摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1 植物多糖免疫调节研究进展 | 第12-15页 |
1.1 植物多糖对免疫器官的影响 | 第12-13页 |
1.2 植物多糖对免疫细胞的影响 | 第13-14页 |
1.2.1 植物多糖对淋巴细胞的影响 | 第13-14页 |
1.2.2 植物对巨噬细胞的影响 | 第14页 |
1.3 植物多糖对细胞因子的影响 | 第14-15页 |
2 金线莲研究进展 | 第15-18页 |
2.1 金线莲化学成分研究 | 第16页 |
2.2 金线莲药理活性研究 | 第16-18页 |
3 本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
第二章 ARP对小鼠脾淋巴细胞体外免疫活性研究 | 第20-43页 |
1 材料与方法 | 第20-25页 |
1.1 材料 | 第20-22页 |
1.1.1 金线莲多糖(ARP) | 第20页 |
1.1.2 试验动物 | 第20-21页 |
1.1.3 主要试剂 | 第21页 |
1.1.4 主要仪器 | 第21页 |
1.1.5 引物设计 | 第21-22页 |
1.2 方法 | 第22-25页 |
1.2.1 小鼠脾淋巴细胞悬液的制备 | 第22页 |
1.2.2 MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖 | 第22-23页 |
1.2.3 流式细胞仪检测小鼠脾淋巴细胞周期 | 第23页 |
1.2.4 Griess法检测小鼠脾淋巴细胞NO产生量 | 第23页 |
1.2.5 细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ含量测定 | 第23-24页 |
1.2.6 细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、TNF-α、T-bet、GATA3 mRNA表达 | 第24页 |
1.2.7 数据处理与统计分析 | 第24-25页 |
2 结果与分析 | 第25-41页 |
2.1 ARP对小鼠脾淋巴细胞安全浓度的筛选 | 第25页 |
2.2 ARP协同ConA对小鼠T淋巴细胞增殖的影响 | 第25-26页 |
2.3 ARP协同LPS对小鼠B淋巴细胞增殖的影响 | 第26-27页 |
2.4 ARP对小鼠脾淋巴细胞周期的影响 | 第27-28页 |
2.5 ARP对小鼠脾淋巴细胞NO产生量的影响 | 第28-29页 |
2.6 ARP对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞分泌细胞因子的影响 | 第29-30页 |
2.6.1 ARP对ConA诱导的小鼠脾淋巴分泌IL-2的影响 | 第29页 |
2.6.2 ARP对ConA诱导的小鼠脾淋巴分泌IL-4的影响 | 第29页 |
2.6.3 ARP对ConA诱导的小鼠脾淋巴分泌IL-6的影响 | 第29页 |
2.6.4 ARP对ConA诱导的小鼠脾淋巴分泌IFN-γ的影响 | 第29-30页 |
2.7 ARP对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞因子mRNA表达的影响 | 第30-41页 |
2.7.1 Real-time PCR扩增效率检测结果 | 第30-36页 |
2.7.2 ARP对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞IL-2 mRNA表达水平的影响 | 第36-37页 |
2.7.3 ARP对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞IL-4 mRNA表达水平的影响 | 第37页 |
2.7.4 ARP对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞IL-6 mRNA表达水平的影响 | 第37-38页 |
2.7.5 ARP对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞IFN-γ mRNA表达水平的影响 | 第38-39页 |
2.7.6 ARP对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞TNF-α mRNA表达水平的影响 | 第39页 |
2.7.7 ARP对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞T-bet mRNA表达水平的影响 | 第39-40页 |
2.7.8 ARP对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞GATA3 mRNA表达水平的影响 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-42页 |
4 结论 | 第42-43页 |
第三章 ARP对巨噬细胞RAW264.7体外免疫活性研究 | 第43-60页 |
1 材料与方法 | 第43-48页 |
1.1 材料 | 第43-45页 |
1.1.1 金线莲多糖(ARP) | 第43页 |
1.1.2 细胞株 | 第43-44页 |
1.1.3 主要试剂 | 第44页 |
1.1.4 主要仪器 | 第44页 |
1.1.5 引物设计 | 第44-45页 |
1.2 方法 | 第45-48页 |
1.2.1 MTT法筛选ARP对巨噬细胞RAW264.7的安全浓度 | 第45页 |
1.2.2 流式细胞仪检测巨噬细胞RAW264.7凋亡 | 第45-46页 |
1.2.3 中性红法检测巨噬细胞RAW264.7吞噬功能 | 第46页 |
1.2.4 Griess法检测巨噬细胞RAW264.7 NO产生量 | 第46页 |
1.2.5 ELISA法检测细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-10含量 | 第46-47页 |
1.2.6 RT-PCR检测细胞因子TNF-α、IL-6、iNOS mRNA表达 | 第47页 |
1.2.7 Western blot法检测巨噬细胞RAW264.7 IκB p65蛋白表达 | 第47-48页 |
1.2.8 数据处理与统计分析 | 第48页 |
2 结果与分析 | 第48-57页 |
2.1 ARP对巨噬细胞RAW264.7安全浓度的筛选 | 第48-49页 |
2.2 ARP对巨噬细胞RAW264.7凋亡的影响 | 第49-51页 |
2.3 ARP对巨噬细胞RAW264.7吞噬功能的影响 | 第51页 |
2.4 ARP对巨噬细胞RAW264.7 NO产生量的影响 | 第51-53页 |
2.5 细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-10分泌量测定 | 第53-54页 |
2.5.1 ARP对巨噬细胞RAW264.7分泌TNF-α的影响 | 第53页 |
2.5.2 ARP对巨噬细胞RAW264.7分泌IL-1β的影响 | 第53页 |
2.5.3 ARP对巨噬细胞RAW264.7分泌IL-10的影响 | 第53-54页 |
2.6 细胞中TNF-α、IL-6和iNOS mRNA表达水平 | 第54-57页 |
2.6.1 Real-time PCR扩增效率检测结果 | 第54-55页 |
2.6.2 ARP对巨噬细胞RAW264.7 TNF-α mRNA表达水平的影响 | 第55页 |
2.6.3 ARP对巨噬细胞RAW264.7 IL-6 mRNA表达水平的影响 | 第55-56页 |
2.6.4 ARP对巨噬细胞RAW264.7 iNOS mRNA表达水平的影响 | 第56-57页 |
2.7 ARP对巨噬细胞RAW264.7IκB p65蛋白表达的影响 | 第57页 |
3 讨论 | 第57-59页 |
4 结论 | 第59-60页 |
全文结论 | 第60-61页 |
本研究创新点 | 第61页 |
尚需进一步深入研究的内容 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-75页 |
附录 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |