摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 引言 | 第9-25页 |
·肿瘤坏死因子及其受体超家族 | 第10-11页 |
·死亡受体 | 第11-18页 |
·死亡受体的结构特征 | 第12-13页 |
·死亡受体胞外区的特征 | 第12页 |
·死亡受体胞内区的特征 | 第12-13页 |
·死亡受体的信号转导途径 | 第13-18页 |
·死亡结构域信号转导相关蛋白的主要结构 | 第13-15页 |
·TNF受体相关的死亡结构域蛋白TRADD | 第13-14页 |
·Fas相关死亡结构域蛋白FADD | 第14-15页 |
·受体相互作用蛋白RIP | 第15页 |
·死亡结构域信号相关蛋白在死亡受体信号转导中的作用 | 第15-16页 |
·死亡受体介导的几种信号转导途径 | 第16-18页 |
·TNFR Ⅰ的信号传导途径 | 第16页 |
·CD95的信号转导途径 | 第16页 |
·TRAIL信号通路 | 第16-18页 |
·死亡受体死亡结构域的结构与功能的关系 | 第18页 |
·死亡受体6 | 第18-25页 |
·死亡受体6的序列、结构和表达 | 第19-20页 |
·死亡受体6的信号通路 | 第20-24页 |
·死亡受体6的生物学功能 | 第24-25页 |
·死亡受体6调节CD4~+T细胞增殖和辅助性T细胞分化 | 第24页 |
·死亡受体6调节B细胞生长、生存和体液应答 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-37页 |
·材料 | 第25-28页 |
·细胞系 | 第25页 |
·质粒载体 | 第25-26页 |
·引物 | 第26-27页 |
·酶类与试剂盒 | 第27页 |
·常用溶液的配制 | 第27-28页 |
·方法 | 第28-37页 |
·PCR扩增 | 第28-29页 |
·PCR产物回收(DNA产物纯化试剂盒) | 第29页 |
·限制性内切酶酶切反应 | 第29页 |
·DNA片段回收(DNA片段凝胶回收试剂盒) | 第29-30页 |
·酶切DNA片段与酶切载体的连接 | 第30页 |
·感受态细胞的制备(RbCl法) | 第30页 |
·感受态细胞的转化 | 第30-31页 |
·质粒快速抽提(质粒纯化试剂盒) | 第31页 |
·细胞培养 | 第31-32页 |
·细胞复苏 | 第31-32页 |
·细胞传代 | 第32页 |
·细胞冻存 | 第32页 |
·细胞转染 | 第32-33页 |
·western blot | 第33页 |
·蛋白纯化 | 第33-34页 |
·病毒包装及细胞感染 | 第34-35页 |
·Real Time PCR实验 | 第35-36页 |
·FACS | 第36页 |
·APP对肿瘤细胞生长影响 | 第36-37页 |
3 结果 | 第37-48页 |
·重组质粒的构建 | 第37-40页 |
·PCR扩增APP、DR6基因和shRNA DR6 | 第37-38页 |
·质粒载体的构建 | 第38-40页 |
·APP和DR6蛋白的纯化 | 第40-41页 |
·pTT3-APP和pTT3-DR6在293T细胞中表达的检测 | 第40-41页 |
·DR6在肿瘤组织和肿瘤细胞系中表达 | 第41-43页 |
·过表达DR6促进肿瘤细胞的凋亡 | 第43-44页 |
·shRNA敲低DR6的表达抑制细胞生长 | 第44-47页 |
·DR6 knockdown | 第44-46页 |
·DR6 knockdown细胞生长速度变慢 | 第46-47页 |
·DR6通过APP促进肿瘤细胞的生长 | 第47-48页 |
·APP能够促进细胞生长 | 第47页 |
·DR6能够阻断APP对细胞生长的促进作用 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
附录 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
硕士期间发表文章 | 第57页 |