摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
缩略词及英汉对照 | 第8-12页 |
1 前言 | 第12-20页 |
1.1 研究背景 | 第12-14页 |
1.2 国内外相关研究进展 | 第14-20页 |
1.2.1 钙在植物细胞中的分布 | 第14页 |
1.2.2 草酸钙晶体的分布及形态 | 第14-15页 |
1.2.3 植物体草酸钙的作用 | 第15页 |
1.2.4 草酸钙晶体的形成受到一系列复杂的调控 | 第15-17页 |
1.2.5 植物体内草酸的代谢及具有功能的类草酸氧化酶(GLPs)的发现 | 第17-18页 |
1.2.6 草酸钙的代谢 | 第18-19页 |
1.2.7 本论文主要研究内容以及意义 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-29页 |
2.1 供试材料和取样方法 | 第20页 |
2.2 果实不同部位草酸含量测定 | 第20-22页 |
2.3 草酸氧化酶活性的测定 | 第22-23页 |
2.4 不同形式钙含量的测定 | 第23-24页 |
2.5 钙分布电子探针分析 | 第24-25页 |
2.6 草酸钙晶体的组织学分布 | 第25页 |
2.7 GLPs相关基因的克隆 | 第25-28页 |
2.7.1 荔枝、龙眼样品RNA的提取以及质量检测 | 第25页 |
2.7.2 GLPs相关基因的引物设计 | 第25-26页 |
2.7.3 cDNA第一链的合成 | 第26页 |
2.7.4 目的基因的扩增和检测 | 第26页 |
2.7.5 PCR产物加A和目的基因的回收 | 第26-27页 |
2.7.6 载体连接与转化 | 第27页 |
2.7.7 阳性克隆的鉴定与测定 | 第27页 |
2.7.8 目的基因的比对和生物信息学及数据分析 | 第27-28页 |
2.8 基因定量表达分析 | 第28-29页 |
2.8.1 Real-Time PCR引物设计和反应条件 | 第28页 |
2.8.2 Real-Time PCR结果处理与分析 | 第28-29页 |
3 结果与分析 | 第29-57页 |
3.1 品种间果实组织钙含量对草酸钙积累规律的探索 | 第29-33页 |
3.1.1 组织钙含量的分析 | 第29-31页 |
3.1.2 果实和果柄组织中钙的存在形态 | 第31-33页 |
3.2 果柄组织晶体钙分布的观察 | 第33-43页 |
3.2.1 果实发育过程中果柄组织钙的原位分别变化 | 第33-35页 |
3.2.2 果柄组织草酸钙的解剖学观察 | 第35-43页 |
3.3 草酸氧化酶活性与草酸和草酸钙含量动态 | 第43-46页 |
3.3.1 组织草酸含量及草酸氧化酶活性动态 | 第43-45页 |
3.3.2 草酸氧化酶活性与草酸钙积累的动态关系分析 | 第45-46页 |
3.4 类萌发素蛋白(GLPs)相关基因的筛选 | 第46-53页 |
3.4.1 GLPs的筛选和聚类分析 | 第46-48页 |
3.4.2 GLPs的克隆和信号肽分析 | 第48-50页 |
3.4.3 GLPs序列分析及氨基酸序列理化性质的预测 | 第50-51页 |
3.4.4 不同物种GLPs的氨基酸序列的同源性分析 | 第51-53页 |
3.5 GLPs结构域预测 | 第53页 |
3.6 GLPs的表达分析 | 第53-57页 |
3.6.1 龙眼GLPs基因在不果实同组织的表达 | 第53-54页 |
3.6.2 不同荔枝品种果柄LcGLPs的表达 | 第54-57页 |
4 讨论与结论 | 第57-64页 |
4.1 荔枝和龙眼果实钙积累及草酸钙形成规律 | 第57-58页 |
4.2 影响果实组织草酸钙形成的因素 | 第58-59页 |
4.2.1 钙运输途径与草酸钙形成 | 第58-59页 |
4.2.2 草酸及钙与草酸钙形成 | 第59页 |
4.3 草酸氧化酶与草酸和草酸钙形成关系 | 第59-61页 |
4.4 荔枝、龙眼 GLPs 的生物信息学分析、相关克隆和表达及其与草酸氧化酶活性的关系 | 第61-62页 |
4.5 结论 | 第62-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
附录 | 第71-77页 |