| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一章 文献研究 | 第12-20页 |
| 1.1 肝癌的概述 | 第12-13页 |
| 1.2 miRNA的概念及机制 | 第13-14页 |
| 1.2.1 miRNA的定义及来源 | 第13页 |
| 1.2.2 miRNA的生物合成及功能机制 | 第13-14页 |
| 1.3 miRNA与肝癌发生发展的关系 | 第14-15页 |
| 1.4 miRNA与肝癌的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.5 问题与展望 | 第17-20页 |
| 第二章 血清miR-486-5p和miR-122-5p在肝癌诊断中的临床应用 | 第20-29页 |
| 2.1 概述 | 第20页 |
| 2.2 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.2.1 血清标本 | 第20页 |
| 2.2.2 主要试剂及试剂盒 | 第20页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.3.1 血清总RNA的提取 | 第21页 |
| 2.3.2 Nanodrop2000分光光度计检测总RNA的浓度 | 第21-22页 |
| 2.3.3 逆转录反应 | 第22页 |
| 2.3.4 实时荧光定量PCR反应 | 第22-23页 |
| 2.4 统计学分析 | 第23页 |
| 2.5 实验结果 | 第23-27页 |
| 2.5.1 血清miR-486-5p和miR-122-5p的表达 | 第23-25页 |
| 2.5.2 血清miR-486-5p、miR-122-5p和AFP表达水平的相关性分析 | 第25-26页 |
| 2.5.3 血清miR-486-5p和miR-122-5p与AFP联合诊断在肝癌中的诊断价值 | 第26-27页 |
| 2.6 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 miR-486-5p通过靶标CBL抑制肝癌细胞的增殖和迁移 | 第29-48页 |
| 3.1 概述 | 第29页 |
| 3.2 实验材料 | 第29-30页 |
| 3.2.1 细胞系 | 第29页 |
| 3.2.2 主要试剂及试剂盒 | 第29-30页 |
| 3.2.3 主要溶液的配制 | 第30页 |
| 3.2.4 主要仪器 | 第30页 |
| 3.3 实验方法 | 第30-36页 |
| 3.3.1 SMMC7721细胞培养 | 第30-31页 |
| 3.3.2 细胞转染 | 第31页 |
| 3.3.3 细胞增殖实验 | 第31页 |
| 3.3.4 细胞划痕实验 | 第31页 |
| 3.3.5 Transwell实验 | 第31-32页 |
| 3.3.6 稳定细胞株构建 | 第32页 |
| 3.3.7 Trizol法提取细胞总RNA | 第32页 |
| 3.3.8 逆转录反应 | 第32-33页 |
| 3.3.9 实时荧光定量PCR | 第33页 |
| 3.3.10 提取蛋白浓度 | 第33-34页 |
| 3.3.11 BCA法测蛋白浓度 | 第34页 |
| 3.3.12 Westernblot | 第34-35页 |
| 3.3.13 miR-486-5p的生物信息学分析 | 第35页 |
| 3.3.14 miR-486-5p靶标预测 | 第35-36页 |
| 3.3.15 靶基因作GO和KEGG分析 | 第36页 |
| 3.4 统计学分析 | 第36页 |
| 3.5 结果 | 第36-45页 |
| 3.5.1 miR-486-5p在组织中的表达 | 第36-39页 |
| 3.5.2 miR-486-5p在肝癌细胞中的表达 | 第39-41页 |
| 3.5.3 miR-486-5p抑制肝癌细胞的增殖和迁移 | 第41-42页 |
| 3.5.4 CBL可能是miR-486-5p的一个潜在靶标 | 第42-43页 |
| 3.5.5 CBL过表达对肝癌细胞的影响 | 第43-45页 |
| 3.5.6 miR-486-5p和CBL对肝癌预后的预测 | 第45页 |
| 3.6 讨论 | 第45-48页 |
| 结语 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 在校期间发表论文情况 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附件 | 第59页 |
