摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
1 绪论 | 第10-22页 |
1.1 引言 | 第10页 |
1.2 植物抗逆研究状况 | 第10-13页 |
1.2.1 植物逆境的概念 | 第10-11页 |
1.2.2 生物胁迫 | 第11页 |
1.2.3 非生物胁迫 | 第11-12页 |
1.2.4 生物胁迫与非生物胁迫间的联系 | 第12-13页 |
1.3 抗逆相关转录因子的研究状况 | 第13-19页 |
1.3.1 转录因子的结构与抗逆功能研究 | 第13-16页 |
1.3.2 转录因子在非生物胁迫中的调控途径 | 第16-17页 |
1.3.3 转录因子与DNA作的研究方法 | 第17-19页 |
1.4 植物Trihelix转录因子的研究进展 | 第19-21页 |
1.4.1 Trihelix转录因子的结构特征及生物功能 | 第19-20页 |
1.4.2 Trihelix转录因子对逆境胁迫的响应能力 | 第20-21页 |
1.4.3 Trihelix转录因子所识别的顺式作用元件 | 第21页 |
1.5 研究的目的和意义 | 第21-22页 |
2 拟南芥AST1的时空表达模式及亚细胞定位 | 第22-40页 |
2.1 实验材料 | 第22-23页 |
2.1.1 植物材料 | 第22页 |
2.1.2 菌株与载体 | 第22页 |
2.1.3 主要试剂 | 第22页 |
2.1.4 培养基及药品的配置 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-30页 |
2.2.1 GUS染色分析AST1的组织特异性表达 | 第23-28页 |
2.2.2 盐和渗透胁迫下,qRT-PCR分析AST1基因的表达模式 | 第28页 |
2.2.3 盐和渗透胁迫下,GUS染色分析AST1基因的表达 | 第28-29页 |
2.2.4 AST1蛋白的亚细胞定位 | 第29-30页 |
2.3 结果与分析 | 第30-38页 |
2.3.1 AST1的组织特异性表达 | 第30-34页 |
2.3.2 盐和渗透胁迫处理下,AST1基因的表达 | 第34-36页 |
2.3.3 AST1蛋白的亚细胞定位 | 第36-38页 |
2.4 本章小结与讨论 | 第38-40页 |
3 拟南芥AST1基因的抗逆功能研究 | 第40-72页 |
3.1 实验材料 | 第40-41页 |
3.1.1 植物材料 | 第40页 |
3.1.2 菌株与载体 | 第40页 |
3.1.3 主要试剂 | 第40页 |
3.1.4 培养基及药品的配置 | 第40-41页 |
3.2 实验方法 | 第41-48页 |
3.2.1 AST1过表达载体的构建及转基因植株鉴定 | 第41-43页 |
3.2.2 纯合突变体植株的筛选 | 第43页 |
3.2.3 盐和渗透胁迫下,AST1基因抗逆生理分析 | 第43-48页 |
3.3 结果与分析 | 第48-70页 |
3.3.1 AST1过表达株系及纯合突变体的获得 | 第48-52页 |
3.3.2 AST1基因提高了植物的抗逆性 | 第52-55页 |
3.3.3 应对非生物胁迫AST1负向调控气孔的关闭 | 第55-58页 |
3.3.4 应对非生物胁迫AST1对Na~+和K~+平衡的调控分析 | 第58-61页 |
3.3.5 盐和渗透胁迫下细胞膜损伤分析 | 第61-63页 |
3.3.6 应对非生物胁迫AST1提高植物对活性氧的清除能力 | 第63-66页 |
3.3.7 应对非生物胁迫AST1对脯氨酸合成调控分析 | 第66-68页 |
3.3.8 应对非生物胁迫AST1对海藻糖的合成调控分析 | 第68页 |
3.3.9 LEA家族基因在不同株系的表达 | 第68-70页 |
3.4 本章小结和讨论 | 第70-72页 |
4 拟南芥AST1识别的顺式作用元件及对下游基因的表达调控分析 | 第72-104页 |
4.1 实验材料 | 第72-73页 |
4.1.1 植物材料 | 第72页 |
4.1.2 菌株与载体 | 第72页 |
4.1.3 主要试剂 | 第72页 |
4.1.4 培养基及药品的配置 | 第72-73页 |
4.2 实验方法 | 第73-89页 |
4.2.1 转录组分析 | 第73-74页 |
4.2.2 AST1基因作用元件预测 | 第74页 |
4.2.3 酵母单杂交实验验证AST1基因与元件的结合 | 第74-79页 |
4.2.4 GUS酶活验证AST1与元件的互作分析 | 第79-81页 |
4.2.5 EMSA分析AST1对元件的识别 | 第81-85页 |
4.2.6 ChIP分析AST1对元件的识别及对基因的表达调控 | 第85-89页 |
4.3 结果与分析 | 第89-102页 |
4.3.1 AST1过表达与突变体植株的差异表达基因分析 | 第89-92页 |
4.3.2 AGAG-box顺式作用元件的预测及识别验证 | 第92-97页 |
4.3.3 AST1对GT元件的识别及验证 | 第97-100页 |
4.3.4 盐和渗透胁迫下AST1基因对下游基因的表达调控 | 第100-102页 |
4.4 本章小结与讨论 | 第102-104页 |
结论 | 第104-106页 |
参考文献 | 第106-115页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第115-116页 |
致谢 | 第116-117页 |
附录 | 第117-131页 |