| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-19页 |
| 1.1 课题的提出 | 第10-11页 |
| 1.2 前人研究进展 | 第11-18页 |
| 1.2.1 柿原花青素概述 | 第11-15页 |
| 1.2.2 GST基因家族 | 第15-16页 |
| 1.2.3 植物遗传转化技术 | 第16-17页 |
| 1.2.4 启动子结构与分类 | 第17页 |
| 1.2.5 酵母单杂交系统的建立 | 第17-18页 |
| 1.3 本课题目的和研究内容 | 第18-19页 |
| 2 材料方法 | 第19-38页 |
| 2.1 材料 | 第19页 |
| 2.1.1 植物试材 | 第19页 |
| 2.1.2 菌种及质粒 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-38页 |
| 2.2.1 柿果肉、叶片单宁含量测定 | 第19-20页 |
| 2.2.2 总RNA提取及cDNA合成 | 第20-21页 |
| 2.2.3 实时定量PCR | 第21-22页 |
| 2.2.4 DkGST1系统进化分析 | 第22页 |
| 2.2.5 超表达、干涉表达载体构建 | 第22-26页 |
| 2.2.6 柿叶片瞬时遗传转化 | 第26页 |
| 2.2.7 DkGST1-YFP101亚细胞定位载体构建 | 第26-28页 |
| 2.2.8 DNA酶切库构建 | 第28-30页 |
| 2.2.9 染色体步移法扩增启动子 | 第30-31页 |
| 2.2.10 GUS载体构建 | 第31-33页 |
| 2.2.11 pGST-AbAi载体构建 | 第33-34页 |
| 2.2.12 Y1HGold[pGST-AbAi]菌株构建 | 第34-36页 |
| 2.2.13 诱饵菌株AbA~r基因本底表达水平检测 | 第36页 |
| 2.2.14 酵母文库筛选 | 第36-38页 |
| 3 结果分析 | 第38-50页 |
| 3.1 柿果实发育过程原花青素含量变化 | 第38-39页 |
| 3.2 柿DkGST1的分离与序列分析 | 第39-40页 |
| 3.3 不同脱涩类型柿品种果实DkGST1的时空表达模式 | 第40-42页 |
| 3.3.1 总RNA提取及检测 | 第40页 |
| 3.3.2 不同脱涩类型柿果发育过程中DkGST1表达模式 | 第40-41页 |
| 3.3.3 ‘鄂柿1号’不同组织DkGST1表达模式 | 第41-42页 |
| 3.4 DkGST1的亚细胞定位 | 第42-43页 |
| 3.4.1 DkGST1-YFP101亚细胞定位 | 第42-43页 |
| 3.5 农杆菌介导的瞬时遗传转化 | 第43-44页 |
| 3.5.1 DkGST1与‘鄂柿1号’叶片可溶性单宁积累的关系 | 第43页 |
| 3.5.2 DkGST1对原花青素合成代谢途径相关基因的影响 | 第43-44页 |
| 3.6 启动子序列获取 | 第44-46页 |
| 3.6.1 染色体步移法扩增启动子 | 第44-45页 |
| 3.6.2 启动子顺式作用元件分析 | 第45-46页 |
| 3.7 启动子转录活性分析 | 第46页 |
| 3.8 启动子酵母文库筛选 | 第46-50页 |
| 3.8.1 pGST-AbAi载体构建 | 第46-48页 |
| 3.8.2 诱饵菌株AbA~r基因本底表达水平检测 | 第48-49页 |
| 3.8.3 Y1HGold[pGST-AbAi]文库筛选 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 5 进一步工作的设想 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 附录 | 第62-67页 |
| 作者简历及在学期间的科研活动 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
