| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第13-32页 |
| 1.1 COX-2的基本特性 | 第13-19页 |
| 1.1.1 COX-2基因的结构组成及表达调控 | 第14-17页 |
| 1.1.1.1 COX-2基因的结构组成 | 第14-15页 |
| 1.1.1.2 COX-2的转录水平调节 | 第15页 |
| 1.1.1.3 COX-2的转录后调节 | 第15-16页 |
| 1.1.1.4 COX-2的翻译后调节 | 第16-17页 |
| 1.1.2 COX-2的蛋白结构 | 第17-18页 |
| 1.1.3 COX-2的催化机制 | 第18-19页 |
| 1.2 COX-2的生理作用 | 第19-23页 |
| 1.2.1 COX-2与炎症 | 第19-20页 |
| 1.2.2 COX-2与肿瘤 | 第20-22页 |
| 1.2.3 COX-2与血管生成 | 第22-23页 |
| 1.3 COX-2抑制剂 | 第23-24页 |
| 1.3.1 COX-2抑制剂的发展 | 第23页 |
| 1.3.2 COX抑制剂的研究现状 | 第23-24页 |
| 1.4 单链抗体的研究进展 | 第24-27页 |
| 1.4.1 单链抗体的制备 | 第25-26页 |
| 1.4.2 单链抗体的修饰 | 第26页 |
| 1.4.3 单链抗体的应用前景 | 第26-27页 |
| 1.5 抗原-抗体相互作用分析 | 第27-30页 |
| 1.5.1 抗原表位 | 第27-28页 |
| 1.5.2 噬菌体展示技术预测抗原表位 | 第28-29页 |
| 1.5.3 计算机模拟在抗原表位预测中的应用 | 第29-30页 |
| 1.5.3.1 同源建模 | 第29-30页 |
| 1.5.3.2 分子对接 | 第30页 |
| 1.6 本论文的立题目的及意义 | 第30-32页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第32-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-37页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第32页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第32-33页 |
| 2.1.3 各种试剂的配置 | 第33-36页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第36页 |
| 2.1.5 生物学软件 | 第36-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-45页 |
| 2.2.1 重组人COX-2蛋白的表达纯化与活性分析 | 第37-38页 |
| 2.2.1.1 粗制包涵体的制备 | 第37页 |
| 2.2.1.2 粗制包涵体的洗涤与变性 | 第37页 |
| 2.2.1.3 目的蛋白的亲和纯化与复性 | 第37-38页 |
| 2.2.1.4 ELISA法检测重组人COX-2蛋白的活性 | 第38页 |
| 2.2.2 抗COX-2单链抗体的可溶性表达、纯化与活性分析 | 第38-39页 |
| 2.2.2.1 抗COX-2单链抗体的表达纯化 | 第38页 |
| 2.2.2.2 ELISA法检测纯化的单链抗体与COX-2的结合活性 | 第38-39页 |
| 2.2.3 温度梯度ELISA验证COX-2的表位类型 | 第39页 |
| 2.2.4 噬菌体随机环七肽库筛选与抗COX-2单链抗体结合的小肽 | 第39-43页 |
| 2.2.4.1 环七肽库的筛选 | 第39-40页 |
| 2.2.4.2 阳性噬菌体克隆的结合活性鉴定 | 第40-41页 |
| 2.2.4.3 环七肽序列的确定 | 第41-43页 |
| 2.2.5 计算机模拟与分子对接 | 第43-45页 |
| 2.2.5.1 抗COX-2单链抗体三维结构的同源建模 | 第43页 |
| 2.2.5.2 小肽构象的优化 | 第43-44页 |
| 2.2.5.3 抗COX-2单链抗体与环七肽的分子对接 | 第44-45页 |
| 第三章 实验结果 | 第45-63页 |
| 3.1 成功制备重组人COX-2抗原蛋白 | 第45-46页 |
| 3.1.1 成功纯化了原核表达的重组人COX-2抗原蛋白 | 第45-46页 |
| 3.1.2 纯化的重组人COX-2抗原蛋白的鉴定 | 第46页 |
| 3.2 成功制备抗COX-2人源单链抗体 | 第46-48页 |
| 3.2.1 抗COX-2人源单链抗体的纯化 | 第46-47页 |
| 3.2.2 抗COX-2人源单链抗体的鉴定 | 第47-48页 |
| 3.3 温度梯度ELISA分析COX-2的表位类型 | 第48-49页 |
| 3.4 噬菌体随机环七肽库筛选与抗COX-2单链抗体结合的小肽 | 第49-54页 |
| 3.4.1 特异性结合单链抗体OX-1的噬菌体环七肽的筛选和富集 | 第49-50页 |
| 3.4.2 噬菌体阳性克隆的鉴定 | 第50-52页 |
| 3.4.3 噬菌体阳性克隆的序列测定 | 第52-54页 |
| 3.5 抗COX-2单链抗体特异性结合噬菌体小肽的序列分析 | 第54-56页 |
| 3.6 同源建模与分子对接 | 第56-63页 |
| 3.6.1 OX-1的同源建模 | 第56-57页 |
| 3.6.2 小肽构象的获得 | 第57-59页 |
| 3.6.3 OX-1与小肽的分子对接 | 第59-63页 |
| 第四章 讨论 | 第63-67页 |
| 4.1 抗COX-2单链抗体与抗原相互作用的表位预测 | 第63-64页 |
| 4.2 抗COX-2单链抗体的分子作用机制 | 第64-67页 |
| 第五章 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
