| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语/符号说明 | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-17页 |
| 研究现状、成果 | 第14-16页 |
| 研究目的、方法 | 第16-17页 |
| 一、有氧糖酵解通过维持细胞内质子平衡来支持细胞存活 | 第17-57页 |
| 1.1 对象和方法 | 第17-25页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 1.1.1.1 质粒载体 | 第17页 |
| 1.1.1.2 细胞系 | 第17页 |
| 1.1.1.3 主要试剂和耗材 | 第17-19页 |
| 1.1.2 实验方法及步骤 | 第19-25页 |
| 1.1.2.1 质粒构建 | 第19页 |
| 1.1.2.2 慢病毒制备及感染细胞 | 第19-20页 |
| 1.1.2.3 WesternBlotting步骤 | 第20页 |
| 1.1.2.4 检测细胞内ATP含量步骤 | 第20-21页 |
| 1.1.2.5 固定细胞荧光成像步骤 | 第21页 |
| 1.1.2.6 评估溶酶体酸化的方法 | 第21页 |
| 1.1.2.7 细胞死亡检测步骤 | 第21页 |
| 1.1.2.8 细胞内pH值检测步骤 | 第21-22页 |
| 1.1.2.9 细胞内氨基酸,延胡索酸,NADH/NAD+检测步骤 | 第22页 |
| 1.1.2.10 乳酸检测步骤 | 第22页 |
| 1.1.2.11 氧气消耗检测步骤 | 第22页 |
| 1.1.2.12 代谢产物同位素标记检测步骤 | 第22-25页 |
| 1.2 结果 | 第25-50页 |
| 1.2.1 TNF-α促进MCF7细胞发生葡萄糖剥夺诱导的细胞坏死 | 第25-27页 |
| 1.2.2 线粒体损伤促进葡萄糖剥夺诱导的细胞坏死 | 第27-32页 |
| 1.2.3 无糖条件下线粒体生成ATP对TNF-α诱导的细胞坏死是必须的 | 第32-35页 |
| 1.2.4 线粒体生成ATP的相关代谢过程对于TNFα诱导细胞坏死起着决定性作用 | 第35-39页 |
| 1.2.5 促进线粒体ATP生成的质子稳态对TNF-α促进的细胞坏死起决定性作用 | 第39-44页 |
| 1.2.6 在葡萄糖缺乏的情况下,线粒体ATP生成驱动严重的溶酶体碱化是TNF-α促进细胞坏死所必须的 | 第44-47页 |
| 1.2.7 葡萄糖是维持质子稳态的重要来源 | 第47-50页 |
| 1.3 讨论 | 第50-52页 |
| 1.4 小结 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
| 二、有氧糖酵解维持细胞外质子平衡来促进体内肿瘤生长 | 第57-81页 |
| 2.1 对象和方法 | 第57-63页 |
| 2.1.1 质粒构建 | 第57-58页 |
| 2.1.2 细胞存活和增殖分析 | 第58页 |
| 2.1.3 构建PKM敲除细胞系 | 第58页 |
| 2.1.4 动物实验 | 第58页 |
| 2.1.5 免疫组化步骤 | 第58-59页 |
| 2.1.6 代谢平衡状态分析 | 第59-60页 |
| 2.1.7 代谢产物分析和同位素追踪分析 | 第60-61页 |
| 2.1.8 葡萄糖摄取和乳酸分泌检测 | 第61-63页 |
| 2.2 结果 | 第63-78页 |
| 2.2.1 表明瓦伯格效应重要作用的质子平衡的代谢模型 | 第63-66页 |
| 2.2.2 PKM1和PKM2都可以调节乳酸的分 | 第66-70页 |
| 2.2.3 反瓦伯格效应主要由基质中的PKM2介导 | 第70-72页 |
| 2.2.4 PKM2抑制葡萄糖进入乙酰辅酶A的路径 | 第72-74页 |
| 2.2.5 PKM2促进谷氨酰胺转换成乙酰辅酶A | 第74-78页 |
| 2.3 讨论 | 第78-80页 |
| 2.4 小结 | 第80-81页 |
| 全文结论 | 第81-82页 |
| 论文创新点 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-85页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第85-86页 |
| 综述 肿瘤细胞葡萄糖代谢特征概述 | 第86-113页 |
| 综述参考文献 | 第102-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 个人简历 | 第114页 |
