| 致谢 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 烤烟氮素营养研究现状 | 第10-12页 |
| 1.1.1 氮素营养和烤烟产量、品质的关系 | 第10-11页 |
| 1.1.2 烤烟碳氮代谢的关系 | 第11页 |
| 1.1.3 烤烟氮素状况检测的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 谷氨酰胺合成酶(GS)研究进展 | 第12-16页 |
| 1.2.1 GS同工酶的种类、组装、定位及功能 | 第12-13页 |
| 1.2.2 GS同工酶时空分布的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2.3 GS同工酶基因表达的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.4 GS同工酶与氮素利用效率的关系 | 第15-16页 |
| 1.3 植物氮效率的基因型差异及原因 | 第16-18页 |
| 1.3.1 氮效率的基因型差异 | 第16-17页 |
| 1.3.2 氮效率差异的生理与分子基础 | 第17-18页 |
| 1.4 植物叶片氨挥发研究进展 | 第18-20页 |
| 2 引言 | 第20-21页 |
| 3 材料与方法 | 第21-25页 |
| 3.1 试验材料与设计 | 第21页 |
| 3.1.1 烟叶成熟期GS同工酶的表达差异及其与氮素代谢的关系 | 第21页 |
| 3.1.2 GS同工酶活性与烤烟品种适宜氮用量研究 | 第21页 |
| 3.2 测定项目与方法 | 第21-24页 |
| 3.2.1 GS同工酶基因表达丰度的测定 | 第21-22页 |
| 3.2.1.1 RNA提取及cDNA合成 | 第21-22页 |
| 3.2.1.2 氮代谢酶qRT-PCR引物设计及过程 | 第22页 |
| 3.2.2 GS同工酶相对分子量及聚合方式的测定 | 第22页 |
| 3.2.2.1 Native-PAGE | 第22页 |
| 3.2.2.2 Bluenative PAGE(BNE) | 第22页 |
| 3.2.3 GS同工酶蛋白亚基的测定(Western-blot) | 第22-23页 |
| 3.2.4 氮代谢相关酶活性的测定 | 第23页 |
| 3.2.4.1 谷氨酰胺合成酶(GS)活性的测定 | 第23页 |
| 3.2.4.2 谷氨酸脱氢酶(GDH)活性的测定 | 第23页 |
| 3.2.4.3 硝酸还原酶(NR)活性的测定 | 第23页 |
| 3.2.5 氮代谢相关氮素营养指标的测定 | 第23页 |
| 3.2.6 质外体的提取与测定 | 第23-24页 |
| 3.2.6.1 质外体的提取 | 第23-24页 |
| 3.2.6.2 质外体NH_4~+浓度和pH的测定 | 第24页 |
| 3.2.6.3 氨气补偿点的计算 | 第24页 |
| 3.2.7 氨气挥发量的测定 | 第24页 |
| 3.2.8 烤烟叶片超微结构的观察 | 第24页 |
| 3.2.9 烤烟叶片叶绿素含量的测定 | 第24页 |
| 3.3 数据处理 | 第24-25页 |
| 4 结果与分析 | 第25-46页 |
| 4.1 烟叶成熟期GS同工酶的表达差异及其与氮素代谢的关系 | 第25-38页 |
| 4.1.1 烟叶成熟期叶片超微结构和叶绿素含量动态变化 | 第25-28页 |
| 4.1.1.1 烟叶成熟期叶片超微结构差异分析 | 第25-27页 |
| 4.1.1.2 烟叶成熟期质体色素含量差异分析 | 第27-28页 |
| 4.1.2 烟叶成熟期GS同工酶基因表达的差异分析 | 第28-29页 |
| 4.1.2.1 叶肉GS同工酶基因表达丰度动态变化 | 第28页 |
| 4.1.2.2 主脉GS同工酶基因表达丰度动态变化 | 第28-29页 |
| 4.1.3 烟叶成熟期GS同工酶蛋白亚基含量的差异分析 | 第29-33页 |
| 4.1.3.1 烟叶GS同工酶相对分子量及聚合方式分析 | 第29-30页 |
| 4.1.3.2 烟叶GS同工酶蛋白亚基含量的差异分析 | 第30-32页 |
| 4.1.3.3 烟叶GS同工酶蛋白亚基相对含量分析 | 第32-33页 |
| 4.1.4 烟叶成熟期氮代谢酶活性的变化动态 | 第33-34页 |
| 4.1.5 烟叶成熟期NH_4~+浓度、总氮和可溶性蛋白含量的变化动态 | 第34-35页 |
| 4.1.6 烟叶成熟期质外体相关生理指标和氨气挥发量的动态变化 | 第35-36页 |
| 4.1.7 烟叶成熟期GS同工酶的蛋白亚基含量与生理指标的相关性分析 | 第36-38页 |
| 4.1.7.1 叶肉GS同工酶的蛋白亚基含量与其它生理指标的相关性分析 | 第36-37页 |
| 4.1.7.2 主脉GS同工酶的蛋白亚基含量与其它生理指标的相关性分析 | 第37-38页 |
| 4.2 GS同工酶活性与烤烟品种适宜氮用量研究 | 第38-46页 |
| 4.2.1 施氮量对烟叶成熟期GS同工酶蛋白亚基含量的影响 | 第38-39页 |
| 4.2.1.1 不同施氮量GS1同工酶蛋白亚基含量差异 | 第38页 |
| 4.2.1.2 不同施氮量GS2同工酶蛋白亚基含量差异 | 第38-39页 |
| 4.2.2 施氮量对烟叶成熟期总氮和游离氨基酸含量的影响 | 第39-40页 |
| 4.2.3 施氮量对烟叶成熟期氮代谢酶活性的影响 | 第40-42页 |
| 4.2.4 施氮量对烟叶成熟期质外体铵离子浓度和氨气挥发量的影响 | 第42-43页 |
| 4.2.5 施氮量对烟叶化学成分含量的影响 | 第43-44页 |
| 4.2.6 施氮量对烟叶感官质量评价的影响 | 第44页 |
| 4.2.7 施氮量对不同烤烟品种经济性状的影响 | 第44-46页 |
| 5 讨论 | 第46-52页 |
| 5.1 烟叶成熟期GS同工酶的表达差异及其与氮素代谢的关系 | 第46-50页 |
| 5.1.1 烟叶成熟期GS同工酶基因表达的差异 | 第46页 |
| 5.1.2 烟叶成熟期GS同工酶活性的差异 | 第46-47页 |
| 5.1.3 烟叶成熟期GS同工酶相对比活力的差异 | 第47页 |
| 5.1.4 烟叶成熟期氮代谢酶活性的差异 | 第47-48页 |
| 5.1.5 烟叶成熟期氮代谢物含量的差异 | 第48页 |
| 5.1.6 烟叶成熟期质外体生理指标及氨气挥发量的差异 | 第48-49页 |
| 5.1.7 小结 | 第49-50页 |
| 5.2 GS同工酶活性的测定与烤烟品种适宜氮用量研究 | 第50-52页 |
| 5.2.1 不同氮用量条件下品种氮代谢特性的差异 | 第50-51页 |
| 5.2.2 不同氮用量条件下品种常规化学成分、感官质量和经济性状的差异 | 第51页 |
| 5.2.3 小结 | 第51-52页 |
| 6 结论 | 第52-53页 |
| 6.1 烟叶成熟期GS同工酶的表达差异及其与氮素代谢的关系 | 第52页 |
| 6.2 GS同工酶活性与烤烟品种适宜氮用量研究 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-63页 |
| 英文摘要 | 第63-65页 |
