摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
英文缩略词 | 第15-17页 |
第一章 引言 | 第17-26页 |
1.1 整合素样β1 基因(ITGBL1) | 第17-19页 |
1.2 AML与表观遗传学调控 | 第19-21页 |
1.3 CML与表观遗传学调控 | 第21-22页 |
1.4 MDS与表观遗传学调控 | 第22-23页 |
1.5 DNA甲基化 | 第23-24页 |
1.6 表观遗传学治疗 | 第24-26页 |
第二章 研究的目的、方法、实验方案设计及研究意义 | 第26-30页 |
2.1 研究背景及目的 | 第26页 |
2.2 研究方法 | 第26-27页 |
2.2.1 实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR) | 第26-27页 |
2.2.2 实时定量甲基化特异性PCR(RQ-MSP) | 第27页 |
2.2.3 亚硫酸氢盐测序(BSP) | 第27页 |
2.3 实验方案设计 | 第27-29页 |
2.4 研究意义 | 第29-30页 |
第三章 AML患者中ITGBL1基因的表达和甲基化研究 | 第30-52页 |
3.1 材料 | 第30-31页 |
3.1.1 研究对象 | 第30页 |
3.1.2 主要试剂 | 第30-31页 |
3.1.3 主要仪器 | 第31页 |
3.1.4 引物 | 第31页 |
3.2 实验方法 | 第31-39页 |
3.2.1 骨髓单个核细胞的分离、总RNA和DNA的提取 | 第31-33页 |
3.2.2 逆转录 | 第33页 |
3.2.3 DNA亚硫酸氢盐修饰 | 第33-34页 |
3.2.4 利用RQ-PCR检测标本中ITGBL1基因的表达水平 | 第34页 |
3.2.5 利用RQ-MSP检测标本中ITGBL1基因的甲基化态势 | 第34-35页 |
3.2.6 ITGBL1基因BSP检测 | 第35-36页 |
3.2.7 PCR产物的纯化与回收 | 第36-37页 |
3.2.8 重组载体的构建 | 第37页 |
3.2.9 重组质粒的转化 | 第37-38页 |
3.2.10 重组质粒的提取 | 第38页 |
3.2.11 质粒的测序与鉴定 | 第38页 |
3.2.12 阳性模板的建立 | 第38页 |
3.2.13 细胞遗传学检查 | 第38-39页 |
3.2.14 基因突变检测 | 第39页 |
3.2.15 统计学分析 | 第39页 |
3.3 实验结果 | 第39-50页 |
3.3.1 对照组和AML患者中ITGBL1基因的表达水平 | 第39-40页 |
3.3.2 ITGBL1表达水平与AML患者临床参数的相关性 | 第40-41页 |
3.3.3 ITGBL1基因表达水平与AML患者预后的关系 | 第41-43页 |
3.3.4 对照组和AML患者中ITGBL1基因的甲基化态势 | 第43-44页 |
3.3.5 ITGBL1甲基化态势与AML患者临床参数的相关性 | 第44-46页 |
3.3.6 ITGBL1甲基化水平与AML患者预后的关系 | 第46-48页 |
3.3.7 疾病缓解的AML患者ITGBL1甲基化水平的随访分析 | 第48-49页 |
3.3.8 去甲基化药物 5-aza-DC对ITGBL1表达和甲基化的影响 | 第49-50页 |
3.3.9 ITGBL1表达与甲基化的相关性 | 第50页 |
3.4 讨论 | 第50-52页 |
第四章 CML患者中ITGBL1基因的表达和甲基化研究 | 第52-60页 |
4.1 材料 | 第52页 |
4.1.1 研究对象 | 第52页 |
4.1.2 主要试剂 | 第52页 |
4.1.3 主要仪器 | 第52页 |
4.1.4 引物 | 第52页 |
4.2 实验方法 | 第52-54页 |
4.2.1 骨髓单个核细胞的分离、总RNA和DNA的提取 | 第52页 |
4.2.2 逆转录 | 第52-53页 |
4.2.3 DNA亚硫酸氢盐修饰 | 第53页 |
4.2.4 利用RQ-PCR检测标本中ITGBL1基因的表达水平 | 第53页 |
4.2.5 利用RQ-MSP检测标本中ITGBL1基因的甲基化态势 | 第53页 |
4.2.6 ITGBL1基因BSP检测 | 第53页 |
4.2.7 PCR产物的纯化与回收 | 第53页 |
4.2.8 重组载体的构建 | 第53页 |
4.2.9 重组质粒的转化 | 第53页 |
4.2.10 重组质粒的提取 | 第53页 |
4.2.11 质粒的测序与鉴定 | 第53页 |
4.2.12 阳性模板的建立 | 第53页 |
4.2.13 细胞遗传学检查 | 第53页 |
4.2.14 基因突变检测 | 第53页 |
4.2.15 统计学分析 | 第53-54页 |
4.3 实验结果 | 第54-58页 |
4.3.1 ITGBL1基因在CML患者中的表达水平 | 第54页 |
4.3.2 ITGBL1基因表达水平与CML患者临床系数的相关性 | 第54-55页 |
4.3.3 ITGBL1基因在CML患者中的高甲基化态势 | 第55页 |
4.3.4 ITGBL1基因甲基化水平与CML患者临床系数的相关性 | 第55-57页 |
4.3.5 ITGBL1表达和甲基化在CML患者中的相关性 | 第57-58页 |
4.4 讨论 | 第58-60页 |
第五章 MDS患者中ITGBL1基因的表达和甲基化研究 | 第60-68页 |
5.1 材料 | 第60-61页 |
5.1.1 研究对象 | 第60页 |
5.1.2 主要试剂 | 第60页 |
5.1.3 主要仪器 | 第60页 |
5.1.4 引物 | 第60-61页 |
5.2 实验方法 | 第61-62页 |
5.2.1 骨髓单个核细胞的分离、总RNA和DNA的提取 | 第61页 |
5.2.2 逆转录 | 第61页 |
5.2.3 DNA亚硫酸氢盐修饰 | 第61页 |
5.2.4 利用RQ-PCR检测标本中ITGBL1基因的表达水平 | 第61页 |
5.2.5 利用RQ-MSP检测标本中ITGBL1基因的甲基化态势 | 第61页 |
5.2.6 ITGBL1基因BSP检测 | 第61页 |
5.2.7 PCR产物的纯化与回收 | 第61页 |
5.2.8 重组载体的构建 | 第61页 |
5.2.9 重组质粒的转化 | 第61页 |
5.2.10 重组质粒的提取 | 第61页 |
5.2.11 质粒的测序与鉴定 | 第61页 |
5.2.12 阳性模板的建立 | 第61页 |
5.2.13 细胞遗传学检查 | 第61页 |
5.2.14 基因突变检测 | 第61-62页 |
5.2.15 统计学分析 | 第62页 |
5.3 实验结果 | 第62-66页 |
5.3.1 对照组和MDS患者中ITGBL1基因的表达水平 | 第62页 |
5.3.2 在MDS患者中ITGBL1基因的甲基化态势 | 第62-63页 |
5.3.3 ITGBL1基因甲基化水平与MDS患者临床系数的相关性 | 第63-64页 |
5.3.4 ITGBL1甲基化水平与MDS患者预后的关系 | 第64-66页 |
5.4 讨论 | 第66-68页 |
第六章 结论与前景展望 | 第68-69页 |
6.1 主要结论 | 第68页 |
6.2 前景展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-80页 |
致谢 | 第80-82页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文及其他科研成果 | 第82-83页 |