缩略语表 | 第6-9页 |
中文摘要 | 第9-14页 |
ABSTRACT | 第14-19页 |
前言 | 第20-22页 |
文献回顾 | 第22-36页 |
第一部分 NF1蛋白在不同分级、分期上皮性卵巢癌中的表达及临床意义 | 第36-60页 |
1 材料 | 第36-42页 |
1.1 研究对象 | 第36-38页 |
1.2 主要试剂 | 第38-39页 |
1.3 主要仪器 | 第39-40页 |
1.4 试剂配制 | 第40-42页 |
2 方法 | 第42-48页 |
2.1 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) | 第42-44页 |
2.2 Western blotting分析 | 第44-47页 |
2.3 免疫组织化学 | 第47-48页 |
2.4 统计学分析 | 第48页 |
3 结果 | 第48-56页 |
3.1.RT-PCR检测NF1在不同性质卵巢肿瘤组织中的mRNA表达水平 | 第48页 |
3.2 Western blot检测NF1在不同性质卵巢组织中的蛋白表达水平 | 第48-49页 |
3.3 免疫组化检测NF1的临床意义 | 第49-56页 |
4 讨论 | 第56-60页 |
第二部分NF1对卵巢癌细胞株生物学功能的影响 | 第60-88页 |
1 材料 | 第60-63页 |
1.1 研究对象 | 第60-61页 |
1.2 主要试剂 | 第61-62页 |
1.3 主要仪器 | 第62页 |
1.4 试剂配置 | 第62-63页 |
2 方法 | 第63-70页 |
2.1 细胞培养 | 第63-65页 |
2.2 western blot分析(详见第一部分) | 第65页 |
2.3 构建稳转细胞株 | 第65-66页 |
2.4 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) | 第66-67页 |
2.5 划痕实验 | 第67页 |
2.6 Transwell侵袭实验 | 第67-68页 |
2.7 EdU细胞增殖实验 | 第68-69页 |
2.8 BrdU渗入增殖实验(5-溴2脱氧尿嘧啶核苷,5-bromo2deoxyuridine ): | 第69页 |
2.9 裸鼠皮下移植瘤模型 | 第69-70页 |
2.10 制作石蜡切片,HE染色 | 第70页 |
2.11 统计学分析 | 第70页 |
3 结果 | 第70-85页 |
3.1 卵巢癌细胞株中NF1的表达情况 | 第70-72页 |
3.2 NF1干涉病毒、过表达质粒转染效率的验证 | 第72-76页 |
3.3 干扰NF1对卵巢癌细胞生物行为的影响 | 第76-80页 |
3.4 过表达NF1对卵巢癌细胞生物学行为的影响 | 第80-82页 |
3.5 干涉NF1对卵巢癌细胞株异种移植瘤的影响(体内实验) | 第82-85页 |
4 讨论 | 第85-88页 |
第三部分NF1在卵巢癌细胞中抑癌机制的初步研究 | 第88-99页 |
1 材料 | 第88-89页 |
1.1 细胞株 | 第88页 |
1.2 主要试剂 | 第88页 |
1.3 主要溶液 | 第88页 |
1.4 主要仪器 | 第88-89页 |
2 方法 | 第89-90页 |
2.1 细胞培养及细胞转染 | 第89页 |
2.2 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) | 第89页 |
2.3 芯片标记、检测 | 第89-90页 |
2.4 芯片结果的验证及NF1影响的基因初步探讨 | 第90页 |
2.5 统计分析 | 第90页 |
3 结果 | 第90-95页 |
3.1 提取RNA验证 | 第90页 |
3.2 卵巢癌细胞株中,受NF1影响的基因筛选 | 第90-93页 |
3.3 验证芯片 | 第93-94页 |
3.4 卵巢癌细胞株中,受NF1影响的基因初步验证 | 第94-95页 |
4 讨论 | 第95-99页 |
小结 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-113页 |
附录 | 第113-122页 |
个人简历和研究成果 | 第122-123页 |
致谢 | 第123页 |