA 的琼脂糖凝胶电泳 | 第42-43页 |
| ·C176 基因的扩增 | 第43页 |
| ·C176 基因扩增产物的纯化 | 第43-44页 |
| ·C176 DNA 片断的酶切及纯化 | 第44页 |
| ·pASK-IBA2 载体的酶切及纯化 | 第44页 |
| ·酶切C176 DNA 片段与pASK-IBA2 载体的连接 | 第44-45页 |
| ·P176、C176 转化感受态E.coli BL21 | 第45页 |
| ·菌落PCR 鉴定转化阳性的菌落 | 第45-46页 |
| ·序列测定 | 第46页 |
| ·工程菌培养 | 第46页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第46-47页 |
| ·重组P176 及C176 的纯化 | 第47-48页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第48页 |
| ·P176 及C176 与纯的的HDL 的亲和色谱实验（Pull down） | 第48页 |
| ·Dot blot 检测Pull down 结果 | 第48-49页 |
| ·ELISA 检测P176、C176 与HDL 的结合 | 第49页 |
| ·Tween 20 抑制P176，C176 与HDL 的结合 | 第49页 |
| ·P176 及C176 与血浆的Pull down 实验 | 第49页 |
| ·Western Blot 检测P176 及C176 与血浆的Pull down 实验 | 第49-50页 |
| ·结果 | 第50-61页 |
| ·pASK-IBA2-P176 及pASK-IBA2-C176 表达载体的构建 | 第50-55页 |
| ·P176 及C176 蛋白的表达 | 第55-59页 |
| ·P176 及C176 与HDL 的结合实验 | 第59-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 3 M41 型A 群链球菌I 型胶原样蛋白与高密度脂蛋白结合的具体部位 | 第63-86页 |
| ·实验材料 | 第63页 |
| ·实验方法 | 第63-68页 |
| ·C176V、P176T、C176T 目的基因的扩增 | 第63-65页 |
| ·P176L1、P176L2 基因的扩增 | 第65页 |
| ·DNA 片段的酶切及纯化 | 第65页 |
| ·pASK-IBA2 载体的酶切及纯化 | 第65页 |
| ·酶切后DNA 片段与pASK-IBA2 载体的连接 | 第65-66页 |
| ·连接产物转化感受态E.coli BL21 | 第66页 |
| ·菌落PCR 鉴定转化阳性的菌落 | 第66页 |
| ·序列测定 | 第66页 |
| ·工程菌培养 | 第66页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第66页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第66页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第66页 |
| ·P176V、C176V、P176T、C176T、P176L1、P176L2 与纯的的HDL 的亲和色谱实验（Pull down） | 第66-67页 |
| ·Dot blot 检测Pull down 结果 | 第67页 |
| ·ELISA 检测P176V、C176V、P176T、C176T、P176L1、P176L2 与HDL的结合 | 第67-68页 |
| ·统计学处理 | 第68页 |
| ·实验结果 | 第68-84页 |
| ·C176V、P176T、C176T 目的基因扩增结果 | 第68-69页 |
| ·P176L1、P176L2 基因的扩增 | 第69-71页 |
| ·酶切、连接及转化结果的鉴定 | 第71-74页 |
| ·序列测定结果 | 第74-75页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第75-77页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第77-82页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第82-83页 |
| ·重组蛋白与HDL 的Pull down 实验 | 第83页 |
| ·ELISA 检测rSc11 与HDL 的结合 | 第83-84页 |
| ·讨论 | 第84-85页 |
| ·小结 | 第85-86页 |
| 4 M41 型 A 群链球菌 I 型胶原样蛋白在分离 HDL 及制备无脂血清中的潜在用途 | 第86-90页 |
| ·实验材料 | 第86页 |
| ·实验方法 | 第86-87页 |
| ·C176 的克隆、表达、纯化 | 第86页 |
| ·用C176 吸附血浆脂蛋白 | 第86页 |
| ·用C176 分离HDL | 第86-87页 |
| ·实验结果 | 第87-88页 |
| ·用C176 吸附血浆脂蛋白 | 第87-88页 |
| ·用C176 分离HDL | 第88页 |
| ·讨论 | 第88-89页 |
| ·小结 | 第89页 |
| ·第一部分的结论 | 第89-90页 |
| 第二部分 血浆LP(A)抑制金黄色葡萄球菌对PLG 的吸附 | 第90-102页 |
| 5 血浆LP(A)抑制金黄色葡萄球菌对PLG 的吸附 | 第90-101页 |
| ·材料和方法 | 第90-94页 |
| ·材料 | 第90-91页 |
| ·方法 | 第91-94页 |
| ·结果 | 第94-99页 |
| ·Lp(a)分离纯化结果 | 第94-97页 |
| ·金黄色葡萄球菌与 Lp(a)的结合 | 第97-98页 |
| ·结合机制研究 | 第98-99页 |
| ·Lp(a)抑制金黄色葡萄球菌吸附Plg 的实验 | 第99页 |
| ·讨论 | 第99-100页 |
| ·小结 | 第100-101页 |
| 6. 结论 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-113页 |
| 附录 | 第113-116页 |
| 作者简介 | 第116页 |
