| 中文摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 引言 | 第12-22页 |
| 1. 聚合物纳米粒 | 第12-15页 |
| 2. 肿瘤的化疗-热疗联合疗法 | 第15-17页 |
| 3. 肿瘤的免疫治疗 | 第17-20页 |
| 4. 课题的提出 | 第20-22页 |
| 第二章 叶酸靶向还原敏感双重载药聚合物胶束的构建及其抗肿瘤研究 | 第22-41页 |
| 1. 实验材料与设备 | 第22-23页 |
| 1.1 实验材料 | 第22页 |
| 1.2 实验设备 | 第22-23页 |
| 2. 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.1 叶酸靶向还原敏感双重载药聚合物胶束的制备 | 第23-24页 |
| 2.2 叶酸靶向还原敏感双重载药聚合物胶束的表征 | 第24-26页 |
| 2.2.1 形貌的表征(TEM) | 第24页 |
| 2.2.2 粒径、多分散指数(PDI)及表面Zeta电位的测定 | 第24页 |
| 2.2.3 阿霉素或吲哚菁绿载药量和包封率的测定 | 第24-25页 |
| 2.2.4 聚合物胶束的粒径稳定性研究 | 第25页 |
| 2.2.5 聚合物胶束的还原响应性测定 | 第25页 |
| 2.2.6 聚合物胶束在不同条件下的药物释放 | 第25-26页 |
| 2.2.7 近红外激光诱导聚合物胶束的体外升温 | 第26页 |
| 2.3 叶酸靶向还原敏感双重载药聚合物胶束的体外细胞评价 | 第26-28页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第26页 |
| 2.3.2 叶酸靶向还原敏感双重载药聚合物胶束的细胞摄取研究 | 第26-27页 |
| 2.3.3 叶酸靶向还原敏感双重载药聚合物胶束的细胞毒性研究 | 第27-28页 |
| 2.4 叶酸靶向还原敏感双重载药聚合物胶束的动物体内研究 | 第28-29页 |
| 2.4.1 实验动物 | 第28页 |
| 2.4.2 皮下移植瘤模型建立 | 第28页 |
| 2.4.3 活体成像和生物分布分析 | 第28-29页 |
| 2.5 统计学处理 | 第29页 |
| 3. 实验结果与讨论 | 第29-40页 |
| 3.1 聚合物胶束的制备与表征 | 第29-30页 |
| 3.2 聚合物胶束的粒径稳定性 | 第30页 |
| 3.3 聚合物胶束的还原响应性能测试 | 第30-31页 |
| 3.4 激光诱导的体外升温 | 第31-32页 |
| 3.5 聚合物胶束的体外药物释放特性 | 第32-33页 |
| 3.6 叶酸靶向还原敏感双重载药聚合物胶束体外细胞摄取 | 第33-37页 |
| 3.7 叶酸靶向还原敏感双重载药聚合物胶束的细胞毒性研究 | 第37-38页 |
| 3.8 叶酸靶向还原敏感双重载药聚合物胶束的动物体内分布研究 | 第38-40页 |
| 4. 本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 负载模式抗原和双免疫激动剂的甘露糖修饰的磷脂杂化聚合物囊泡免疫效应的研究 | 第41-73页 |
| 1. 实验材料与设备 | 第41-43页 |
| 1.1 细胞系及培养条件 | 第41页 |
| 1.2 实验动物 | 第41页 |
| 1.3 化学试剂 | 第41-42页 |
| 1.4 抗体与佐剂 | 第42页 |
| 1.5 实验设备和仪器 | 第42-43页 |
| 2. 实验方法 | 第43-54页 |
| 2.1 聚合物囊泡的制备 | 第43-44页 |
| 2.2 聚合物囊泡的表征 | 第44-45页 |
| 2.2.1 聚合物囊泡的形貌结构观察 | 第44页 |
| 2.2.2 聚合物囊泡的粒径和电位检测 | 第44页 |
| 2.2.3 聚合物囊泡中OVA载药量的检测 | 第44-45页 |
| 2.2.4 聚合物囊泡包埋抗原的二级结构和三级结构的测定 | 第45页 |
| 2.2.5 聚合物囊泡体外释放抗原的表征 | 第45页 |
| 2.3 小鼠骨髓树突状细胞(BMDCs)的分离和培养 | 第45-46页 |
| 2.4 聚合物囊泡对BMDCs的细胞毒性检测 | 第46页 |
| 2.5 流式细胞仪定量检测BMDCs对抗原的摄取 | 第46-47页 |
| 2.6 激光共聚焦检测抗原在BMDCs内的定位 | 第47页 |
| 2.7 抗原的胞内交叉提呈 | 第47-48页 |
| 2.8 BMDCs的活化和成熟 | 第48页 |
| 2.9 抗原在注射部位的停留及向淋巴结的迁移 | 第48-49页 |
| 2.10 聚合物囊泡对小鼠免疫效果的检测 | 第49-54页 |
| 2.10.1 免疫方案 | 第49页 |
| 2.10.2 免疫后小鼠脾脏淋巴细胞悬液的制备 | 第49-50页 |
| 2.10.3 FACS检测淋巴细胞的激活和T细胞反应 | 第50页 |
| 2.10.4 脾细胞的体外增殖 | 第50页 |
| 2.10.5 脾细胞上清液中细胞因子水平检测 | 第50-52页 |
| 2.10.6 FACS检测免疫小鼠脾脏中CD3~+CD8~+IFN-γ~+和CD3~+CD4~+IFN-γ~+T细胞比例 | 第52页 |
| 2.10.7 ELISA法检测免疫小鼠血清免疫球蛋白的含量 | 第52-53页 |
| 2.10.8 预防性肿瘤模型免疫效果的评价 | 第53页 |
| 2.10.9 统计分析 | 第53-54页 |
| 3. 结果与讨论 | 第54-71页 |
| 3.1 囊泡的制备与表征 | 第54-56页 |
| 3.1.1 聚合物囊泡的形貌结构与粒度分析结果 | 第54-55页 |
| 3.1.2 囊泡包埋抗原结构稳定性的检测 | 第55-56页 |
| 3.1.3 抗原的释放 | 第56页 |
| 3.2 聚合物囊泡对DCs的细胞毒性评价 | 第56页 |
| 3.3 DCs对抗原的摄取 | 第56-57页 |
| 3.4 抗原OVA在DCs胞内的定位 | 第57-58页 |
| 3.5 抗原的体外交叉提呈水平 | 第58-59页 |
| 3.6 DCs活化和成熟的诱导 | 第59-60页 |
| 3.7 活体成像观察注射部位的抗原停留 | 第60-61页 |
| 3.8 淋巴细胞的激活 | 第61-62页 |
| 3.9 脾细胞的增殖水平 | 第62-63页 |
| 3.10 T细胞介导的细胞免疫 | 第63-64页 |
| 3.11 激活抗原特异性CD8~+T和CD4~+T淋巴细胞 | 第64-65页 |
| 3.12 MAN-IMO-PS在免疫小鼠中有效诱导CD4~+Th1,CD8~+T细胞应答 | 第65-66页 |
| 3.13 抗原特异性抗体IgG的分泌及IgG亚型的分析 | 第66-67页 |
| 3.14 T细胞相关的免疫应答 | 第67-69页 |
| 3.14.1 MAN-IMO-PS在免疫小鼠中有效诱导记忆性T细胞应答 | 第68-69页 |
| 3.15 MAN-IMO-PS对肿瘤发生的预防作用 | 第69-71页 |
| 4. 本章小结 | 第71-73页 |
| 第四章 全文总结 | 第73-74页 |
| 附录 主要符号表 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-87页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
