| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 缩略语表(续表) | 第14-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-29页 |
| ·引言 | 第15页 |
| ·猪分子育种研究现状 | 第15-19页 |
| ·分子遗传标记 | 第16-17页 |
| ·MAS和MAI的应用 | 第17-18页 |
| ·转基因育种 | 第18-19页 |
| ·高通量筛选差异基因技术的应用 | 第19-21页 |
| ·比较基因组学—基因芯片技术 | 第19-20页 |
| ·比较蛋白质组学—双向电泳技术 | 第20-21页 |
| ·PGM1及其家族基因研究进展 | 第21-25页 |
| ·PGM的发现与分类 | 第21页 |
| ·PGM的生化特性 | 第21-22页 |
| ·PGM的序列与组织表达差异 | 第22-23页 |
| ·PGM的多态性及其应用 | 第23-25页 |
| ·PGM在物质代谢中的作用 | 第25-26页 |
| ·PGM的调控 | 第26-29页 |
| ·酶含量的调节 | 第26-27页 |
| ·酶活性的调节 | 第27-29页 |
| 2 研究的目的和意义 | 第29-30页 |
| 3 材料与方法 | 第30-52页 |
| ·试验材料 | 第30-35页 |
| ·试验动物 | 第30页 |
| ·试验样品 | 第30-31页 |
| ·DNA样品 | 第30页 |
| ·组织样品 | 第30-31页 |
| ·菌种、表达载体及细胞系 | 第31页 |
| ·主要仪器、设备及耗材 | 第31-32页 |
| ·主要药品、试剂及溶液配置 | 第32-35页 |
| ·主要药品及试剂 | 第32-33页 |
| ·缓冲液和常用试剂的配置 | 第33-35页 |
| ·试验方法 | 第35-52页 |
| ·猪基因组DNA的提取及质量检测 | 第35-36页 |
| ·血液分离白细胞 | 第35-36页 |
| ·白细胞分离基因组DNA | 第36页 |
| ·DNA浓度的测定和质量检测 | 第36页 |
| ·组织RNA的提取和及反转录 | 第36-38页 |
| ·猪总RNA的提取—TRIZOL一步法 | 第36-37页 |
| ·总RNA浓度的测定和质量检测 | 第37-38页 |
| ·cDNA第一链的合成(反转录) | 第38页 |
| ·目的基因的分离与鉴定 | 第38-42页 |
| ·引物设计 | 第38页 |
| ·PCR反应 | 第38-40页 |
| ·扩增产物的回收和纯化 | 第40页 |
| ·载体连接 | 第40-41页 |
| ·感受态细胞DH5α的制备 | 第41页 |
| ·连接产物的转化 | 第41页 |
| ·阳性克隆的鉴定和测序 | 第41-42页 |
| ·SNP检测与基因分型 | 第42-44页 |
| ·PCR-RFLP | 第42页 |
| ·PCR-SSCP | 第42-44页 |
| ·组织表达谱-半定量PCR | 第44-45页 |
| ·半定量PCR的原理 | 第44页 |
| ·半定量PCR体系 | 第44页 |
| ·半定量PCR的分析方法 | 第44-45页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第45-47页 |
| ·实时荧光定量PCR的原理 | 第45页 |
| ·实时荧光定量PCR体系 | 第45-46页 |
| ·实时荧光定量PCR分析方法 | 第46-47页 |
| ·遗传学效应分析 | 第47-48页 |
| ·群体遗传学 | 第47-48页 |
| ·性状相关性分析 | 第48页 |
| ·生物信息学分析 | 第48-49页 |
| ·基因定位 | 第48页 |
| ·cDNA序列的获取 | 第48-49页 |
| ·CpG岛预测 | 第49页 |
| ·多序列比对 | 第49页 |
| ·寻找酶切位点 | 第49页 |
| ·系统进化树分析 | 第49页 |
| ·蛋白质与miRNA预测 | 第49页 |
| ·载体构建与真核表达 | 第49-52页 |
| ·巢式引物设计 | 第49-50页 |
| ·猪PGM1基因3'-UTR的扩增 | 第50页 |
| ·PCR产物及pEGFP-C1载体的双酶切 | 第50页 |
| ·连接反应 | 第50页 |
| ·重组真核表达载体的鉴定 | 第50-51页 |
| ·重组质粒的表达 | 第51-52页 |
| 4 结果与分析 | 第52-63页 |
| ·总RNA的提取与检测 | 第52页 |
| ·猪PGM1基因序列分析 | 第52-54页 |
| ·猪PGM1(exon1A)基因cDNA序列 | 第52页 |
| ·猪PGM1(exon1B)基因的预测 | 第52-53页 |
| ·猪PGM1基因的5’端与3’端 | 第53-54页 |
| ·猪PGM1基因表达谱 | 第54-56页 |
| ·半定量 | 第54页 |
| ·实时荧光定量 | 第54-56页 |
| ·猪PGM1基因遗传效应学分析 | 第56-59页 |
| ·猪PGM1基因cDNA序列酶切位点分析结果 | 第56页 |
| ·猪PGM1基因分子标记检测 | 第56-57页 |
| ·猪PGM1基因的SNP在不同品种间的分布 | 第57-58页 |
| ·猪PGM1基因的SNP与经济性状的相关性分析 | 第58-59页 |
| ·生物信息学分析 | 第59-61页 |
| ·猪PGM家族基因的定位 | 第59-60页 |
| ·猪PGM1基因系统进化树 | 第60-61页 |
| ·PGM1基因3'-UTR的miRNA的推测 | 第61页 |
| ·PGM1蛋白在线预测 | 第61页 |
| ·插入猪PGM1基因3'-UTR的载体构建及表达 | 第61-63页 |
| 5 讨论 | 第63-71页 |
| ·关于猪PGM1基因的序列分析 | 第63-66页 |
| ·猪PGM1基因的核苷酸序列 | 第63-64页 |
| ·猪PGM1(exon1A)基因的氨基酸序列 | 第64-66页 |
| ·关于猪PGM1基因的表达谱分析 | 第66-67页 |
| ·关于猪PGM1基因的遗传学效应分析 | 第67-68页 |
| ·关于猪PGM1基因的3'-UTR | 第68-69页 |
| ·猪PGM1基因3'-UTR的载体构建 | 第68页 |
| ·猪PGM1基因转录后调控的探讨 | 第68-69页 |
| ·下一步工作 | 第69-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 附录 | 第76-82页 |
| 附录1 猪PGM1基因cDNA及氨基酸序列 | 第76-77页 |
| 附录2 猪PGM1基因Exon1A和Exon1B序列 | 第77-78页 |
| 附录3 猪PGM组织表达谱扩增序列 | 第78页 |
| 附录4 SAS V 8.0-glm过程和reg过程输入程式 | 第78-79页 |
| 附录5 统计学计算 | 第79-80页 |
| 附录6 非配对试验设计两小样本均数差异显著性检验—t检验 | 第80-81页 |
| 附录7 卡方(χ~2)独立性检验在群体遗产学上的应用 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
