| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 绪论 | 第14-36页 |
| 1.1 核酸适体简介 | 第14-26页 |
| 1.1.1 SELEX技术 | 第14-18页 |
| 1.1.2 DNA适体和RNA适体 | 第18-21页 |
| 1.1.3 核酸适体相对于抗体的优缺点 | 第21-23页 |
| 1.1.4 核酸适体应用中的挑战以及解决办法 | 第23-26页 |
| 1.2 核酸适体用于生物标志物的鉴定和寻找可药用位点 | 第26-28页 |
| 1.2.1 核酸适体用于疾病标志物的鉴定 | 第26-27页 |
| 1.2.2 核酸适体用于合理药物筛选和可药用部位的发现 | 第27-28页 |
| 1.3 核酸适体作为治疗剂或运送治疗剂和构建荧光探针的应用 | 第28-30页 |
| 1.3.1 核酸适体本身作为治疗剂 | 第28页 |
| 1.3.2 核酸适体用于靶向递送治疗剂 | 第28-29页 |
| 1.3.3 基于核酸适体构建靶向荧光成像探针 | 第29-30页 |
| 1.4 基于核酸适体的功能化纳米材料用于生物诊疗研究 | 第30-33页 |
| 1.5 本研究论文的构想 | 第33-36页 |
| 第2章 基于核酸适体和上转换发光纳米材料的靶向光动力治疗 | 第36-51页 |
| 2.1 前言 | 第36-37页 |
| 2.2 实验部分 | 第37-41页 |
| 2.2.1 试剂与仪器 | 第37-38页 |
| 2.2.2 DNA的合成 | 第38页 |
| 2.2.3 缓冲液 | 第38页 |
| 2.2.4 细胞培养 | 第38-39页 |
| 2.2.5 上转换纳米颗粒的制备 | 第39页 |
| 2.2.6 制备G4-sgc8与PEI-UCNPs的交联体 | 第39-40页 |
| 2.2.7 圆二色谱法表征 | 第40页 |
| 2.2.8 紫外吸收滴定表征 | 第40页 |
| 2.2.9 琼脂糖凝胶电泳表征 | 第40页 |
| 2.2.10 测定单线态氧(SOG) | 第40页 |
| 2.2.11 流式细胞分析实验 | 第40-41页 |
| 2.2.12 细胞成像 | 第41页 |
| 2.2.13 细胞存活率研究 | 第41页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第41-50页 |
| 2.3.1 纳米探针体系设计原理 | 第41-42页 |
| 2.3.2 TMPyP4光敏剂嵌入G4结构的考察 | 第42-43页 |
| 2.3.3 纳米材料的表征 | 第43-45页 |
| 2.3.4 纳米探针的光学性质 | 第45-46页 |
| 2.3.5 纳米探针的流式细胞仪分析 | 第46-47页 |
| 2.3.6 细胞成像实验 | 第47页 |
| 2.3.7 细胞毒性实验 | 第47-50页 |
| 2.4 小结 | 第50-51页 |
| 第3章 基于上转换发光纳米材料原位生长二氧化锰的纳米诊疗探针的制备 | 第51-72页 |
| 3.1 前言 | 第51-53页 |
| 3.2 实验部分 | 第53-55页 |
| 3.2.1 试剂与仪器 | 第53页 |
| 3.2.2 上转换发光纳米颗粒的制备 | 第53-54页 |
| 3.2.3 实验组和对照组 | 第54页 |
| 3.2.4 UCNPs@MnO2的光谱实验 | 第54-55页 |
| 3.2.5 MnO_2纳米片的制备 | 第55页 |
| 3.2.6 UCNPs@MnO_2作为MRI造影剂对GSH的响应分析 | 第55页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第55-71页 |
| 3.3.1 上转换纳米材料的合成和表征 | 第55页 |
| 3.3.2 上转换发光纳米材料表面原位生长沉淀物 | 第55-59页 |
| 3.3.3 MnO_2纳米片的表征 | 第59页 |
| 3.3.4 UCNPs表面生长的沉淀物的鉴定 | 第59-61页 |
| 3.3.5 FT-IR光谱法研究油酸配体在不同时间的被氧化过程 | 第61-62页 |
| 3.3.6 热重分析法研究油酸配体被氧化的程度 | 第62-64页 |
| 3.3.7 UCNPs表面生长MnO_2的机理研究 | 第64-66页 |
| 3.3.8 UCNPs@MnO_2在PBS中的分散性研究 | 第66-67页 |
| 3.3.9 UCNPs@MnO_2的化学性质的研究 | 第67-71页 |
| 3.4 小结 | 第71-72页 |
| 第4章 基于核酸适体的多功能可激活双模式纳米诊疗探针的构建及应用 | 第72-91页 |
| 4.1 前言 | 第72-74页 |
| 4.2 实验部分 | 第74-78页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第74-75页 |
| 4.2.2 细胞培养 | 第75页 |
| 4.2.3 UCNPs@MnO_2纳米材料的合成 | 第75页 |
| 4.2.4 UCNPs@MnO_2纳米材料在正常人全血中的核磁信号的检测 | 第75页 |
| 4.2.5 UCNPs@MnO_2纳米颗粒表面包裹介孔二氧化硅的制备 | 第75页 |
| 4.2.6 阿霉素的装载和表面包裹明胶堵孔 | 第75-76页 |
| 4.2.7 DNA的制备 | 第76页 |
| 4.2.8 靶向纳米诊疗探针的构建(sgc8-nanosystem) | 第76页 |
| 4.2.9 琼脂糖凝胶电泳实验 | 第76页 |
| 4.2.10 体外药物释放实验 | 第76页 |
| 4.2.11 细胞流式分析 | 第76-77页 |
| 4.2.12 双光子激光共聚焦扫描显微成像实验 | 第77页 |
| 4.2.13 sgc8-nanosystem作为MRI造影剂对GSH的响应分析 | 第77页 |
| 4.2.14 细胞核磁共振成像实验 | 第77页 |
| 4.2.15 细胞内锰含量的测量 | 第77-78页 |
| 4.2.16 细胞存活率研究 | 第78页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第78-89页 |
| 4.3.1 纳米诊疗探针设计原理 | 第78-79页 |
| 4.3.2 纳米材料的表征 | 第79-80页 |
| 4.3.3 纳米探针在正常人全血中的核磁信号分析 | 第80-81页 |
| 4.3.4 纳米探针在不同pH不同GSH条件下的核磁信号分析 | 第81-83页 |
| 4.3.5 纳米探针在不同pH不同GSH条件下的荧光响应分析 | 第83-85页 |
| 4.3.6 纳米探针的细胞靶向分析 | 第85-86页 |
| 4.3.7 纳米探针的细胞共定位研究 | 第86-87页 |
| 4.3.8 pH刺激释放行为研究 | 第87-88页 |
| 4.3.9 细胞存活率实验分析 | 第88-89页 |
| 4.4 小结 | 第89-91页 |
| 第5章 基于核酸适体与腺相关病毒的靶向基因转导研究 | 第91-112页 |
| 5.1 前言 | 第91-93页 |
| 5.2 实验部分 | 第93-99页 |
| 5.2.1 试剂与仪器 | 第93-95页 |
| 5.2.2 DNA的制备 | 第95页 |
| 5.2.3 G-sgc8aptamer的制备 | 第95-96页 |
| 5.2.4 氨基修饰的aptamer与AAV2载体偶联体的制备 | 第96-97页 |
| 5.2.5 FPLC纯化交联产物 | 第97页 |
| 5.2.6 BCA试剂盒测试AAV2蛋白浓度 | 第97页 |
| 5.2.7 G-sgc8组装体的稳定性测试 | 第97页 |
| 5.2.8 琼脂糖凝胶电泳实验 | 第97页 |
| 5.2.9 蛋白印记分析(Western blot)实验 | 第97-98页 |
| 5.2.10 流式细胞实验验证细胞表面结合情况 | 第98页 |
| 5.2.11 结合常数Kd的测试实验 | 第98页 |
| 5.2.12 细胞表面HSPG受体和PTK7受体的表达分析 | 第98-99页 |
| 5.2.13 基因转导实验 | 第99页 |
| 5.2.14 共聚焦激光扫描显微成像 | 第99页 |
| 5.2.15 体外细胞毒性实验 | 第99页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第99-111页 |
| 5.3.1 本章设计原理 | 第99-101页 |
| 5.3.2 G-sgc8纳米结构的表征 | 第101-102页 |
| 5.3.3 核酸适体与AAV2共价交联形成复合物的表征及纯化 | 第102-103页 |
| 5.3.4 G-sgc8纳米结构的稳定性研究 | 第103-104页 |
| 5.3.5 流式细胞仪分析特异性结合细胞能力 | 第104-105页 |
| 5.3.6 多加效应提高结合亲和力的机理解释 | 第105页 |
| 5.3.7 不同细胞表面HSPG蛋白和PTK-7蛋白的表达水平情况 | 第105-106页 |
| 5.3.8 G-sgc8-AAV2载体进入细胞后的共定位分析 | 第106-108页 |
| 5.3.9 交联剂对G-sgc8-AAV2载体基因转染细胞的影响 | 第108-109页 |
| 5.3.10 G-sgc8-AAV2载体对不同细胞系的基因转染效率研究 | 第109-111页 |
| 5.4 小结 | 第111-112页 |
| 总结 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-135页 |
| 附录A 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第135-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
