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拟南芥Trihelix转录因子AST1调控植物抗旱、耐盐的机制研究

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
1 绪论第10-22页
    1.1 引言第10页
    1.2 植物抗逆研究状况第10-13页
        1.2.1 植物逆境的概念第10-11页
        1.2.2 生物胁迫第11页
        1.2.3 非生物胁迫第11-12页
        1.2.4 生物胁迫与非生物胁迫间的联系第12-13页
    1.3 抗逆相关转录因子的研究状况第13-19页
        1.3.1 转录因子的结构与抗逆功能研究第13-16页
        1.3.2 转录因子在非生物胁迫中的调控途径第16-17页
        1.3.3 转录因子与DNA作的研究方法第17-19页
    1.4 植物Trihelix转录因子的研究进展第19-21页
        1.4.1 Trihelix转录因子的结构特征及生物功能第19-20页
        1.4.2 Trihelix转录因子对逆境胁迫的响应能力第20-21页
        1.4.3 Trihelix转录因子所识别的顺式作用元件第21页
    1.5 研究的目的和意义第21-22页
2 拟南芥AST1的时空表达模式及亚细胞定位第22-40页
    2.1 实验材料第22-23页
        2.1.1 植物材料第22页
        2.1.2 菌株与载体第22页
        2.1.3 主要试剂第22页
        2.1.4 培养基及药品的配置第22-23页
    2.2 实验方法第23-30页
        2.2.1 GUS染色分析AST1的组织特异性表达第23-28页
        2.2.2 盐和渗透胁迫下,qRT-PCR分析AST1基因的表达模式第28页
        2.2.3 盐和渗透胁迫下,GUS染色分析AST1基因的表达第28-29页
        2.2.4 AST1蛋白的亚细胞定位第29-30页
    2.3 结果与分析第30-38页
        2.3.1 AST1的组织特异性表达第30-34页
        2.3.2 盐和渗透胁迫处理下,AST1基因的表达第34-36页
        2.3.3 AST1蛋白的亚细胞定位第36-38页
    2.4 本章小结与讨论第38-40页
3 拟南芥AST1基因的抗逆功能研究第40-72页
    3.1 实验材料第40-41页
        3.1.1 植物材料第40页
        3.1.2 菌株与载体第40页
        3.1.3 主要试剂第40页
        3.1.4 培养基及药品的配置第40-41页
    3.2 实验方法第41-48页
        3.2.1 AST1过表达载体的构建及转基因植株鉴定第41-43页
        3.2.2 纯合突变体植株的筛选第43页
        3.2.3 盐和渗透胁迫下,AST1基因抗逆生理分析第43-48页
    3.3 结果与分析第48-70页
        3.3.1 AST1过表达株系及纯合突变体的获得第48-52页
        3.3.2 AST1基因提高了植物的抗逆性第52-55页
        3.3.3 应对非生物胁迫AST1负向调控气孔的关闭第55-58页
        3.3.4 应对非生物胁迫AST1对Na~+和K~+平衡的调控分析第58-61页
        3.3.5 盐和渗透胁迫下细胞膜损伤分析第61-63页
        3.3.6 应对非生物胁迫AST1提高植物对活性氧的清除能力第63-66页
        3.3.7 应对非生物胁迫AST1对脯氨酸合成调控分析第66-68页
        3.3.8 应对非生物胁迫AST1对海藻糖的合成调控分析第68页
        3.3.9 LEA家族基因在不同株系的表达第68-70页
    3.4 本章小结和讨论第70-72页
4 拟南芥AST1识别的顺式作用元件及对下游基因的表达调控分析第72-104页
    4.1 实验材料第72-73页
        4.1.1 植物材料第72页
        4.1.2 菌株与载体第72页
        4.1.3 主要试剂第72页
        4.1.4 培养基及药品的配置第72-73页
    4.2 实验方法第73-89页
        4.2.1 转录组分析第73-74页
        4.2.2 AST1基因作用元件预测第74页
        4.2.3 酵母单杂交实验验证AST1基因与元件的结合第74-79页
        4.2.4 GUS酶活验证AST1与元件的互作分析第79-81页
        4.2.5 EMSA分析AST1对元件的识别第81-85页
        4.2.6 ChIP分析AST1对元件的识别及对基因的表达调控第85-89页
    4.3 结果与分析第89-102页
        4.3.1 AST1过表达与突变体植株的差异表达基因分析第89-92页
        4.3.2 AGAG-box顺式作用元件的预测及识别验证第92-97页
        4.3.3 AST1对GT元件的识别及验证第97-100页
        4.3.4 盐和渗透胁迫下AST1基因对下游基因的表达调控第100-102页
    4.4 本章小结与讨论第102-104页
结论第104-106页
参考文献第106-115页
攻读学位期间发表的学术论文第115-116页
致谢第116-117页
附录第117-131页

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