| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-28页 |
| 1 植物遗传转化研究进展 | 第10-16页 |
| ·植物基因转化的受体系统 | 第10-11页 |
| ·原生质体受体系统 | 第10页 |
| ·愈伤组织受体系统 | 第10-11页 |
| ·种质系统 | 第11页 |
| ·胚状体受体系统 | 第11页 |
| ·直接分化受体系统 | 第11页 |
| ·植物遗传转化的方法 | 第11-15页 |
| ·农杆菌介导的植物基因转化技术 | 第11-12页 |
| ·DNA直接导入的基因转化技术 | 第12-15页 |
| ·全球转基因植物的发展 | 第15-16页 |
| 2 药用植物基因工程进展 | 第16-28页 |
| ·药用植物组织培养研究 | 第17-19页 |
| ·药用植物组织培养 | 第17页 |
| ·药用植物转基因器官的培养 | 第17-18页 |
| ·药用植物模式基因工程 | 第18-19页 |
| ·盾叶薯蓣研究进展 | 第19-24页 |
| ·薯蓣属植物研究概况 | 第19-20页 |
| ·盾叶薯蓣研究进展 | 第20-24页 |
| ·薯蓣皂甙元的研究进展 | 第24-28页 |
| ·薯蓣皂甙和薯蓣皂甙元 | 第24-25页 |
| ·薯蓣皂甙元的分布 | 第25页 |
| ·薯蓣皂甙元的提取 | 第25-26页 |
| ·薯蓣皂甙元含量的测定 | 第26页 |
| ·薯蓣皂甙元的应用 | 第26-28页 |
| 第二章 盾叶薯蓣转化受体的建立 | 第28-37页 |
| 1 盾叶薯蓣转化受体的建立 | 第28-35页 |
| ·实验材料 | 第28-30页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·实验仪器 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-31页 |
| ·培养条件 | 第30页 |
| ·不同激素配比对无菌苗诱导的影响 | 第30页 |
| ·不同激素配比对愈伤组织诱导的影响 | 第30页 |
| ·不同激素配比对愈伤组织分化的影响 | 第30-31页 |
| ·不同激素配比对愈伤组织生根的影响 | 第31页 |
| ·再生苗的移栽 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-35页 |
| ·不同激素配比对无菌苗诱导的影响 | 第31-32页 |
| ·不同激素配比对愈伤组织诱导的影响 | 第32-33页 |
| ·不同激素配比对愈伤组织分化的影响 | 第33-34页 |
| ·不同激素配比对愈伤组织生根的影响 | 第34-35页 |
| ·再生苗的移栽 | 第35页 |
| 2 讨论 | 第35-37页 |
| ·盾叶薯蓣组织培养中的褐化问题 | 第35-36页 |
| ·激素配比对盾叶薯蓣愈伤组织诱导的影响 | 第36-37页 |
| 第三章 盾叶薯蓣农杆菌介导法转化rFCA-RRM1基因片段和基因枪法转化rFCA-RRM2基因片段 | 第37-64页 |
| 1 盾叶薯蓣农杆菌转化体系的建立 | 第38-46页 |
| ·实验材料 | 第38-40页 |
| ·受体材料 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38-39页 |
| ·转化载体 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-43页 |
| ·培养条件 | 第40页 |
| ·抗生素水平的确定 | 第40页 |
| ·筛选压水平的确定 | 第40-41页 |
| ·制备工程菌、培养和活化 | 第41-42页 |
| ·农杆菌侵染 | 第42页 |
| ·共培养时间和筛选方式对转化的影响 | 第42-43页 |
| ·转化植株的分化、生根和移栽 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-46页 |
| ·抗生素水平的确定 | 第43-44页 |
| ·筛选压水平的确定 | 第44-45页 |
| ·农杆菌侵染浓度和侵染时间对转化的影响 | 第45页 |
| ·共培养时间和筛选方式对转化的影响 | 第45-46页 |
| 2 盾叶薯蓣基因枪转化体系的建立 | 第46-51页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·受体材料 | 第46页 |
| ·载体质粒 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46-47页 |
| ·实验仪器 | 第47页 |
| ·实验耗材 | 第47页 |
| ·实验试剂 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-49页 |
| ·培养条件 | 第47-48页 |
| ·准备受体材料 | 第48页 |
| ·DNA微弹的制备 | 第48页 |
| ·受体材料的轰击 | 第48-49页 |
| ·过渡培养与筛选培养及再生成苗 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-51页 |
| ·高渗培养基中甘露醇的浓度对受体的转化影响 | 第49-50页 |
| ·微载体直径对转化效果的影响 | 第50页 |
| ·轰击压力及轰击距离对转化效果的影响 | 第50-51页 |
| 3 遗传转化体的分子检测 | 第51-54页 |
| ·实验方法 | 第51-52页 |
| ·盾叶薯蓣基因组DNA的提取 | 第51-52页 |
| ·PCR扩增反应体系和程序 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-54页 |
| 4 薯蓣皂甙元含量的测定 | 第54-59页 |
| ·实验材料 | 第54页 |
| ·实验材料 | 第54页 |
| ·实验仪器 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-56页 |
| ·准备测定材料 | 第54-55页 |
| ·提取薯蓣皂甙元 | 第55页 |
| ·配置溶液 | 第55页 |
| ·测定薯蓣皂甙元含量 | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-59页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第56页 |
| ·精密度实验 | 第56-57页 |
| ·测定样品薯蓣皂甙元含量 | 第57-59页 |
| 5 讨论 | 第59-64页 |
| ·农杆菌介导的盾叶薯蓣遗传转化 | 第59-60页 |
| ·植物转化受体的选择 | 第59页 |
| ·农杆菌侵染转化 | 第59-60页 |
| ·过渡培养 | 第60页 |
| ·抗性愈伤组织的分化 | 第60页 |
| ·基因枪法转化效率的影响因素 | 第60-62页 |
| ·转化前后的高渗培养 | 第60-61页 |
| ·微载体的选择 | 第61页 |
| ·轰击参数 | 第61-62页 |
| ·污染的控制 | 第62页 |
| ·转基因再生植株的鉴定 | 第62页 |
| ·HPLC法测定薯蓣皂甙元含量 | 第62-64页 |
| 结论 | 第64-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第78-79页 |