| 个人简历 | 第3-8页 |
| 中文摘要 | 第8-11页 |
| 英文摘要 | 第11-15页 |
| 第一部分 人骨肉瘤细胞MG-63侧群的分离及其差异表达基因的筛选和验证 | 第15-56页 |
| 前言 | 第15-18页 |
| 1.实验材料 | 第18-20页 |
| 1.1 细胞株 | 第18页 |
| 1.2 主要试剂 | 第18页 |
| 1.3 主要耗材和设备 | 第18-19页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第19-20页 |
| 2.实验方法 | 第20-31页 |
| 2.1 细胞培养 | 第20-21页 |
| 2.2 SP细胞分选 | 第21页 |
| 2.3 分选细胞镜下观察 | 第21-22页 |
| 2.4 SP细胞干性标志物表达情况检测 | 第22-27页 |
| 2.5 SP和NSP细胞增殖实验 | 第27-28页 |
| 2.6 MTT法检测SP和 NSP细胞对顺铂的敏感性 | 第28页 |
| 2.7 荧光定量PCR检测SP和 NSP细胞耐药基因表达情况检测 | 第28-29页 |
| 2.8 基因芯片检测 | 第29页 |
| 2.9 差异基因分析 | 第29-31页 |
| 2.10 统计学分析 | 第31页 |
| 3.实验结果 | 第31-52页 |
| 3.1 SP细胞分选 | 第31-32页 |
| 3.2 分选的SP和 NSP细胞镜下观察 | 第32-33页 |
| 3.3 SP和 NSP的总RNA的质量检测 | 第33-34页 |
| 3.4 SP和 NSP细胞干性标志物表达情况 | 第34-37页 |
| 3.5 SP和 NSP细胞增殖 | 第37页 |
| 3.6 SP和 NSP细胞对顺铂的敏感性 | 第37-39页 |
| 3.7 基因芯片结果分析 | 第39-44页 |
| 3.8 差异表达基因的生物信息学分析 | 第44-52页 |
| 4.讨论 | 第52-56页 |
| 第二部分 骨肉瘤侧群细胞差异表达基因KLK5、RAPH1和TFPI2 的功能验证 | 第56-87页 |
| 前言 | 第56-58页 |
| 1.实验材料 | 第58-59页 |
| 1.1 细胞株 | 第58页 |
| 1.2 主要试剂 | 第58页 |
| 1.3 主要耗材和设备 | 第58-59页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第59页 |
| 2.实验方法 | 第59-65页 |
| 2.1 细胞培养 | 第59页 |
| 2.2 慢病毒转染 | 第59-62页 |
| 2.3 细胞增殖 | 第62页 |
| 2.4 克隆形成 | 第62-63页 |
| 2.5 TRANSWELL小室 | 第63页 |
| 2.6 细胞划痕 | 第63-64页 |
| 2.7 MTT | 第64页 |
| 2.8 细胞凋亡检测 | 第64-65页 |
| 3.实验结果 | 第65-84页 |
| 3.1 转染率检测 | 第65-69页 |
| 3.2 转染细胞鉴定 | 第69-70页 |
| 3.3 细胞增殖 | 第70页 |
| 3.4 平板克隆形成 | 第70-72页 |
| 3.5 细胞侵袭实验 | 第72-74页 |
| 3.6 细胞迁移 | 第74-76页 |
| 3.7 化疗耐药分析 | 第76-84页 |
| 4.讨论 | 第84-87页 |
| 全文小结 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 附录 | 第94-97页 |
| 综述 | 第97-108页 |
| 参考文献 | 第102-108页 |
| 致谢 | 第108-110页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第110-111页 |
