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肝细胞分泌高迁移率族蛋白HMGB1的过程观察及其提纯方法初步探讨

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-12页
目录第12-14页
英汉缩略语名词对照表第14-16页
前言第16-22页
第一章 脂多糖诱导人肝细胞释放HMGB1的过程研究第22-64页
   ·材料与方法第22-34页
     ·细胞株第22页
     ·试剂和材料第22-24页
     ·主要仪器第24-25页
     ·分组与干预第25页
     ·细胞存活率测定第25-26页
     ·细胞培养上清液LDH含量测定第26页
     ·HE染色观察各组细胞形态第26-27页
     ·DAPI染核观察各组细胞核形态第27页
     ·荧光TUNEL检测细胞凋亡第27-28页
     ·流式细胞技术检测细胞凋亡第28页
     ·RT-PCR检测细胞HMGB1mRNA表达水平第28-31页
     ·Western blot分析上清HMGB1蛋白含量第31-33页
     ·细胞免疫荧光观察HMGB1蛋白移位第33页
     ·统计学方法第33-34页
   ·实验结果第34-57页
     ·LPS刺激浓度的确定第34-35页
     ·LPS作用不同时间点HepG2,L02及U937细胞存活率第35-36页
     ·LPS作用不同时间点HepG2,L02及U937细胞上清LDH含量第36-38页
     ·LPS刺激对HepG2,L02及U937细胞形态的影响第38-42页
     ·LPS刺激对HepG2,L02及U937细胞凋亡的影响第42-46页
     ·LPS作用对HepG2,L02及U937细胞HMGB1移位的影响第46-53页
     ·LPS刺激对HepG2,L02及U937细胞分泌HMGB1蛋白的影响第53-55页
     ·LPS刺激对HepG2,L02及U937细胞HMGB1mRNA表达水平的影响第55-57页
   ·讨论第57-63页
   ·结论第63-64页
第二章 天然分泌型HMGB1蛋白的初步纯化第64-81页
   ·材料与方法第64-72页
     ·试剂和材料第64-65页
     ·主要仪器第65-66页
     ·液体配制第66-68页
     ·蛋白沉淀第68页
     ·考马斯亮蓝法测定蛋白浓度第68页
     ·二维凝胶电泳第68-69页
     ·层析第69-71页
     ·超滤浓缩第71-72页
     ·银染第72页
     ·Western blot验证各组分中的HMGB1蛋白第72页
   ·结果第72-79页
     ·二维凝胶电泳第72-73页
     ·蛋白沉淀法所得蛋白初步层析图第73页
     ·分子筛Sephadex G50/G75/G100层析峰第73-74页
     ·离子交换层析图第74-75页
     ·超滤浓缩的分离效果第75-76页
     ·Western blot检测层析各组分HMGB1蛋白第76-77页
     ·初步序贯分离结果第77-79页
   ·讨论第79-80页
   ·结论第80-81页
总结论第81-82页
参考文献第82-90页
综述第90-110页
 参考文献第102-110页
致谢第110-111页
攻读学位期间参与的项目及发表的文章第111-112页

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