中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-23页 |
1 遗忘研究概述 | 第11-13页 |
1.1 遗忘的定义 | 第11页 |
1.2 衰减理论和干扰理论 | 第11-12页 |
1.3 突触可塑性与遗忘 | 第12-13页 |
2 秀丽隐杆线虫的记忆与遗忘 | 第13-19页 |
2.1 秀丽隐杆线虫是一种研究神经系统与动物行为的良好模型 | 第13-15页 |
2.2 秀丽隐杆线虫遗忘研究模型 | 第15-19页 |
2.2.1 几种常用的线虫遗忘研究模型 | 第15-18页 |
2.2.2 线虫感受二乙酰,丁酮及PA14的神经模式 | 第18-19页 |
3 Rho家族小G蛋白 | 第19-22页 |
3.1 Rho家族小G蛋白作为分子开关 | 第19-20页 |
3.2 Rho家族小G蛋白下游信号通路 | 第20-22页 |
3.3 Rho家族小G蛋白与遗忘 | 第22页 |
4 本文研究的主要内容和主要贡献 | 第22-23页 |
第二章 秀丽隐杆线虫嗅觉遗忘相关基因的筛选 | 第23-34页 |
1 前言 | 第23页 |
2 实验材料与方法 | 第23-28页 |
2.1 实验材料(仪器、试剂、培养基等) | 第23-25页 |
2.1.1 主要仪器 | 第23-24页 |
2.1.2 主要试剂 | 第24页 |
2.1.3 主要培养基及溶液配制方法 | 第24-25页 |
2.1.4 实验所用到的线虫 | 第25页 |
2.1.5 实验菌株 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-28页 |
2.2.1 固体培养基培养线虫 | 第25-26页 |
2.2.2 线虫同步化 | 第26页 |
2.2.3 线虫的冻存 | 第26页 |
2.2.4 线虫RNA干扰方法 | 第26-27页 |
2.2.5 趋化板的制备 | 第27页 |
2.2.6 线虫的嗅觉遗忘实验 | 第27-28页 |
2.2.7 秀丽隐杆线虫运动能力检测 | 第28页 |
3 实验结果与讨论 | 第28-34页 |
3.1 不同突触可塑性基因缺陷突变株记忆与遗忘突变体筛选 | 第28-29页 |
3.2 rac-2参与调控线虫对二乙酰的嗅觉遗忘过程 | 第29-30页 |
3.3 ced-10参与调控线虫二乙酰的嗅觉遗忘过程 | 第30-31页 |
3.4 ced-10 (tm597)突变体运动能力下降 | 第31-32页 |
3.5 ced-10参与调控线虫丁酮嗅觉遗忘过程 | 第32-34页 |
第三章 Rac/PAK/Cofilin信号通路与线虫嗅觉遗忘 | 第34-49页 |
1 前言 | 第34页 |
2 材料和方法 | 第34-43页 |
2.1 实验材料(仪器、试剂、培养基) | 第34-36页 |
2.1.1 主要仪器设备 | 第34-35页 |
2.1.2 主要试剂 | 第35页 |
2.1.3 主要试剂盒 | 第35页 |
2.1.4 主要培养基及溶液配制方法 | 第35-36页 |
2.1.5 实验中用到的线虫 | 第36页 |
2.1.6 实验菌株及载体 | 第36页 |
2.2 实验方法 | 第36-43页 |
2.2.1 固体培养基培养线虫 | 第36页 |
2.2.2 线虫同步化 | 第36-37页 |
2.2.3 线虫的冻存 | 第37页 |
2.2.4 趋化板的制备 | 第37页 |
2.2.5 线虫的嗅觉遗忘实验 | 第37页 |
2.2.6 秀丽隐杆线虫运动能力检测 | 第37页 |
2.2.7 秀丽隐杆线虫的RNAi方法 | 第37-38页 |
2.2.8 unc-60 RNAi干扰株构建 | 第38-42页 |
2.2.9 Real-time PCR | 第42-43页 |
3 实验结果与讨论 | 第43-49页 |
3.1 unc-60趋化性及运动性检测 | 第43-45页 |
3.2 unc-60干扰株构建 | 第45-47页 |
3.3 unc-60 Real-time PCR | 第47页 |
3.4 unc-60 RNAi嗅觉遗忘实验 | 第47-48页 |
3.5 pak-1突变体嗅觉遗忘实验 | 第48-49页 |
第四章 RAC通过下调JNK-1表达调控秀丽隐杆线虫遗忘过程 | 第49-67页 |
1 前言 | 第49页 |
2 材料和方法 | 第49-57页 |
2.1 实验材料 | 第49-51页 |
2.1.1 主要的仪器设备 | 第49-50页 |
2.1.2 实验药品与试剂 | 第50页 |
2.1.3 试剂的配制方法 | 第50页 |
2.1.4 主要试剂盒 | 第50-51页 |
2.2 实验方法 | 第51-57页 |
2.2.1 固体培养基培养线虫 | 第51页 |
2.2.2 线虫同步化 | 第51页 |
2.2.3 线虫的冻存 | 第51页 |
2.2.4 趋化板的制备 | 第51页 |
2.2.5 线虫的嗅觉遗忘实验 | 第51页 |
2.2.6 Real-time PCR | 第51页 |
2.2.7 Pjnk-1::GFP载体构建 | 第51-53页 |
2.2.8 显微注射 | 第53-55页 |
2.2.9 线虫总蛋白提取 | 第55页 |
2.2.10 Western blot | 第55-57页 |
3 实验结果与讨论 | 第57-67页 |
3.1 jnk-1突变导致秀丽隐杆线虫嗅觉遗忘变慢 | 第57页 |
3.2 rac-2突变后,jnk-1 mRNA水平下调 | 第57-58页 |
3.3 Pjn-1::GFP载体构建 | 第58-61页 |
3.4 显微注射 | 第61-63页 |
3.4.1 Pjnk-1::GFP表达模式 | 第61-62页 |
3.4.2 rac-2突变后,Pjn-1::GFP荧光亮度降低 | 第62-63页 |
3.5 Western blot | 第63-67页 |
3.5.1 蛋白标准曲线 | 第63-64页 |
3.5.2 JNK-1信号通路参与了秀丽隐杆线虫二乙酰嗅觉遗忘过程 | 第64-65页 |
3.5.3 rac-2突变后,秀丽隐杆线虫JNK-1蛋白量下调 | 第65-67页 |
全文总结与展望 | 第67-69页 |
附录 | 第69-73页 |
1 L4440质粒图谱 | 第69-70页 |
2 表达载体pPD95_79 | 第70-71页 |
3 中英文对照 | 第71-72页 |
4 常用的外文文献资源及生物学资源 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-79页 |
致谢 | 第79页 |