摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 引言 | 第11-19页 |
1.1 骨骼肌 | 第11-12页 |
1.1.1 骨骼肌的结构特点 | 第11页 |
1.1.2 骨骼肌的发育特点 | 第11-12页 |
1.1.3 肌肉生成调节因子 | 第12页 |
1.2 肌肉卫星细胞 | 第12-15页 |
1.2.1 肌肉卫星细胞的特点 | 第12-13页 |
1.2.2 肌肉卫星细胞的肌肉再生 | 第13页 |
1.2.3 肌肉卫星细胞的激活 | 第13-14页 |
1.2.4 肌肉卫星细胞的分化 | 第14-15页 |
1.3 参与骨骼肌发育的信号通路 | 第15-16页 |
1.3.1 MAPK/ERK1/2信号通路 | 第15页 |
1.3.2 PI3K/AKT信号通路 | 第15-16页 |
1.4 核质运输的基本机制 | 第16-17页 |
1.4.1 核孔复合体:细胞核和细胞质之间的门 | 第16页 |
1.4.2 Importinβ家族:核质运输载体 | 第16页 |
1.4.3 RanGTPase循环 | 第16-17页 |
1.5 核质运输与细胞分化的联系 | 第17页 |
1.6 研究目的与意义 | 第17-19页 |
2 材料与方法 | 第19-28页 |
2.1 实验材料 | 第19-21页 |
2.1.1 实验动物 | 第19页 |
2.1.2 实验试剂 | 第19-20页 |
2.1.3 实验仪器 | 第20页 |
2.1.4 相关试剂的配制 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-27页 |
2.2.1 牛MDSCs的分离与培养 | 第21-22页 |
2.2.2 牛MDSCs成肌诱导分化及鉴定 | 第22-23页 |
2.2.3 WesternBlot检测牛MDSCs分化不同时期RanGAP1的表达 | 第23-24页 |
2.2.4 免疫荧光染色检测RanGAP1在牛MDSCs分化不同时期的表达 | 第24页 |
2.2.5 CRISPR-dCas9技术RanGAP1干扰载体的构建 | 第24-26页 |
2.2.6 细胞转染及载体筛选 | 第26-27页 |
2.2.7 干扰RanGAP1表达后对牛MDSCs分化的影响 | 第27页 |
2.2.8 PI3K/Akt或MAPK/ERK1/2通路对RanGAP1的影响 | 第27页 |
2.3 统计分析 | 第27-28页 |
3 结果与分析 | 第28-42页 |
3.1 牛MDSCs免疫荧光鉴定结果 | 第28页 |
3.2 RanGAP1在牛MDSCs分化不同时期中的表达 | 第28-30页 |
3.2.1 RanGAP1蛋白表达 | 第28-29页 |
3.2.2 免疫荧光染色检测分化不同时期RanGAP1表达 | 第29-30页 |
3.3 RanGAP1对牛MDSCs分化的影响 | 第30-38页 |
3.3.1 RanGAP1过表达 | 第30-34页 |
3.3.2 抑制RanGAP1表达 | 第34-38页 |
3.4 研究PI3K/Akt和MAPK/ERK1/2通路对RanGAP1的影响 | 第38-42页 |
3.4.1 RanGAP1与PI3K/Akt通路 | 第38-40页 |
3.4.2 RanGAP1与MAPK/ERK1/2通路 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-46页 |
4.1 RanGAP1促进牛MDSCs的分化 | 第42-43页 |
4.2 PI3K/Akt通路对RanGAP1的影响 | 第43-44页 |
4.3 MAPK/ERK1/2通路对RanGAP1的影响 | 第44-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-60页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第60页 |