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死亡受体6在肿瘤细胞系生长中的作用

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 引言第9-25页
   ·肿瘤坏死因子及其受体超家族第10-11页
   ·死亡受体第11-18页
     ·死亡受体的结构特征第12-13页
       ·死亡受体胞外区的特征第12页
       ·死亡受体胞内区的特征第12-13页
     ·死亡受体的信号转导途径第13-18页
       ·死亡结构域信号转导相关蛋白的主要结构第13-15页
         ·TNF受体相关的死亡结构域蛋白TRADD第13-14页
         ·Fas相关死亡结构域蛋白FADD第14-15页
         ·受体相互作用蛋白RIP第15页
       ·死亡结构域信号相关蛋白在死亡受体信号转导中的作用第15-16页
       ·死亡受体介导的几种信号转导途径第16-18页
         ·TNFR Ⅰ的信号传导途径第16页
         ·CD95的信号转导途径第16页
         ·TRAIL信号通路第16-18页
       ·死亡受体死亡结构域的结构与功能的关系第18页
   ·死亡受体6第18-25页
     ·死亡受体6的序列、结构和表达第19-20页
     ·死亡受体6的信号通路第20-24页
     ·死亡受体6的生物学功能第24-25页
       ·死亡受体6调节CD4~+T细胞增殖和辅助性T细胞分化第24页
       ·死亡受体6调节B细胞生长、生存和体液应答第24-25页
2 材料与方法第25-37页
   ·材料第25-28页
     ·细胞系第25页
     ·质粒载体第25-26页
     ·引物第26-27页
     ·酶类与试剂盒第27页
     ·常用溶液的配制第27-28页
   ·方法第28-37页
     ·PCR扩增第28-29页
     ·PCR产物回收(DNA产物纯化试剂盒)第29页
     ·限制性内切酶酶切反应第29页
     ·DNA片段回收(DNA片段凝胶回收试剂盒)第29-30页
     ·酶切DNA片段与酶切载体的连接第30页
     ·感受态细胞的制备(RbCl法)第30页
     ·感受态细胞的转化第30-31页
     ·质粒快速抽提(质粒纯化试剂盒)第31页
     ·细胞培养第31-32页
       ·细胞复苏第31-32页
       ·细胞传代第32页
       ·细胞冻存第32页
     ·细胞转染第32-33页
     ·western blot第33页
     ·蛋白纯化第33-34页
     ·病毒包装及细胞感染第34-35页
     ·Real Time PCR实验第35-36页
     ·FACS第36页
     ·APP对肿瘤细胞生长影响第36-37页
3 结果第37-48页
   ·重组质粒的构建第37-40页
     ·PCR扩增APP、DR6基因和shRNA DR6第37-38页
     ·质粒载体的构建第38-40页
   ·APP和DR6蛋白的纯化第40-41页
     ·pTT3-APP和pTT3-DR6在293T细胞中表达的检测第40-41页
   ·DR6在肿瘤组织和肿瘤细胞系中表达第41-43页
   ·过表达DR6促进肿瘤细胞的凋亡第43-44页
   ·shRNA敲低DR6的表达抑制细胞生长第44-47页
     ·DR6 knockdown第44-46页
     ·DR6 knockdown细胞生长速度变慢第46-47页
   ·DR6通过APP促进肿瘤细胞的生长第47-48页
     ·APP能够促进细胞生长第47页
     ·DR6能够阻断APP对细胞生长的促进作用第47-48页
4 讨论第48-51页
参考文献第51-55页
附录第55-56页
致谢第56-57页
硕士期间发表文章第57页

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