| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-20页 |
| ·多年生黑麦草概述 | 第8页 |
| ·多年生黑麦草的转基因研究现状 | 第8-11页 |
| ·黑麦草遗传转化的受体系统 | 第9-11页 |
| ·愈伤组织的培养 | 第10页 |
| ·悬浮细胞培养 | 第10页 |
| ·花药培养 | 第10-11页 |
| ·茎尖分生组织培养 | 第11页 |
| ·原生质体培养 | 第11页 |
| ·遗传转化方法 | 第11-16页 |
| ·原生质体DNA吸入法 | 第12-13页 |
| ·基因枪法 | 第13页 |
| ·花粉管通道法 | 第13-14页 |
| ·碳化硅纤维介导转化法 | 第14页 |
| ·农杆菌介导转化法 | 第14-16页 |
| ·Ti质粒转化机理 | 第14-15页 |
| ·农杆菌介导转化法的优点 | 第15页 |
| ·影响农杆菌介导的单子叶植物转化的因素及解决措施 | 第15页 |
| ·农杆菌介导的植物遗传转化存在的问题 | 第15-16页 |
| ·霸王ZxNHX和ZxVP基因双元载体与植物抗逆性研究 | 第16-18页 |
| ·霸王ZxNHX和ZxVP1基因二元载体概述 | 第16-17页 |
| ·液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白与植物抗旱及耐盐性 | 第17-18页 |
| ·Na~+/H~+逆向转运蛋白的活性 | 第17页 |
| ·Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的超表达 | 第17-18页 |
| ·液泡膜H~+-PPase与植物抗旱及耐盐性 | 第18页 |
| ·盐胁迫下的植物液泡膜H~+-PPase活性 | 第18页 |
| ·H~+-PPase在抵御干旱及盐胁迫中的作用 | 第18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 第二章 多年生黑麦草高频再生体系的建立及优化 | 第20-33页 |
| ·材料与方法 | 第20-23页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-23页 |
| ·材料消毒处理 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·外植体的选择 | 第21-22页 |
| ·愈伤组织和丛生芽块的诱导培养 | 第22页 |
| ·愈伤组织分化和丛生芽增殖培养 | 第22页 |
| ·生根及移栽 | 第22-23页 |
| ·数据处理 | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-30页 |
| ·不同激素组合对多年生黑麦草愈伤组织和丛生芽诱导的影响 | 第23-25页 |
| ·不同的6-BA浓度对多年生黑麦草愈伤组织分化和丛生芽增殖的影响 | 第25-27页 |
| ·多年生黑麦草愈伤组织增殖、分化能力以及丛生芽的增殖能力 | 第27-28页 |
| ·多年生黑麦草的品种间比较 | 第28-30页 |
| ·讨论与总结 | 第30-33页 |
| ·植物激素的种类和浓度对愈伤组织和丛生芽诱导的影响 | 第30页 |
| ·6-BA浓度对愈伤组织分化和丛生芽增殖的影响 | 第30-31页 |
| ·多年生黑麦草愈伤组织增殖、分化能力和丛生芽的增殖能力 | 第31-32页 |
| ·多年生黑麦草的品种间比较 | 第32-33页 |
| 第三章 霸王ZxNHX和ZxVP1基因双元载体转化多年生黑麦草及转基因植株的鉴定 | 第33-50页 |
| ·试验材料 | 第33-35页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·农杆菌菌株与质粒 | 第33-34页 |
| ·主要化学试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·培养基和缓冲液的配置 | 第34-35页 |
| ·试验方法 | 第35-41页 |
| ·农杆菌的保存和活化 | 第35-36页 |
| ·表达载体的鉴定 | 第36-37页 |
| ·质粒DNA提取试剂配制 | 第36页 |
| ·质粒的提取 | 第36页 |
| ·表达载体的PCR鉴定 | 第36-37页 |
| ·转基因程序 | 第37-38页 |
| ·转化体系的建立 | 第38-39页 |
| ·筛选压的确定 | 第38页 |
| ·抑菌素的选择 | 第38页 |
| ·侵染液浓度的确定 | 第38页 |
| ·浸染时间的确定 | 第38-39页 |
| ·共培养时间对转化效率的影响 | 第39页 |
| ·AS对转化率的影响 | 第39页 |
| ·不同多年生黑麦草品种对转化率的影响 | 第39页 |
| ·转基因植株的分子生物学检测 | 第39-41页 |
| ·转化植株的DNA的提取-CTAB法 | 第39-40页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-48页 |
| ·表达载体的鉴定 | 第41-42页 |
| ·筛选压的确定 | 第42-43页 |
| ·抑菌素的选择 | 第43页 |
| ·侵染液浓度的确定 | 第43-44页 |
| ·浸染时间的确定 | 第44-45页 |
| ·共培养时间对转化效率的影响 | 第45页 |
| ·AS对转化率的影响 | 第45-46页 |
| ·不同多年生黑麦草品种对转化率的影响 | 第46-47页 |
| ·转化植株PCR鉴定 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| ·筛选剂在多年生黑麦草转化中的作用 | 第48页 |
| ·抗生素在在农杆菌转化中的作用 | 第48页 |
| ·菌液浓度、侵染时间、共培养时间对多年生黑麦草转化的影响 | 第48-49页 |
| ·乙酰丁香酮对多年生黑麦草转化的影响 | 第49页 |
| ·转基因植株PCR鉴定 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附图1 愈伤组织的诱导、继代、分化和生根 | 第56-57页 |
| 附图2 丛生芽块的诱导、增殖、分化和生根 | 第57-58页 |
| 附图3 筛选抗性植株 | 第58-60页 |
| 附表1 缩写或简称 | 第60-61页 |
| 附表2 MS母液配比表 | 第61-62页 |
| 作者简历 | 第62页 |
